桑黄菌中环二肽C4的分离技术制造技术

本发明专利技术公开了一种桑黄菌（火木层孔菌Phellinusigniarius(LexFr)Quel、裂蹄木层孔菌phellinuslinteus(BerketCurt)Teng、鲍氏层孔菌、哈蒂针层孔菌Phellinushartigii(AlleschetSchnabl)Imaz）中环二肽C4的分离方法。首先制备桑黄菌粗提物，然后进行正相硅胶层析，然后是甲醇氯仿梯度洗脱，然后进行氯甲凝胶层析，再次进行正相硅胶层析，再次甲醇凝胶层析，最后是常压反相制备，经HPLC检测，1D-HNMR检测后，最终得到环二肽C4。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程制药领域。
技术介绍
桑黄(Phellinus)，子实体无柄，菌盖扁半球形或马蹄形，2_12*3_21厘米，厚1.5-10厘米，木质，浅肝褐色至暗灰色或黑色，老时常龟裂，无皮壳，初期有细微绒毛，后变无毛，有同心环棱.边缘钝，深肉桂色至浅咖啡色，下侧无子实层.菌肉深咖啡色，硬，木质.菌管与菌肉近同色，多层，但层次不明显，年老的菌管层充满白色菌丝.管口锈褐色至酱色，圆形，每毫米4-5个.孢子近球形，光滑，无色，5-6*3-4微米.刚毛顶端尖锐，基部膨大，10-25*5-7微米.菌丝不分枝，无横隔，直径3-5微米。目前，真菌产物的纯化方法较多，主要有分级沉淀法、制备性高效液相层析、柱层析法、超滤法、离心沉淀色谱法、等几种方法。而其中应用最多的当属柱层析法，分为两类:一是只有分子筛作用的凝胶柱层析，常用的凝胶有葡聚糖凝胶及琼脂糖凝胶。二是离子交换层析。但，主要用于分离多糖，透明质酸等，多数分离后得到的产物为混合物。本专利技术使用多种层析技术相结合，分离度高，应用此专利技术可以精致到纯品。
技术实现思路
本专利技术公开了一种桑黄菌(火木层孔菌igniarius (L ex 本文档来自技高网...

【技术保护点】
桑黄菌中环二肽C4的分离方法，其步骤顺序如下：(1)制备桑黄菌粗提物；(2)将上述步骤（1）所得的粗提物与正相硅胶混匀搅拌，并干燥，进行硅胶正相柱层析，用洗脱剂洗脱2?5次；?(3)收集上述步骤（2）中最后一次洗脱液，减压浓缩，使用甲醇与氯仿溶解，氯甲凝胶柱层析，用洗脱剂洗脱，使用TLC检测收集的洗脱液，适当合并洗脱液，减压干燥；(4)将步骤（3）中的产物再次进行一次正相硅胶层析，然后进行甲醇凝胶柱层析，用洗脱剂洗脱；(5)将步骤（4）中的产物进行反相硅胶层析，洗脱剂为甲醇和水；(6)收集洗脱液，HPLC检测，减压干燥，即为环二肽C4。

【技术特征摘要】
1.桑黄菌中环二肽C4的分离方法，其步骤顺序如下: (1)制备桑黄菌粗提物； (2)将上述步骤(I)所得的粗提物与正相硅胶混匀搅拌，并干燥，进行硅胶正相柱层析，用洗脱剂洗脱2-5次； (3)收集上述步骤(2)中最后一次洗脱液，减压浓缩，使用甲醇与氯仿溶解，氯甲凝胶柱层析，用洗脱剂洗脱，使用TLC检测收集的洗脱液，适当合并洗脱液，减压干燥； (4)将步骤(3)中的产物再次进行一次正相硅胶层析，然后进行甲醇凝胶柱层析，用洗脱剂洗脱； (5)将步骤(4)中的产物进行反相硅胶层析，洗脱剂为甲醇和水； (6)收集洗脱液，HPLC检测，减压干燥，即为环二肽C4。2.如权利要求1所述的一种从桑黄菌中分离苯乙醇的方法，其特征在于所述桑黄粗提物，由下述方法制得: (1)发酵培养基配方以克/100毫升计是:3.如权利要求1所述的桑黄菌中环二肽C4的分离方法，其特征在于所述的环二肽C4为环(L-脯氨酸-L-缬氨酸)。4.如权利要求1所述的桑黄菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋爱荣，赵晨，孙效乐，杨松，秦丹，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：