2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐的合成方法技术

本发明专利技术是2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐的合成方法，即ABTS的合成方法。包括如下步骤：以N-乙基苯胺为原料，与硫氰酸盐反应合成N-乙基-N-苯胺硫脲，经分离后与单质溴反应得到N-乙基-2亚胺基苯并噻唑氢溴酸盐，接着与水合肼反应获得关键中间体2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑)，再利用浓硫酸磺化，最后用氨水中和反应得到目标化合物ABTS。本方法具有操作简便、收率高、纯度高等优点。适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐的合成方法
本专利技术涉及一种合成方法，尤其涉及一种2,2'-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐的合成方法。技术背景自从Engvall和Perlman(1971)首次报道建立酶联免疫吸附试验(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssays,ELISA)以来，由于ELISA具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点，使其得到迅速的发展和广泛应用。尽管早期的ELISA由于特异性不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐，但随着方法的不断改进、材料的不断更新，尤其是采用基因工程方法制备包被抗原，采用针对某一抗原表位的单克隆抗体进行阻断ELISA试验，都大大提高了ELISA的特异性，加之电脑化程度极高的ELISA检测仪的使用，使ELISA更为简便实用和标准化，从而使其成为最广泛应用的检测方法之一。ABTS(2,2'-azinobis[3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonicacid]-diammoniumsalt)是一种水溶性HRP底物，在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在41本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种2?,2“?联氮?二(3?乙基?苯并噻唑?6?磺酸)二铵盐的合成方法，即ABTS的合成方法，其特征在于：本方法包括如下步骤：（1）?N?乙基苯胺与浓盐酸的混合物在搅拌下加入硫氰酸盐，在50?120℃下搅拌反应15?20小时，冷却结晶，过滤，重结晶，得到N?乙基?N?苯胺硫脲；（2）?搅拌下把溴素的有机溶液滴加到N?乙基?N?苯胺硫脲的有机溶液中，滴加完后，加热回流10?20小时，冷却后过滤干燥，得到N?乙基?2亚胺基苯并噻唑氢溴酸盐；（3）?搅拌下把质量分数为80%的水合肼滴加到N?乙基?2亚胺基苯并噻唑氢溴酸盐的乙醇溶液中，升温回流反应5?20小时，冷却、抽滤得到产品2?,2“?联氮?二...

【技术特征摘要】
1.一种2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐的合成方法，即ABTS二铵盐的合成方法，其特征在于：本方法包括如下步骤：(1)N-乙基苯胺与浓盐酸的混合物在搅拌下加入硫氰酸盐，在50-120℃下搅拌反应15-20小时，冷却结晶，过滤，重结晶，得到N-乙基-N-苯胺硫脲；(2)搅拌下把溴素的有机溶液滴加到N-乙基-N-苯胺硫脲的有机溶液中，滴加完后，加热回流10-20小时，冷却后过滤干燥，得到N-乙基-2-亚胺基苯并噻唑氢溴酸盐；(3)搅拌下把质量分数为80％的水合肼滴加到N-乙基-2-亚胺基苯并噻唑氢溴酸盐的乙醇溶液中，升温回流反应5-20小时，冷却、抽滤得到产品2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑)I；(4)搅拌下把2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑)加到质量分数30-99％浓硫酸溶液中，冷却后抽滤干燥，得到2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)∏；所述的2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑)与浓硫酸溶液质量比为1∶1到10∶1；(5)搅拌下往2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)的水溶液体系中不断充入氨气，冷却后抽滤干燥，得到目标化合物2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐III，即ABTS的二铵盐。2.根据权利要求1所述的2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐的合成方法，其特征在于，步骤(1)中所述的硫氰酸盐为硫氰酸钾、硫氰酸钠、硫氰酸氨中的一种。3.根据权利要求1所述的2，2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈军民，原唐军，张祎敏，
申请(专利权)人：江西师范大学，
类型：发明
国别省市：