钠/钾离子比检测方法、系统和试剂盒技术方案

技术编号:8592805 阅读:299 留言:0更新日期:2013-04-18 05:52
本发明专利技术涉及钠/钾离子比检测方法、系统和试剂盒。本发明专利技术涉及检测钠/钾离子比浓度的方法,包括:(1)配制钠/钾比不同的多个溶液样本,(2)将该多个溶液样本置于荧光光谱仪下,检测波长在第一、二波长处的荧光强度值,(3)获得钠/钾离子比的标准曲线;(4)将待测液体样品中加入带有荧光标记基团的在钠、钾离子存在下能够分别形成不同G-四链体结构的DNA分子,并调节样品pH值,从而得到测试溶液;(5)将测试溶液置于荧光光谱仪下,检测波长在所述第一、二波长处的荧光强度值;(6)利用步骤(5)中测得的中测得的第一波长处的荧光强度值与第二波长处的荧光强度值的比值钠/钾离子比标准曲线中找到对应的测试溶液的钠/钾离子浓度比。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域,具体而言涉及ー种钠/钾离子比检测方法、系统和试剂盒
技术介绍
人体内的钠、钾离子是维持细胞生理活动的主要阳离子,是保持机体的正常滲透压及酸碱平衡,參与糖及蛋白质代谢,保证神经肌肉的正常功能所必需,其含量是人体生理活动的重要指标。尿液、血清中钠 、钾离子的含量水平在临床上可用了诊断ー些肾脏、心脏等方面的疾病。人体内的钠钾离子水平处于ー个平衡状态,其比的改变对人体健康有着重要影响。对健康而言,监测钠/钾离子的比例可能比二者単独的绝对数值更重要。在临床上,通过检测唾液钠/钾离子比,可诊断醛固酮增多症。此外,美国学者近日研究证实24小时尿钠/钾离子比对心血管疾病风险的预测价值显著优于单纯的尿钠或尿钾检測。由此可见,钠/钾离子比的监测对预防心血管疾病具重要意义。现有技术中测定钠、钾离子浓度的方法主要有中子活化法、同位素稀释质谱法、化学測定法、火焰光度法、离子选择电极法、酶动力学法、原子分光光度法等。目前,临床上经常使用的方法是火焰光度法和离子选择电极法。(I)火焰光度法火焰光度法是ー种发射光谱分析法,利用火焰中激发态原子回降至基态时发射的光谱强度进行含量分析,可本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测液体样品中钠/钾离子比的方法,所述方法包括以下步骤:(1)用pH6.2~8.2的缓冲溶液和水溶性钠盐和钾盐配制钠/钾比不同的多个溶液样本,其中每个所述溶液样本中含有相同浓度的带有荧光标记基团的在钠、钾离子存在下能够分别形成不同G?四链体结构的DNA分子;(2)将所述多个溶液样本置于荧光光谱仪下,采用410nm至540nm的激发波长,检测波长在第一、二波长处的荧光强度值,其中所述第一波长在480nm至550nm范围,所述第二波长在551nm至700nm范围;(3)以所述溶液样本的钠/钾比作为横坐标或纵坐标,以步骤(2)中测得的第一波长处的荧光强度值与第二波长处的荧光强度值的比值为纵坐标或...

【技术特征摘要】
1.一种检测液体样品中钠/钾离子比的方法,所述方法包括以下步骤 (1)用PH6.2 8. 2的缓冲溶液和水溶性钠盐和钾盐配制钠/钾比不同的多个溶液样本,其中每个所述溶液样本中含有相同浓度的带有荧光标记基团的在钠、钾离子存在下能够分别形成不同G-四链体结构的DNA分子; (2)将所述多个溶液样本置于荧光光谱仪下,采用410nm至540nm的激发波长,检测波长在第一、二波长处的突光强度值,其中所述第一波长在480nm至550nm范围,所述第二波长在551nm至700nm范围; (3)以所述溶液样本的钠/钾比作为横坐标或纵坐标,以步骤(2)中测得的第一波长处的荧光强度值与第二波长处的荧光强度值的比值为纵坐标或横坐标作图,从而获得钠/钾离子比的标准曲线; (4)将待测液体样品中加入所述带有荧光标记基团的在钠、钾离子存在下能够分别形成不同G-四链体结构的DNA分子,并调节样品的pH值以使待测液体样品中的带有荧光标记基团的能够形成G-四链体的DNA分子的浓度以及pH值与步骤(I)中的溶液样本一致,从而得到测试溶液; (5)将步骤(4)中获得的测试溶液置于荧光光谱仪下,采用与步骤(2)相同的激发波长,检测波长在所述第一、二波长处的荧光强度值; (6)利用步骤(5)中测得的中测得的第一波长处的荧光强度值与第二波长处的荧光强度值的比值在步骤(3)中获得的钠/钾离子比标准曲线中找到对应的测试溶液的钠/钾离子浓度比。2.如权利要求1所述的方法,其中所述带有荧光标记基团的在钠、钾离子存在下能够分别形成不同G-四链体结构的DNA分子中含有下式I的结构GGYGGZGGMGG 式I 其中式I中的X、Y、Z、和M、N分别代表一个或多个任意碱基而代表鸟嘌呤碱基;所述荧光标记基团连接在所述DNA分子的两端,并且所述DNA分子两端的荧光标记基团不同;连接在所述DNA分子两端的荧光标记基团的组合选自以下荧光标记基团的组合6_羧基荧光素和6-羧基四甲基罗丹明、异硫氰酸荧光素和罗丹明、Cy3和Cy5或者Alexa488和Cy3。3.如权利要求1或2所述的方法,其中所述带有荧光标记基团的在钠、钾离子存在下能够分别形成不同G-四链体结构的DNA分子中的碱基序列为TTAGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG、AGGGTTAGGGTTAGGGTTAGGG、T GAGGGTGGGGAGGGT GGGGAA、AGGGAGGGC GC T GGGAGGAGGG、GGGCGCGGGAGGAATTGGGCGGG、 GGTTGGTGTGGTTGG、 TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG、GGGCGCGGGAGGAAGG...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙红霞唐亚林向俊锋杨千帆管爱娇刘岩
申请(专利权)人:中国科学院化学研究所
类型:发明
国别省市:

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