一种小麦胚芽脂肪酶的固定化方法技术

一种小麦胚芽脂肪酶的固定化方法，属于生物工程技术领域。本发明专利技术包括以下步骤：（1）用环氧氯丙烷活化载体，使载体带上环氧基；（2）用一种化合物将（1）中载体上的活化基团打开，载体带上连接基团；（3）将步骤（2）获得的载体通过连接物与小麦胚芽脂肪酶共价连接。本发明专利技术中固定化载体修饰和载体与酶共价结合条件温和，过程简单。通过该固定化方法大大提高了小麦胚芽脂肪酶的稳定性和重复利用次数，易于进行工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于生物工程

技术介绍
脂肪酶(EC 3.1.1. 3)是一种重要的水解酶类，在食品、药品、化工等行业得到广泛应用。脂肪酶种类很多，其中绝大多数来自于微生物，少数来自于动物，而极少数来自于植物。小麦胚芽脂肪酶是一种存在于小麦中的脂肪酶，由于其热稳定性以及在小麦发芽中的重要性，为大家所关注。一般认为小麦胚芽当中富含多种酶类，有α-淀粉酶、脂肪酶、酯酶、脂肪氧化酶和蛋白酶等，其中主要是脂肪酶以及酯酶；尤其是在发芽后所显示的酶活主要是脂肪酶酶活。小麦胚芽脂肪酶的存在对小麦胚芽的保藏是十分不利的，它能短时间内水解油月旨，使其脂肪酸值大幅度升高，引起麦胚酸败变质；同时，微生物生长繁殖快，也会导致麦胚出现结块、霉变和发酵等变质现象。所以，目前对小麦胚芽脂肪酶的研究大多集中在该酶在小麦胚芽中的稳定性以及如何快速降低其水解活性，防止麦胚酸化变质。对小麦胚芽脂肪酶用于催化生物反应过程研究相对较少，主要集中在手性拆分和油脂工业方面。据报道，小麦胚芽脂肪酶在立体选择性方面并 不符合Kazlauskas规则，呈现为反K氏规则，是现有唯一天然来源的反K氏规则的脂肪酶，这在手性拆分和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小麦胚芽脂肪酶的固定化方法，其特征在于步骤为：（1）用环氧氯丙烷活化载体，活化时添加水溶性助溶剂，使载体带上环氧基；所述载体为硅胶、琼脂糖、壳聚糖、葡聚糖、聚乙二醇中的一种或几种的混合物；载体在使用前需经浓盐酸浸泡后，用大量去离子水洗涤，抽滤干燥后待用；所述水溶性助溶剂选用：二甲亚砜、N,N?二甲基甲酰胺、二氧六环、乙腈、丙酮、正己烷中的一种或几种的混合物；环氧氯丙烷与载体的摩尔比为1?20:1；助溶剂加入量占总体系体积的5%?40%，环氧氯丙烷活化载体的温度为30?50℃，活化时间为1?8h；?载体与小麦胚芽脂肪酶的质量比为1?100:1；（2）用一种带有氨基的化合物将步骤（1）已活化载...

【技术特征摘要】
1.一种小麦胚芽脂肪酶的固定化方法，其特征在于步骤为 (1)用环氧氯丙烷活化载体，活化时添加水溶性助溶剂，使载体带上环氧基； 所述载体为硅胶、琼脂糖、壳聚糖、葡聚糖、聚乙二醇中的一种或几种的混合物；载体在使用前需经浓盐酸浸泡后，用大量去离子水洗涤，抽滤干燥后待用； 所述水溶性助溶剂选用二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、二氧六环、乙腈、丙酮、正己烷中的一种或几种的混合物；环氧氯丙烷与载体的摩尔比为1-20:1 ;助溶剂加入量占总体系体积的5%-40%，环氧氯丙烷活化载体的温度为30-50°C，活化时间为l_8h ； 载体与小麦胚芽脂肪酶的质量比为1-100:1 ; (2)用一种带有氨基的化合物将步骤(I)已活化载体上的环氧基打开，使载体带上连接基团，即使环氧基在碱性条件下发生水解，形成氨基； 所述带有氨基的化合物选用氨水、1，2- 二氨基乙烷、3，3’- 二氨基二丙烷、1，6-己二胺、6-氨基己酸中的一种； 氨基化合物与环氧基摩尔比为1-100:1，氨基化温度为30-5...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏小乐，辛瑜，温小荣，杨继国，王武，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：