一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，该方法包括以下操作步骤：竹荪水提残渣的制备，多糖提取液的配置，竹荪水提残渣中多糖的提取，多糖提取液中水不溶性α-(1→3)-d-葡聚糖的去除，脱色，小分子杂质的去除，多糖的纯化，透析与冷冻干燥，抗氧化活性检测等。本发明专利技术不仅提供了一种成本低、高效、无污染的竹荪中抗氧化剂多糖的制备方法，而且提供了竹荪水提残渣综合加工利用的方法，拓展了竹荪的深加工领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及多糖领域，确切地说是一种竹荪水提残渣中高活性多糖的制备方法。
技术介绍
竹苏Dietyophora indusiata俗名有竹参、竹筌、面纱菌、网纱菌、竹姑娘，隶属于腹菌纲、鬼笔目、鬼笔科、竹荪属，是名贵的食用菌，历史上列为“宫廷贡品”，近代做为国宴名菜，为食疗佳品。据报道竹荪能补气养阴、润肺止咳、清热利湿，具有滋补强壮、益气补脑、宁神健体的功效；另外，竹荪能够保护肝脏，减少腹壁脂肪的积存，有俗称“刮油”的作用。现代医学研究表明其对高血压、神经衰弱、肠胃疾病等具有一定的保健作用。虽然竹荪很珍贵，但对竹荪的研究与开发利用并不充分，目前主要集中在竹荪的种植、化学成分的测定与药理活性检测等方面，而对竹荪的主要活性化学成分多糖的研究不多，也未见对竹荪水提残渣中高活性多糖分离纯化的报道。而本专利技术即是提供了一种竹荪水提残渣中高活性抗氧化剂多糖的制备方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。本专利技术通过以下方案实现 ，包括以下步骤 (1)竹荪水提残渣的制备将干燥的竹荪磨碎，过80-100目筛得竹荪粉末。称取一定质量的竹荪粉末并加入40-50倍蒸馏水，搅拌均匀后用普通高压锅提取1-2小时，过滤。滤渣重复上述提取步骤1-2次。过滤获得竹荪水提残渣； (2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合碱溶液； (3)竹荪水提残渣中多糖的提`取取一定量的竹荪水提残渣加入混合碱提液进行提取，用双层滤布过滤，滤液浓缩到原来体积的1/3-1/5后即得竹荪水提残渣的多糖提取液； (4)多糖提取液中水不溶性α-(1— 3)-d-葡聚糖的去除搅拌过程中加入冰乙酸，调节提取液的PH至6-7，离心去除α-(1 —3)_d型不溶的沉淀，上清液即为所需的β _D_葡聚糖； (5)脱色上清液用25-30%H202进行脱色； (6)小分子杂质的去除将脱色后的糖液浓缩到原来体积的1/3-1/4，彻底透析，透析液浓缩到原来体积的1/5-1/7后离心去除去沉淀，获得纯净的多糖浓缩液； (7)多糖的纯化把多糖浓缩液稀释到浓度为1_2%，按等体积往溶液中缓慢加入预冷分析纯丙酮，搅拌下将该混合液缓慢升温至45-50°C，保持2-3 h后，立即离心分出沉淀物； (8)透析与冷冻干燥把沉淀溶于蒸馏水中，用截留分子量3500Da的透析袋先对自来水透析3-4天，后用重蒸水透析2-3天。透析液浓缩后冷冻干燥即得干燥的竹荪多糖。(9)抗氧化活性检测取冻干的竹荪多糖进行体外清除· OH、O2-\ H2O2及DPPH的抗氧化试验。所述步骤(3)中混合碱提液的加入量为竹荪水提残渣的20-25倍，提取温度为25-30°C，提取时间为1-2 h，提取次数为2-3次。所述步骤(4)中乙酸的浓度为1-1. 5 mol/L,离心机转速5000-8000 rpm,离心时间为 15-30 Hiin0所述步骤(5)中加入H2O2的量为总体积的1/7-1/10，然后加热到40_50°C，保持2-3 ho所述步骤(6)中透析袋规格为3500 Da,自来水水透析5-6天,蒸懼水透析3-4天，离心机转速为8000-10000 rpm,离心时间为10-15 min。本专利技术的有益效果 (O提供一种简单、成本低、高效、无污染的竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法; (2)可实现竹荪水提残渣的充分利用，提高工业生产过程中的附加值； (3)拓展了竹荪的深加工领域，为竹荪的进一步开发利用提供参考。具体实施例方式竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法 (1)竹荪水提残渣的制备将干燥的竹荪磨碎，过80目筛获得竹荪粉末。称取一定质量的竹荪粉末并加入40倍蒸馏水， 搅拌均匀后用普通高压锅提取1. 5小时，过滤。滤渣重复上述提取步骤1-2次，过滤获得竹荪水提残渣； (2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合碱溶液； (3)竹荪水提残渣中多糖的提取取一定量的竹荪水提残渣加入20倍质量比的混合碱提液于25°C下提取2 h，用双层滤布过滤，滤渣重复提取I次，滤液浓缩到原来体积的1/4后即得竹荪水提残渣的多糖提取液； (4)、多糖提取液中水不溶性α-(1— 3)-d-葡聚糖的去除搅拌过程中加入I mol/L冰乙酸，调节提取液的pH到为7，然后于5000-8000 rpm转速下离心时间为15-30 min，离心去除α-(1 —3)-d型不溶的沉淀，上清液即为所需的β-D-葡聚糖； (5)脱色上清液加入总体积1/7-1/10的30%Η202，然后加热到50°C，保持2h，进行脱色 (6)小分子杂质的去除将脱色后的糖液浓缩为原来的1/3-1/4，用规格为3500Da透析袋对自来水水透析5天，蒸馏水透析3天，透析液浓缩到原来体积的1/10后于8000-10000 rpm转速下离心10 - 15 min去除去沉淀,获得纯净的多糖浓缩液； (7)多糖的纯化把多糖浓缩液稀释到1%，按等体积往溶液中缓慢加入预冷分析纯丙酮，搅拌下将该混合液缓慢升温至50°C，保持2 h后，立即离心分出沉淀物； (8)透析与冷冻干燥把沉淀溶于蒸馏水中，用截留分子量3500Da的透析袋先对自来水透析，后用重蒸水透析。透析液浓缩后冷冻干燥即得干燥的竹荪多糖。(9)、抗氧化活性检测取冻干的竹荪多糖进行体外清除· OH、O2-\ H2O2及DPPH的抗氧化试验。结果表明，竹荪多糖在浓度为2 mg/mL时对0H、02__、H2O2及DPPH的体外清除率达到86%、83%、74%和91%。说明竹荪多糖具有较强的清除氧自由基的能力，是一种天然高效的抗氧化 剂。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）竹荪水提残渣的制备：将干燥的竹荪磨碎，过80?100目筛得竹荪粉末；称取一定质量的竹荪粉末并加入40?50倍蒸馏水，搅拌均匀后用普通高压锅提取1?2小时，过滤，滤渣重复上述提取步骤1?2次，过滤获得竹荪水提残渣；（2）多糖提取液的配置：配制5%NaOH/0.05%?NaBH4?的混合碱溶液；（3）竹荪水提残渣中多糖的提取：取一定量的竹荪水提残渣加入混合碱提液进行提取，用双层滤布过滤，滤液浓缩到原来体积的1/3?1/5后即得竹荪水提残渣的多糖提取液；（4）多糖提取液中水不溶性α?(1→3)?d?葡聚糖的去除：搅拌过程中加入冰乙酸，调节提取液的pH至6?7，离心去除α?(1→3)?d?型不溶的沉淀，上清液即为所需的β?D?葡聚糖；（5）脱色：上清液用25?30%H2O2进行脱色；（6）小分子杂质的去除：将脱色后的糖液浓缩到原来体积的1/3?1/4，彻底透析，透析液浓缩到原来体积的1/5?1/7后离心去除去沉淀，获得纯净的多糖浓缩液；（7）多糖的纯化：把多糖浓缩液稀释到浓度为1?2%，按等体积往溶液中缓慢加入预冷分析纯丙酮，搅拌下将该混合液缓慢升温至45?50℃，保持2?3?h后，立即离心分出沉淀物；（8）透析与冷冻干燥：把沉淀溶于蒸馏水中，用截留分子量3500?Da的透析袋先对自来水透析3?4天，后用重蒸水透析2?3天；透析液浓缩后冷冻干燥即得干燥的竹荪多糖；（9）抗氧化活性检测：取冻干的竹荪多糖进行体外清除·OH、O2.?、H2O2及DPPH的抗氧化试验。...

【技术特征摘要】
1.一种竹荪水提残渣中抗氧化剂多糖的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)竹荪水提残渣的制备将干燥的竹荪磨碎，过80-100目筛得竹荪粉末； 称取一定质量的竹荪粉末并加入40-50倍蒸馏水，搅拌均匀后用普通高压锅提取1-2小时，过滤，滤渣重复上述提取步骤1-2次，过滤获得竹荪水提残渣； (2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合碱溶液； (3)竹荪水提残渣中多糖的提取取一定量的竹荪水提残渣加入混合碱提液进行提取，用双层滤布过滤，滤液浓缩到原来体积的1/3-1/5后即得竹荪水提残渣的多糖提取液； (4)多糖提取液中水不溶性a- (I — 3)-d-葡聚糖的去除搅拌过程中加入冰乙酸，调节提取液的PH至6-7，离心去除a-(l —3)_d型不溶的沉淀，上清液即为所需的P-D-葡聚糖； (5)脱色上清液用25-30%H202进行脱色； (6)小分子杂质的去除将脱色后的糖液浓缩到原来体积的1/3-1/4，彻底透析，透析液浓缩到原来体积的1/5-1/7后离心去除去沉淀，获得纯净的多糖浓缩液； (7)多糖的纯化把多糖浓缩液稀释到浓度为1_2%，按等体积往溶液中缓慢加入预冷分析纯丙酮，搅拌下将该混合液缓慢升温至45-50°C，保持2-3 h后，立即离心分...

【专利技术属性】
技术研发人员：王军辉，孙汉巨，刘咏，李军红，姚玉飞，单亮，孙克范，
申请(专利权)人：合肥工业大学，
类型：发明
国别省市：