一种检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的ELISA试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术属于动物免疫分析技术领域。具体涉及一种用于高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)检测的酶联免疫(ELISA)试剂盒及应用。本发明专利技术的方法主要包括免疫原、抗体的制备、包被原及酶标抗体的制备和ELISA检测方法的建立。本发明专利技术的试剂盒主要由抗PRRSVN蛋白特异性酶标记物、PRRSV标准阳性对照、包被有抗PRRSVN蛋白特异性单克隆抗体的酶标板组成。本发明专利技术的试剂盒具有简便、快速、灵敏、准确等特点，适用于对临床猪群中的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测。

【技术实现步骤摘要】
—种检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的ELISA试剂盒及应用
本专利技术属于动物免疫化学分析
具体涉及猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)的酶联免疫(ELISA)检测试剂盒与应用，本专利技术的试剂盒适用于临床猪群的猪繁殖与呼吸综合征病毒的快速检测。
技术介绍
猪繁殖与呼吸综合征(porcinereproductive and respiratory syndrome,简称 PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus，简称PRRSV)引起的一种严重危害养猪业的烈性传染病。以妊娠母猪流产、死产、弱胎、木乃伊胎等繁殖障碍及各年龄阶段猪的呼吸道症状为特征。1987年首次在美国发现，当时由于病原不清楚，故称为“猪神秘病”，又因为部分发病猪耳部发绀变紫，故又称之为“蓝耳病”。不久PRRS迅速在北美和欧洲暴发流行。1995年国内某些猪场发生了以流产、死胎等为主要症状的疫病，怀疑是由PRRSV引起的繁殖障碍性疾病。1996年中国农科院哈尔滨兽医研究所在国内分离到第一株PRRSV病毒(CH-1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体，其特征在于，它是由保藏号为CCTCC?NO：C201195和保藏号为CCTCC?NO：C201194的杂交瘤细胞N4D2和N3H12所分泌的。

【技术特征摘要】
1.一种检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的单克隆抗体，其特征在于，它是由保藏号为CCTCC NO C201195和保藏号为CCTCC NO C201194的杂交瘤细胞N4D2和N3H12所分泌的。2.权利要求1所述的杂交瘤细胞株，其特征在于，保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，其保藏号分别为 CCTCC NO C201195 和 CCTCC NO :C201194。3.—种检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的试剂盒，其包含权利要求1所述的单克隆抗体。4.一种检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的的ELISA试剂盒，其特征在于，该试剂盒由下列部分构成保藏号为CCTCC NO C201195的单克隆抗体包被的酶标板和保藏号为CCTCC NO C201194的单克隆抗体制备的酶标记物，阳性对照，阴性对照，包被液，洗涤液，样品稀释液，底物显色液A、底物显色液B和终止液，其中所述的包被液，洗涤液，样品稀释液，底物显色液A、底物显色液B和终止液的组分及配比如下 包被液为0.05mol/L ρΗ9·6的碳酸盐缓冲液1.59g Na2CO3, 2. 93g NaHCO3，加三蒸水定容至 IOOOmL ； 20 倍浓缩洗涤液称取 NaCl 160g、KCl 4g、Na2HPO4 · 12H20 58g、KH2P044g，用 800ml 三蒸水溶解，调节pH至7. 4,再加入Tween-2010ml,最后加三蒸水定容至IOOOml ； 封闭液在IOOml洗涤液中加入5g脱脂乳溶解制成； 底物显色液A =Na2HPO4 · 12H20 14. 6g，柠檬酸9. 33g，过氧化氢脲O. 52g，加注射用水溶解并定容至1000ml...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖少波，方六荣，朱海波，宋涛，曾松林，张玉娟，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：