桑黄菌中尿嘧啶的分离技术制造技术

本发明专利技术公开了一种桑黄菌（火木层孔菌Phellinusigniarius(LexFr)Quel、裂蹄木层孔菌phellinuslinteus(BerketCurt)Teng、鲍氏层孔菌、哈蒂针层孔菌Phellinushartigii(AlleschetSchnabl)Imaz）中尿嘧啶的分离方法。首先制备桑黄菌粗提物，然后进行正相硅胶层析，采用石油醚与丙酮梯度洗脱，进行TLC检测，再次使用正相硅胶层析，然后是甲醇凝胶层析，经PLC检测后适当合并洗脱液，减压干燥，既得尿嘧啶。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程制药领域。
技术介绍
桑黄(Phellinus)，子实体无柄，菌盖扁半球形或马蹄形，2_12*3_21厘米，厚1.5-10厘米，木质，浅肝褐色至暗灰色或黑色，老时常龟裂，无皮壳，初期有细微绒毛，后变无毛，有同心环棱.边缘钝，深肉桂色至浅咖啡色，下侧无子实层.菌肉深咖啡色，硬，木质.菌管与菌肉近同色，多层，但层次不明显，年老的菌管层充满白色菌丝.管口锈褐色至酱色，圆形，每毫米4-5个.孢子近球形，光滑，无色，5-6*3-4微米.刚毛顶端尖锐，基部膨大，10-25*5-7微米.菌丝不分枝，无横隔，直径3-5微米。目前，真菌产物的纯化方法较多，主要有分级沉淀法、制备性高效液相层析、柱层析法、超滤法、离心沉淀色谱法、等几种方法。而其中应用最多的当属柱层析法，分为两类一是只有分子筛作用的凝胶柱层析，常用的凝胶有葡聚糖凝胶及琼脂糖凝胶。二是离子交换层析。但，主要用于分离多糖，透明质酸等，多数分离后得到的产物为混合物。本专利技术使用多种层析技术相结合，分离度高，应用此专利技术可以精致到纯品。
技术实现思路
本专利技术公开了一种桑黄菌中尿嘧啶的分离方法。首先制备桑黄粗提物，然后进本文档来自技高网...

【技术保护点】
桑黄菌中尿嘧啶的分离方法，其步骤顺序如下：(1)?制备桑黄粗提物；(2)将上述步骤（1）所得的乙醇沉淀物与正相硅胶混匀搅拌，并干燥，进行硅胶正相柱层析，用洗脱剂洗脱2?7次；(3)收集步骤（2）中最后一次洗脱液，减压干燥，与等体积硅胶拌样，再次进行正相硅胶层析，用洗脱剂洗脱；(4)收集上述步骤（3）中的洗脱液，减压浓缩，使用甲醇溶解，甲醇凝胶柱层析，用洗脱剂洗脱；(5)TLC检测步骤（4）的洗脱液，适度合并洗脱液，加压干燥，即为尿嘧啶。

【技术特征摘要】
1.桑黄菌中尿嘧啶的分离方法，其步骤顺序如下 (1)制备桑黄粗提物； (2)将上述步骤(I)所得的こ醇沉淀物与正相硅胶混匀搅拌，并干燥，进行硅胶正相柱层析，用洗脱剂洗脱2-7次； (3)收集步骤(2)中最后一次洗脱液，减压干燥，与等体积硅胶拌样，再次进行正相硅胶层析，用洗脱剂洗脱； (4)收集上述步骤(3)中的洗脱液，减压浓缩，使用甲醇溶解，甲醇凝胶柱层析，用洗脱剂洗脱； (5)TLC检测步骤(4)的洗脱液，适度合并洗脱液，加压干燥，即为尿嘧啶。2.如权利要求1所述的ー种从桑黄菌中分离苯こ醇的方法，其特征在于所述桑黄粗提物，由下述方法制得 (1)发酵培养基配方以克/100毫升计是 玉米淀粉 1-5%葡萄糖 1-5% 蛋白胨 0.1-0.5%酵母膏 0.1-0.5% 硫酸镁 0. 1-0. 5%磷酸ニ氢钾0. 01-0. 05% (2)如权利要求1所述桑黄粗提物的发酵培养方法是，将桑黄菌种以常规方法接种到装有液体培养基的三角烧瓶内，以20 35°C温度，摇瓶转速为80 280r/min，pH 3 8条件下，震动培养7 15天；培养中当pH值降到2. 5 4时，将摇瓶中的种子接种到50L发酵罐的培养液中，以温度20 35°C，发酵罐压カ0.1 0. 2公斤/平方厘米，pH 3 8，通气量0. 5 1.1vvm,搅拌速度100 280转/分的条件，培养7 15天，即可利用桑黄菌丝体发酵全液制备桑黄粗提物； (3)取步骤(2)中所得桑黄菌丝体发酵全液，将其以常规方式减压浓缩，使其体积浓缩到原...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晨，宋爱荣，孙效乐，王进平，秦丹，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：