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一种重组型核酸建构物及使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法技术

技术编号:8559682 阅读:242 留言:1更新日期:2013-04-10 23:39
一种核酸建构物,可调控且有效破裂菌株,将菌株胞内生产的重组蛋白释放于胞外,以达到方便且快速回收胺基酸组成物的目的。此核酸建构物包括一个控制表现基因的核酸物,以及可被诱导表现的基因产物;其中,一个控制表现基因的核酸物包含了一个热敏感性抑制蛋白(heat-sensitive?repressor?protein)CI857基因,λPRPL启动子和热休克蛋白(heat?shock?protein)groEL启动子,及一个lacO控制子位置(operator?site);而可被诱导表现的基因产物包括一个噬菌体φX174溶菌基因E,结合一个噬菌体T4溶酶素基因或一个T7溶酶素基因。以生产Agrobacterium?radiobacter?NRRL?B?11291amidohydrolase(AHL)以及hydantoinase(HDT)为实施例,生产菌株具有此核酸建构物,一经温度诱导作用后,生产菌株生长随即停止,且可有效将诱导生产的重组型AHL以及HDT释放至胞外。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是关于,尤其关于一种在大肠杆菌生产重组蛋白质的工业化制程中,自培养基快速回收大肠杆菌所释出的蛋白质的方法。
技术介绍
人类基因体计划(Human genome project)的终极目标在于勾画出生命的基本蓝图,以便人类能藉此得以了解生理机能及窥探生命奥妙的所在;另一方面,科学家也可藉此按图索骥以破解人类基因之谜,并运用生物关键技术来解决人类遗传疾病的问题,以及发展促进人类未来福祉等相关生物技术。由于这个堪称为二十一世纪人类最伟大计划的顺利推展,也推动了许多真核和原核生物细胞基因体计划的热潮,可预期的是,未来我们将更了解许多基因的基本功用和追溯出相仿蛋白质家族间的演化历程及相关性,以及更进一步了解蛋白质体之间的相互作用对于一个细胞基本生命运作的意义。尤为重要的是,许多具有特殊功用的蛋白质亦将陆续被发现和被运用来增进人类的福祉,而重组基因技术将在此刻扮演最关键的角色。这项技术影响范围将涉及化学工业、生技医药工业、农牧渔业、能源、环境净化等领域,例如重组基因技术可将我们有兴趣的目标基因(target gene)选殖至一个适当的载体(vector)上,随后将所形成的重组型载体输本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法,其特征在于,包含下列步骤:(a)构筑一第一核酸建构物,该第一核酸建构物包括一第一核酸序列及一第二核酸序列,其中该第一核酸序列包含有噬菌体φX174溶菌基因E,该第二核酸序列包含有噬菌体溶酶素基因;(b)构筑一质体含有一第二核酸建构物,其中该第二核酸建构物进一步包括一热敏感性抑制蛋白CI857基因的核酸序列,一λPRPL启动子的核酸序列,一热休克蛋白groEL启动子的核酸序列,及一lacO控制子位置的核酸序列;(c)将该第一核酸建构物植入该质体中,形成一重组型核酸建构物;(d)将步骤(c)所形成的该重组型核酸建构物转形至一个宿主细菌,得到一重组...

【技术特征摘要】
2011.10.04 TW 1001358321.一种使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法,其特征在于,包含下列步骤 (a)构筑一第一核酸建构物,该第一核酸建构物包括一第一核酸序列及一第二核酸序列,其中该第一核酸序列包含有噬菌体ΦΧ174溶菌基因E,该第二核酸序列包含有噬菌体溶酶素基因; (b)构筑一质体含有一第二核酸建构物,其中该第二核酸建构物进一步包括一热敏感性抑制蛋白CI857基因的核酸序列,一 λ PkPl启动子的核酸序列,一热休克蛋白groEL启动子的核酸序列,及一 IacO控制子位置的核酸序列; (c)将该第一核酸建构物植入该质体中,形成一重组型核酸建构物; (d)将步骤(c)所形成的该重组型核酸建构物转形至一个宿主细菌,得到一重组型菌株; (e)将该重组型菌株,培养于培养基中,经一温度诱导作用后,以使该第一核酸建构物表现,使细菌破裂而释出细胞内物质; (f)收获步骤(e)的该重组型菌株释出至培养基中的物质。2.根据权利要求1所述的使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法,其特征在于,步骤(a)所述的噬菌体溶酶素基因,可为T4噬菌体溶酶素基因、T7噬菌体溶酶素基因。3.根据权利要求1所述的使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法,其特征在于,步骤(f)收获的该物质包括一重组型蛋白质、一不可溶内含体(inclusion)、一滞留胞内的物质、及其组合。4.根据权利要求3所述的使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法,其特征在于,该重组型蛋白质包括蛋白质、酵素、抗体、胜肽、胺基酸、及其组合。5.根据权利要求4所述的使用重组型核酸建构物快速回收胺基酸组成物的方法,其特征在于,该重组型蛋白质为重组型酵素。...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵云鹏张智翔姜中人
申请(专利权)人:逢甲大学
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有1条评论
  • 来自[北京市电信互联网数据中心] 2014年12月31日 23:19
    氨基酸是构建生物机体的众多生物活性大分子之一是构建细胞修复组织的基础材料氨基酸被人体用于制造抗体蛋白以对抗细菌和病毒的侵染制造血红蛋白以传送氧气制造酶和激素以维持和调节新陈代谢氨基酸是制造精卵细胞的主体物质是合成神经介质的不可缺少的前提物质氨基酸能够为机体和大脑活动提供能源氨基酸是一切生命之元
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