白菜热诱导miRNA及其鉴定制造技术

本发明专利技术涉及白菜热诱导miRNA及其鉴定。本发明专利技术鉴定了新颖的白菜热响应miRNA，miR-9.3(miR-1885.3)(如SEQ?ID?NO：1所示)，其响应热应力而下调，而它的两个靶标(QQT1和FRA-8)响应热应力而上调。本发明专利技术进一步证实，拟南芥中miR-9.3的下调和靶标QQT1的过表达提高的耐热性。因而本发明专利技术包括这类新的核酸分子、含有这些分子的载体、宿主细胞，以及这些分子、载体在转化植物细胞以提供耐热植物中的应用。本发明专利技术也涉及利用上述序列制备耐热性提高的植物和/或其部分的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农业领域，具体涉及白菜保守和新miRNA家族中热诱导miRNA及其鉴定。
技术介绍
白菜是一类品种繁多的蔬菜作物，比较基因组学的工作揭示白菜和拟南芥有着非常保守的线性排列和染色体片段的共线性关系，推测它们是在大约13到17百万年前从一个共同的祖先那里进化而来(Mun et al.，2009)。因为白菜在进化中发生了相当于拟南芥全基因组范围内三倍化的事件，所以白菜基因组含有三倍化的拟南芥基因组的相应片段的同源对应物。在许多区域白菜类的蔬菜作物经常受到高温的胁迫。全球范围内，相当一部分农作物的损失是由于高温和其伴随的其他逆境胁迫造成(Mittler，2006)。虽然抗热分子育种已经成为可能，但作物的基因改良因为缺乏抗热基因资源而受到限制。植物内源的小片段非编码RNA参与到了植物对非生物胁迫的响应中。小RNA主要分为四大类微小RNA(microRNAs),反式作用干扰小RNA(ta_siRNAs),天然反义转录小RNA (nat-siRNAs)和重复序列相关小 RNA (ra-siRNAs) (Jamalkandi et al. ,2009)。植物典型的miRNA大约21本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子含有：(a)SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列或SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列；(b)与(a)互补的核苷酸序列；(c)与(a)或(b)具有至少80％序列相同性的核苷酸序列；和/或(d)在严格条件下与(a)、(b)和/或(c)杂交的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子含有 (a)SEQ ID NO 1所示的核苷酸序列或SEQ ID NO 2所示的核苷酸序列； (b)与(a)互补的核苷酸序列； (c)与(a)或(b)具有至少80%序列相同性的核苷酸序列；和/或 (d)在严格条件下与(a)、(b)和/或(C)杂交的核苷酸序列。2.如权利要求1所述的核苷酸序列，其特征在于，(c)中所述序列的相同性为至少85 %，优选至少90 %，更优选至少95 %。3.一种嵌合基因，其含有在植物细胞中有活性的操作性连接于权利要求1或2所述核酸分子的启动子，所述启动子任选地进一步操作性连接于3’非翻译核酸分子。4.一种载体，其含有权利要求1或2所述的核酸分子或权利要求3所述的嵌合基因。5.一种宿主细胞，其含有权利要求3所述的嵌合基因或权利要求4所述的载体。6.如权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞是植物细胞。7.含有权利要求6所述的植物细胞的植物或其部分。8.产生自权利要求7所述的植物的种子。9.权利要求4所述的载体在转化植物细胞以提供耐热植物中的应用。10.一种制备耐热性提高的植物和/或其部分的方法，所述方法包括降低所述植物中具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列或与SEQ ID NO :1具有至少80%序列相同性的核苷酸序列的核酸序列的水平的步骤。11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述降低所述植物中具有SEQID ΝΟ:1所示的核苷酸序列或与SEQ ID NO :1具有至少80%序列相同性的核苷酸序列的核酸序列的水平的步骤包括选自下组的一个或多个步骤 将一核苷酸序列导入所述植物，其中，所述核苷酸序列是SEQ ID NO :1所不的核苷酸序列或SEQ ID NO :2所示的核苷酸序列的互补序列，或是与SEQ ID NO :1所示核苷酸序列或SEQ ID NO :2所示核苷酸序列的互补序列具有至少80%相同性的核酸序列； 下调编码SEQ ID NO 1所示核苷酸序列，SEQ ID NO 2所示核苷酸序列，或与SEQ IDNO:1所示核苷酸序列或SEQ ID NO :2所示核苷酸序列具有至少80%相同性的核苷酸序列的基因的表达； 使编码SEQ ID NO :1所示核苷酸序列，SEQ ID NO :2所示核苷酸序列，或与SEQ ID NO:1所示核苷酸序列或SEQ ID NO :2所示核苷酸序列具有至少80%相同性的核苷酸序列的基因突变，以降低或消除SEQ ID NO :1与其mRNA靶标的结合，和/或降低或消除SEQ ID NO I结合上后该mRNA靶标的切割；和 使所述植物与能抑制SEQ ID NO :1所示核苷酸序列、SEQ ID NO 2所示核苷酸序列或与SEQ ID NO:1所示核苷酸序列或SEQ ID NO :2所示核苷酸序列具有至少80%相同性的核苷酸序列的化合物接触。12.—种制备耐热性提高的植物和/或其部分的方法，所述方法包括提高所述植物中具有SEQ ID NO :3所示核苷酸序列或与SEQ ID NO :3的核苷酸序列具有至少70%序列相同性的核苷酸序列的核酸序列的水平，和/或提高所述植物中具有SEQ ID NO :5所示氨基酸序列的蛋白序列或与SEQ ID NO 5所示氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：何玉科，马赛尔·普瑞斯，余祥，
申请(专利权)人：中国科学院上海生命科学研究院，荷兰科因公司，
类型：发明
国别省市：