本发明专利技术公开了香加皮抗肿瘤有效组分提取物，它是由香加皮粉碎后，用水于90-100℃加热提取，提取液浓缩，醇沉，离心除去沉淀，减压浓缩除去乙醇，得提取液；或者用40%～95%乙醇于80℃水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；用乙酸乙酯及水饱和正丁醇依次萃取提取液，正丁醇提取部分进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷-甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为10∶1比例的洗脱液，回收有机溶剂后即得香加皮抗肿瘤有效组分提取物。本发明专利技术的香加皮抗肿瘤有效组分提取物，在体外细胞毒实验中，该部位具有明显的抑制U251（胶质瘤细胞）、HepG2（人肝癌细胞）、SGC（人胃癌细胞）、mcf-7（人乳腺癌细胞）、SCLC（肺癌细胞）的作用，可以用于制备抗肿瘤药物。本发明专利技术公开了其制法。?
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及香加皮抗肿瘤有效组分提取物及其制备方法和作为抗肿瘤药物的用途。
技术介绍
恶性肿瘤是当今世界上危害人类健康的最严重疾病之一，世界各国的专家学者都在积极研究寻找治疗肿瘤的方法和药物，尤其对中药抗肿瘤物质的研究十分活跃，近年来， 拥有资源广泛、多靶点等优点的中药在抗肿瘤方面取得了可喜的成就。香加皮Cortex Periplocae亦称北五加皮，来源于萝蘑科植物杠柳 Periplocasepium Punge.的干燥根皮，为常用传统中药。本品性温，味辛苦，有毒，归肝、肾、 心经。有祛风湿、强筋骨的功效。用于风寒湿痹，腰膝酸软，心悸气短，下肢浮肿。主产于河北、山西、河南、山东4省，以山西、河南产量为最大(参见李天祥、张丽娟、刘虹、藩桂湘、高秀梅、张伯礼，2008，27 (12)，960)。中药香加皮含有甾醇、酯类、苷类、醛类以及萜类等多种成分，但有关其功能和作用机理的研究很少，有个别学者对香加皮提取物的强心作用做了初步实验(参见李玉红，高秀梅，张伯礼，2005，7 (4): 396-397，马立，王怡2009，41 (3) : 71..)。近几年研究表明，香加皮中某些成分有一定的抗肿瘤效果，这对香加皮的抗肿瘤机制研究建立了初步的方向，这些单体成分包括杠柳毒苷、杠柳次苷、杠柳苷元、宝藿苷I等(参见Zhao L M, Shan B Ej Du Y Y Oncologyreports. 2010, 24:375-383. Jun ya UEDA, Yasuhiro TEZUKA, Arjun HariBANSKOTAj Biol. Pharm. Bull. 2003，26(10)，1431—1435. Yong Li, Yun-Bao Liu，Sh1-Shan Yuj Steroids. 2012, 77. 375-381. Song J，Shu Lj Z Hj Chemico-BiologicalIn teractions. 2012，199:9-17.)。李金楠研究利用柱色谱等方法，从香加皮的95%的醇提物中分离得到11个化合物，分别为异香草醛(I )，4_甲氧基水杨酸(II )，4_甲氧基水杨醛(III)，咖啡酸乙酯(IV)，东莨菪内酯(V )，5，5' - 二甲氧基落叶松脂醇-4' -O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (tor-toside B) ( A/I ), periplocoside L(W), Δ 5_ 孕留烯 _3 β , 20 (S) - 二醇(VDI )， Λ 5-孕甾烯-3 β，20⑶-二醇-20-0- β -D-吡喃葡萄糖-3-0- β -D-吡喃葡萄糖苷(IX )， Λ 5-孕甾烯-3 β，20 (S)-二醇-20-0-β-D-吡喃葡萄糖基(1 — 6)-β- -吡喃葡萄糖苷 (秦岭藤苷C) ( X )，Λ 5-孕甾烯-3 β，20 (S) - 二醇-3-0- [2-0-乙酰基-β -D-吡喃洋地黄糖基(1 — 4)-β -D-吡喃加拿大麻糖]-20-0-β-D-吡喃葡萄糖基(1 — 6)-β -D-吡喃葡萄糖基(1 —2)-β-D-吡喃洋地黄糖苷(XI)，其中化合物IV，VI，IX.和X为首次从该种药材中得到(参见李金楠，赵丽迎，于静，高缨，邓雁如.中成药.2010. 32(9): 1552)。但没有进行药理作用研究。中国专利申请CN200810006406. 5《一种分析香加皮中脂肪酸化学成分的方法》， 200510013382. 2《香加皮强心作用有效部位及制备方法和含它们的药物制剂与用途》，是关于脂肪酸的制备及该药材的强心作用部位，未涉及到该药材在抗肿瘤活性方面的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是，提供香加皮抗肿瘤有效组分提取物及其制备方法。本专利技术的目的之二是，提供一种以所述的有效组分提取物的药物组合物。本专利技术的目的之三是，提供所述的有效组分提取物在制备抗肿瘤及相关药物中的应用。本专利技术的技术方案如下香加皮抗肿瘤有效组分提取物，它是由香加皮粉碎后，用水于90-100°C加热提取， 提取液浓缩，醇沉，离心除去沉淀，减压浓缩除去乙醇，得提取液；或者是由香加皮粉碎后， 用40% 95%乙醇于80°C水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；然后用乙酸乙酯及水饱和正丁醇依次萃取所得的提取液，正丁醇萃取液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷-甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为10 I比例的洗脱液，回收有机溶剂即得香加皮抗肿瘤有效组分提取物。一种制备上述香加皮抗肿瘤有效组分提取物的方法，它包括如下步骤步骤1.将香加皮粉碎，用水回流提取，冷却，离心，浓缩提取液，用95%乙醇进行醇沉，离心除去沉淀，浓缩除去乙醇，得提取液；或者将香加皮粉碎，用40% 95%乙醇于80°C 水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；步骤2.将步骤I的提取液依次用乙酸乙酯、水饱和的正丁醇溶液进行萃取，将正丁醇萃取液液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比例(100 Γ1 I)的二氯甲烷-甲醇混合溶剂，收集二氯甲烷与甲醇体积比为10 I的洗脱液，旋转蒸发回收有机溶剂后，即得香加皮抗肿瘤有效组分提取物。该有效组分提取物经过制备液相、碳谱氢谱分析，含有杠柳毒苷及其它未知物。本专利技术进一步提供了香加皮抗肿瘤有效组分提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。 以抑制U251增殖能力为活性指标进行抗肿瘤活性实验。实验结果表明，在体外细胞毒实验中，可以明显抑制U251的增殖，具有细胞毒作用，可用于制备抗肿瘤治疗药物。本专利技术还提供了以所述方法制备的有效部位的药物组合物。所述药物组合物是以本专利技术的有效部位为有效成分，与药学上可接受的载体所组成，并以适合药用的制剂形式存在，这些制剂形式可以是片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、缓释片剂、胶囊 剂、 硬胶囊剂、软胶囊剂、缓释胶囊剂、口服液、合剂、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、溶液剂、注射剂、粉针剂、冻干粉针剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、滴丸剂和贴剂等。有益效果(I)本专利技术首次发现香加皮的正丁醇萃取部分的二氯甲烷-甲醇(10 I)洗脱部位具有抗肿瘤活性，并首次在U251 (胶质瘤细胞)上进行药效筛选，活性好，适宜开发成抗肿瘤中药新药。(2)本专利技术拓展了抗肿瘤药物的原料渠道，扩大了香加皮的用途，使香加皮发展成为抗肿瘤药物的新原料，可显著提高香加皮的附加值。同时，为从中药材中筛选发现新的抗肿瘤药物提供了新思路。具体实施方式以下所列实施例有助于本领域技术人员更好地理解本专利技术，但不以任何方式限制本专利技术。实施例1.香加皮抗肿瘤有效组分提取物的制备将香加皮干燥、粉碎，取药粉400g，用10倍质量的水回流提取4h，离心后的残渣重复提取I次，离心，合并二次水提取液，浓缩至300ml，加95%乙醇进行醇沉，药液中乙醇的浓度约为60%，静置过夜，离心，弃去沉淀，减压回收乙醇，继续浓缩至300ml，加等体积的乙酸乙酯萃取4次，剩下的水液减压除去残留的乙酸乙酯后，用等体积的水饱和的正丁醇萃取3 次，合并水饱和正丁醇萃取液，回收正丁醇，得水饱和正丁醇提取物8. 66g ；上述正丁醇提取物过硅胶柱，配置不同比例的二氯甲烷和甲醇混合液 (20本文档来自技高网...
【技术保护点】
香加皮抗肿瘤有效组分提取物，其特征是：它是由香加皮粉碎后，用水于90?100℃加热提取，提取液浓缩，醇沉，离心除去沉淀，减压浓缩除去乙醇，得提取液；或者它是由香加皮粉碎后，用40%～95%乙醇于80℃水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；用乙酸乙酯及水饱和正丁醇依次萃取所得的提取液，正丁醇萃取液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷?甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为10∶1比例的洗脱液，回收有机溶剂后即得香加皮抗肿瘤有效组分提取物，该提取物含有杠柳毒苷及其它未知物。
【技术特征摘要】
1.香加皮抗肿瘤有效组分提取物，其特征是它是由香加皮粉碎后，用水于90-100°C加热提取，提取液浓缩，醇沉，离心除去沉淀，减压浓缩除去乙醇，得提取液；或者它是由香加皮粉碎后，用40% 95%乙醇于80°C水浴加热提取，冷却，离心，浓缩除去乙醇，得提取液；用乙酸乙酯及水饱和正丁醇依次萃取所得的提取液，正丁醇萃取液进行硅胶柱分离，洗脱剂为不同体积比的二氯甲烷-甲醇，收集二氯甲烷与甲醇体积比为10 I比例的洗脱液，回收有机溶剂后即得香加皮抗肿瘤有效组分提取物，该提取物含有杠柳毒苷及其它未知物。2.一种制备权利要求1所述的香加皮抗肿瘤有效组分提取物的方法，它包括如下步骤步骤1.将香加皮粉碎，用水于9...
【专利技术属性】
技术研发人员：余江南，张辉云，徐希明，童姗姗，奚超群，屈睿，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：
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