一种用于测定多糖的苯酚试剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于测定多糖的苯酚试剂的制备方法，属于多糖测定试剂领域，本发明专利技术制备苯酚试剂的方法，包括以下步骤：取苯酚、氢氧化钠和铝片，置于反应容器中蒸馏，收集180~182℃的馏分，得馏出液；向馏出液中加入亚硫酸溶液，充分混匀后，得到苯酚试剂母液；量取苯酚试剂母液用蒸馏水稀释至苯酚的质量浓度为6%得到用于多糖测定的苯酚试剂。本发明专利技术在苯酚溶液中加入亚硫酸作为苯酚的保护剂，能够有效防止苯酚氧化，从而保证了测定结果的准确性，同时延长了苯酚试剂的保存时间。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种测定多糖试剂的制备方法，具体涉及ー种用于多糖測定的苯酚试剂的制备方法。
技术介绍
多糖是存在于自然界的醛糖和(或)酮糖通过糖苷键连接在一起的聚合物(一般10个以上)。它一般都是天然高分子化合物，是一切有生命的有机体必不可少的成分。多糖包括活性多糖和膳食纤维两大类。活性多糖专指具有某种特殊生物活性的多糖化合物，如真菌多糖、植物多糖和壳聚糖等。这些多糖具有复杂的、多方面的生理活性和功能，如免疫调节功能、抗肿瘤作用、延缓衰老作用、降血脂、抗血栓作用等功能，因而越来越引起人们的关注。 多糖的測定方法目前还没有国家规定的方法，文献报道的多糖含量常规检测的方法有很多，ー类是利用多糖的还原性，测定还原性多糖的方法有3，5- ニ硝基水杨酸盐比色法和Somogy1-Nelson法。另ー类測定方法，也是现在普遍使用的方法，是利用多糖在强酸性条件下脱水生成糠醛或其衍生物，然后再与酚类或胺类化合物缩合，生成有特殊顔色的物质的这一性质进行測定，这类方法有地衣酚-硫酸法、苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法。其中苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法是用得较多的方法，但由于蒽酮有剧毒，因此多糖的測定主要还是苯酚硫酸法。其原理为浓硫酸水合放出大量热量，在酸性条件下多糖水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，然后与苯酚生成橙黄色化合物，此衍生物在波长490nm处出现最大吸收峰。并且在一定浓度范围内，浓度和光密度之间的关系遵守Beer’ s Law，因此可以用标准糖制作标准曲线后，再通过多糖的显色反应测定吸光度，然后根据其在曲线上的位置推算出多糖的浓度从而推算其含量。此法操作简单，具有需温度低、快速、稳定、灵敏度高、重现性好等优点，对每种糖仅需制作一条标准曲线。但苯酚易氧化，见光或暴露在空气中呈粉红色，如果配制的苯酚试剂被氧化，将直接影响多糖测定的准确性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于測定多糖的苯酚试剂的制备方法，能够有效防止苯酚氧化，从而保证了测定结果的准确性，同时延长了苯酚试剂的保存时间。为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案包括以下步骤I)按质量比为1000:0. 5:1，称取苯酚、氢氧化钠和铝片，置于反应容器中蒸馏，收集18(Tl82°C的馏分，得馏出液；2)向馏出液中加入质量浓度为6%的亚硫酸溶液，所述馏出液与亚硫酸溶液的体积比为10:1，充分混匀后，得到苯酚试剂母液；3)量取苯酚试剂母液用蒸馏水稀释至苯酚的质量浓度为6%得到用于多糖測定的苯酚试剂。所述步骤I)的铝片是经盐酸除去表面氧化铝后的铝片。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果由于亚硫酸具有还原性，可以用作还原剂。因此往苯酚溶液中加入少量亚硫酸，可以起到保护剂的作用，从而防止苯酚的氧化。本专利技术在苯酚溶液中加入亚硫酸作为苯酚的保护剂，有效地解决了苯酚易氧化的问题，从而提高了多糖測定的准确性；若苯酚试剂保存不善或时间过久，会发生轻微的氧化变成粉红色，加入少量亚硫酸后，溶液的顔色可消失变成无色，从而延长了苯酚溶液的保存时间，本专利技术的制备方法操作简单，易实现。具体实施例方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进ー步的详细说明实施例1I)按质量比为1000:0. 5:1，称取苯酚、氢氧化钠和铝片，置于反应容器中蒸馏，收集18(T182°C的馏分，得馏出液；其中铝片是经盐酸除去表面氧化铝后的铝片；2)向馏出液中加入质量浓度为6%的亚硫酸溶液，所述馏出液与亚硫酸溶液的体积比为10:1，充分混匀后，得到苯酚试剂母液；3)量取苯酚试剂母液用蒸馏水稀释至苯酚的质量浓度为6%得到用于多糖測定的苯酚试剂。本专利技术在苯酚溶液中加入少量亚硫酸作为苯酚的保护剂，能够有效解决苯酚易氧化的问题，从而提高了多糖測定的准确性，同时也延长了苯酚溶液的保存时间；在用苯酚-硫酸法测定多糖时，浓硫酸过量，反应为放热反应，在这个过程中苯酚溶液中所加入的亚硫酸分解放出的SO2气体可以从反应体系中逸出，所以，在苯酚溶液中加入少量的6%的亚硫酸，对实验结果并无影响，用加有亚硫酸的苯酚溶液做标准曲线，可以保证测量的准确性。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于测定多糖的苯酚试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）按质量比为1000:0.5:1，称取苯酚、氢氧化钠和铝片，置于反应容器中蒸馏，收集180~182℃的馏分，得馏出液；2）向馏出液中加入质量浓度为6%的亚硫酸溶液，所述馏出液与亚硫酸溶液的体积比为10:1，充分混匀后，得到苯酚试剂母液；3）量取苯酚试剂母液用蒸馏水稀释至苯酚的质量浓度为6%，得到用于多糖测定的苯酚试剂。

【技术特征摘要】
1.一种用于测定多糖的苯酚试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤1)按质量比为1000:0.5:1，称取苯酚、氢氧化钠和铝片，置于反应容器中蒸馏，收集 180 182°C的馏分，得馏出液；2)向馏出液中加入质量浓度为6%的亚硫酸溶液，所述馏出液与亚硫酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨辉，闫明明，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：