本发明专利技术公开了一株肠膜明串珠菌(Leuconostoc?mesenteroides)菌株和该菌株的胞外多糖以及该胞外多糖的制备方法，还公开了一种增稠组合物及前述胞外多糖或前述增稠组合物在食品、制药和相关领域的应用。该肠膜明串珠菌菌株的保藏号为CGMCC?NO.6432；该胞外多糖为葡聚糖，其平均重量分子量在974～5230kDa之间；所述增稠组合物包括前述肠膜明串珠菌的胞外多糖和生理学上可接受的载体。本发明专利技术所述的胞外多糖水溶性好，且在低浓度时具有很好的粘度、很好的表面活性、很好的蛋白质可混性及极好的稳定性/乳化性；本发明专利技术的制备方法获得的胞外多糖或粗品产量高，应用前景十分广阔。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一株新的肠膜明串珠菌菌株及其胞外多糖，以及该胞外多糖的制备方法和应用。
技术介绍
微生物胞外多糖是指某些特定微生物(如乳酸菌、土壤杆菌、根瘤菌等)在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的一类糖类化合物，其中，依附于微生物细胞壁外的多糖被称为荚膜多糖，而粘液多糖则以渗透于生长环境中的形式存在。微生物胞外多糖不但可以赋予发酵乳制品特殊的风味，还具有一定的降血脂、免疫调节和抗肿瘤等保健功能。更重要的是，随着生活质量的不断提高，与我们每个人日常生 活息息相关的一些食品添加剂(如增稠剂、乳化剂、稳定剂等)的食品安全问题越来越受到消费者的重视，因此，寻找来源明确、产量稳定、功能多样的新型食品添加剂越来越受到研究者的重视。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株新的肠膜明串珠菌菌株和由该菌株所产生的胞外多糖，以及该胞外多糖的制备方法和应用。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的。本专利技术提供的技术方案之一是一株肠膜明串珠菌菌株，其是保藏号为CGMCCNO. 6432 的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株。该菌株经16S rRNA基因测序的结果如SEQ ID NO.1所示。本专利技术提供的技术方案之二是一种肠膜明串珠菌的胞外多糖，所述的胞外多糖为葡聚糖，该胞外多糖的平均重量分子量在974 5230kDa之间。本专利技术中，所述的胞外多糖为一种纯白色的丝状物或粉末；5. Omg/mL的所述胞外多糖水溶液澄清透明、无色、无味，pH值为6. O 7.1。本专利技术中，所述的胞外多糖可以由前述保藏号为CGMCC NO. 6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株产生,也可以由其它的可以产胞外多糖的肠膜明串珠菌菌株产生。较佳地，所述的胞外多糖由前述保藏号为CGMCC NO. 6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株所产生。本专利技术提供的技术方案之三是一种如前所述的肠膜明串珠菌的胞外多糖的制备方法。本专利技术中，所述的制备方法可以是将所述的肠膜明串珠菌按照现有技术内常规的培养方法培养得到发酵液，然后将发酵液采用常规的多糖分离方法分离得到胞外多糖。较佳地，所述的制备方法包括如下步骤(I)将肠膜明串珠菌的种子液以体积比O. 5 4. 0%(ν/ν)的接种量接种于无菌培养基，于25 34°C培养24 120h得发酵液；其中，所述的无菌培养基为含有质量比为6.O 12. 0%(w/w)脱脂乳粉和质量体积比为2. 5 10. 0%(w/v)蔗糖的脱脂乳蔗糖溶液，并在95 135°C下灭菌20 30min制成；(2)将步骤(I)所得的发酵液在95 100°C加热10 30min，冷却至15 25°C后，调节pH至4. 4 4. 8，静置3 5h，离心取上清，加入2 4倍体积的80 100%乙醇于离心后的上清液中，静置4 24h，离心收集沉淀物并将沉淀物溶于水，得沉淀物的水溶液；(3)将步骤(2)所得的沉淀物水溶液干燥后即得胞外多糖粗品。本专利技术中，所述的胞外多糖粗品包括85 95%的前述肠膜明串珠菌胞外多糖和5 15%的游离蛋白，所述的百分比为质量百分比。本专利技术中，较佳地，步骤(I)所述的肠膜明串珠菌的种子液为前述保藏号为CGMCCNO. 6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株的种子液。 本专利技术步骤(I)所述的无菌培养基打破了常规纯化学培养基发酵明串珠菌的局限性，创新性地运用脱脂乳蔗糖溶液作为明串珠菌的发酵基料，在降低物料成本的同时，令发酵条件更简单可行。与传统的纯化学培养基相比，天然来源的培养基料经明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)发酵而获得的胞外多糖更具食品安全保障性,而且,使用脱脂乳鹿糖溶液培养明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)获得的发酵液中胞外多糖的产量显著提高。本专利技术中，步骤(2)较佳地为将步骤(I)所得的发酵液在95 100°C加热10 30min,冷却至室温后,用盐酸或食品级的乳酸调节pH至4. 6,静置4h,9000rpm离心IOmin,取上清，加入2 4倍(v/v)的80 100%乙醇于上述离心后的上清液中，静置过夜，9000rpm离心lOmin，收集沉淀物并溶于蒸馏水，得沉淀物的水溶液。本专利技术中，步骤(3 )所述干燥的方式为本领域常规，可以直接进行冷冻干燥或者在温度不超过115°C下干燥或者真空冷冻干燥。本专利技术中，较佳地，在步骤(3)之后还包括步骤(4):将制得的胞外多糖粗品进行进一步的纯化，以去除蛋白和杂质。本专利技术中，步骤(4)所述进一步的纯化可以是现有技术中的任何常规的分离纯化的步骤。较佳地，步骤(4)所述进一步的纯化是采用三氯乙酸法去除蛋白和采用透析法去除其它杂质。所述的三氯乙酸法为将胞外多糖粗品用50 80°C蒸馏水溶解，使胞外多糖粗品的终浓度为0. 5 1. 0%，待溶液冷却至20 25°C时加入三氯乙酸，使三氯乙酸的最终质量浓度为2 4%(w/v)，再将溶液于2 8°C静置8 16h，离心或过滤去除沉淀物。所述的透析法为将去除沉淀后的胞外多糖溶液用截留分子量为10000道尔顿的透析膜在2 8°C透析48 60h ;在透析过程中较佳地还可以进行多次换水。更佳地，步骤(4)还包括，经过透析后的多糖溶液还可以采用凝胶排阻层析的方法进行更进一步的纯化。本专利技术中，较佳地，步骤(4)所述进一步的纯化后的多糖溶液可进行干燥以获得粉末状的肠膜明串珠菌胞外多糖，干燥方法可以为本领域常规，较佳地选自热风干燥、低温干燥、冷风干燥、冷冻干燥、真空干燥和真空冷冻干燥中的任一种，更佳的干燥方法选自冷风干燥、冷冻干燥、真空干燥和真空冷冻干燥中的任一种。本专利技术提供的技术方案之四是一种增稠组合物，其包括前述胞外多糖和生理学上可接受的载体。本专利技术中，所述的生理学上可接受的载体为常规，可以是食品领域常规的增稠剂辅料，如食品胶、淀粉等，也可以是其他领域符合国家相应标准的增稠剂辅料。本专利技术提供的技术方案之五是前述胞外多糖或增稠组合物在食品、制药和相关领域的应用。本专利技术中，由于肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)胞外多糖或多糖粗品能很好的溶于水形成胶态水溶性聚合物，能在低浓度时具有很高的粘度、很好的表面活性、很好的蛋白质可混性以及极好的稳定性/乳化性。基于这些性质，本专利技术所述胞外多糖或胞外多糖粗品可以被用作增稠剂、稳定剂、悬浮剂、乳化剂或润滑剂及其相关用途。 在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本专利技术各较佳实例。本专利技术所用试剂和原料均市售可得。本专利技术的积极进步效果在于本专利技术所述肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株的胞外多糖水溶性好，且在低浓度时具有很好的粘度、彳艮好的表面活性、很好的蛋白质可混性以及极好的稳定性/乳化性。本专利技术的制备方法获得的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)胞外多糖或多糖粗品产量高，食品安全性强，其可以作为添加剂应用于食品、制药和相关领域中，应用前景十分广阔。牛物材料保藏信息本专利技术提供的肠膜明串珠菌(Leuconosto本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株肠膜明串珠菌菌株，其特征在于，其是保藏号为CGMCC?NO.6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc?mesenteroides)菌株。
【技术特征摘要】
1.一株肠膜明串珠菌菌株，其特征在于，其是保藏号为CGMCC NO. 6432的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株。2.一种肠膜明串珠菌的胞外多糖，其特征在于，所述的胞外多糖为葡聚糖，其为一种纯白色的丝状物或粉末；该胞外多糖的平均重量分子量在974 5230kDa之间。3.如权利要求2所述的胞外多糖，其特征在于，5.Omg/mL的所述胞外多糖水溶液澄清透明、无色、无味，pH值为6. O 7.1。4.如权利要求2所述的胞外多糖，其特征在于，所述的胞外多糖由保藏号为CGMCC NO. 6432 的肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)菌株产生。5.一种如权利要求2 4任一项所述的肠膜明串珠菌的胞外多糖的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括如下步骤(O将肠膜明串珠菌的种子液以体积比O. 5 4. 0%的接种量接种于无菌培养基，于 25 34°C培养24 120h得发酵液；其中，所述的无菌培养基为含有质量比为6. O 12. 0% 脱脂乳粉和质量体积比为2. 5 10. 0%蔗糖的脱脂乳蔗糖溶液，并在95 135°C下灭菌 20 30min制成；(2)将步骤(I)所得的发酵液在95 10...
【专利技术属性】
技术研发人员：韩瑨，吴正钧，周方方，季红，游春苹，郭本恒，艾连中，
申请(专利权)人：光明乳业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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