癌症疫苗制造技术

本发明专利技术涉及包含至少一种佐剂的疫苗，所述疫苗可用于预防和治疗血癌，例如淋巴瘤、白血病或骨髓瘤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】癌症疫苗 本专利技术涉及一种疫苗，其用于预防和治疗血癌，例如淋巴瘤、白血病或骨髓瘤。癌症是一种异常的疾病状态，其中一个或多个细胞群的不受控制的增殖干扰正常的生理功能。增殖的变化通常伴随着细胞特性的其他变化，包括回复到一种组织性较差的状态。癌细胞通常被称为“转化”。转化细胞通常显示以下几种特性球形形态、胎儿抗原的表达、非依赖性生长因子、缺乏接触性抑制、非贴附性(anchorage-1ndependence)和高密度生长。癌细胞形成肿瘤并被称为“原发性”或“继发性”肿瘤。原发性肿瘤导致癌细胞在一个器官中生长，原发性转化细胞在该器官中发育。癌细胞从原发性肿瘤逃离并在另一个器官形成继发性肿瘤，从而导致继发性肿瘤。这一过程被称为肿瘤转移，并且这个过程可以是侵袭性的，例如就肝癌或肺癌而言。 淋巴瘤是起始于淋巴细胞并在淋巴结中形成固体肿瘤的癌症。淋巴瘤是一个分类大量起源于淋巴细胞的癌症的术语。例如B细胞肿瘤，例如慢性淋巴细胞性白血病、B细胞幼淋巴细胞性白血病、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症(Waldenstrom macroglobulinemia)、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma) ;T细胞肿瘤例如T细胞幼淋巴细胞性白血病、NK细胞白血病、T细胞大颗粒性淋巴细胞性白血病、成人T细胞白血病。此外，淋巴瘤还包括其本身可以被细分的霍奇金氏淋巴瘤和非霍奇金氏淋巴瘤。除上述外，与免疫缺陷相关的淋巴瘤是普遍存在的，例如与HIV感染相关的淋巴瘤、移植后淋巴瘤相关的淋巴瘤和与甲氨蝶呤治疗相关的淋巴瘤。这些后面的淋巴瘤带来了特别的困难，因为疫苗接种不是一个可行的疗法。淋巴瘤的治疗通常是化学疗法和放射治疗，并根据特定的淋巴瘤和分期，这些疗法可以是有效的治疗方法。提供一种保护免疫缺陷受治疗者的疫苗是所期望的。目前，还没有被证实的和有效的接种疫苗的手段来对抗这一类癌症。决定抗体对其抗原的结合特异性的抗体区被称为互补决定区(CDR)，也被称为“高变区”或“独特型”。由于抗体的抗原结合区由随机的氨基酸序列组成，所以其对于B细胞的单克隆或少数克隆是独特的。因此这些独特的肽序列自身是抗原性的，并且结合用来组成抗体分子的特有的独特型。正如抗原由一定数量的表位组成，于是独特型也由一定数量的“独特型”组成。用特别的独特型的纯化免疫球蛋白免疫接种可以产生抗此独特型的抗体应答。有两个系统使用免疫球蛋白作为疫苗抗原，目的是诱导抗免疫球蛋白的免疫应答。在这两个系统中，抗体的高变区或独特型用来引发免疫应答。在两种情况下，抗体的独特型被用于产生抗独特型应答(ant1-1d)。第一种情况，抗体的独特型是免疫效应应答的实际靶点。例如B细胞淋巴瘤和白血病通常都是来自B细胞的单一克隆，并且由此可以在这些细胞表面上表达对肿瘤来说是独特的或几乎独特的免疫球蛋白。抗免疫球蛋白独特型的免疫应答的产生是接种疫苗的预期效果，其可以有助于肿瘤细胞的清除。产生的抗独特型应答由抗体和T细胞介导的应答组成。免疫球蛋白独特型因此可以是肿瘤特异性抗原的最佳实例之一。第二个系统采用所谓的“内影像的抗独特型抗体”以产生抗原交叉反应的应答，其可以是肿瘤抗原或来自病原体或其他来源的抗原，由于种种原因这些抗原难以纯化或直接施用时是弱免疫原性的。基于独特型的疫苗(包括如上所述的抗独特型疫苗)为本领域已知的。然而,这些疫苗存在相关问题。首先，对于淋巴瘤患者，疫苗必须单独地生产，因为独特型很可能是个体肿瘤所特有的，并且配制疫苗会花费数月时间，其中往往涉及生产分泌所需独特型的杂交瘤，纯化免疫球蛋白，然后与蛋白载体例如KLH偶联。其次，人免疫球蛋白在人体中是内在的弱免疫原性的，因此尽管与载体偶联增强了对独特型的免疫应答，但ant1-1d抗体应答有减弱的趋势(事实上，很大比例的对偶联物的应答针对的是高免疫原性的载体蛋白)。第三，已经证明，在小鼠和人中，抗独特型蛋白的CD4+T细胞和CD8+CTL应答均可能在介导治疗应答中是重要的并且与载体例如KLH的偶联不是产生CTL应答的最有效手段。本专利技术涉及预防性和治疗性治疗淋巴瘤的疫苗和治疗方案。根据本专利技术的一个方面，提供了一种疫苗，其包含 i)从罹患淋巴瘤的患者中分离出的独特型抗原；ii)与所述独特型抗原连接的⑶40单克隆抗体佐剂或其⑶40结合片段；和iii)第二佐剂，其增强对所连接的独特型抗原和CD40单克隆抗体佐剂的免疫应答。⑶40单克隆抗体是本领域已知的。例如，US2009/007471(其内容通过引用以其整体并入，尤其是所述抗体的可变区的氨基酸序列并入)公开了适用于根据本专利技术的疫苗的人源化抗人CD40和嵌合抗人CD40，并且公开的序列示于附图说明图12中。在本专利技术的优选实施方案中，所述第二佐剂选自由细胞因子组成的组，细胞因子选自由GMCSF、干扰素Y、干扰素α、干扰素β、白介素12、白介素23、白介素17、白介素2、白介素1、TGF(转化生长因子)、TNF(肿瘤坏死因子)α和TNF0组成的组。在本专利技术的进一步替代实施方案中，所述佐剂为TLR激动剂，例如CpG寡核苷酸、鞭毛蛋白、单磷酰基脂质Α、聚肌苷酸聚胞苷酸[poly1:C]及其衍生物。在本专利技术的优选实施方案中，所述佐剂为poly1:C。Poly1:C是一种佐剂，其与由B细胞和树突状细胞表达的Toll样受体TLR3结合。在本专利技术的优选实施方案中，所述佐剂是细菌细胞壁的衍生物，例如胞壁酰二肽(MDP)和/或海藻糖二棒状霉菌酸酯(trehelose dycorynemycolate) (TDM)和/或单磷酰基脂质A[MPL]。在本专利技术的优选实施方案中，所述佐剂为MPL。佐剂是通过调节免疫细胞活性来增强针对抗原的特异性免疫应答的物质或方法。佐剂的实例包括(仅举例而言)针对协同刺激分子的激动性抗体、弗氏佐剂、胞壁酰二肽、脂质体、明矾、QS21。因此佐剂是免疫调节剂。载体是免疫原性分子，当其与第二分子结合时增强后者的免疫应答。术语载体按下列方式解释。载体是一种免疫原性分子，当其与第二分子结合时，能够增强后者的免疫应答。一些抗原本质上是不具有免疫原性的，但当其与外源蛋白分子例如匙孔血蓝蛋白(keyhole-1 impet haemocyanin)或破伤风类毒素结合时能够产生抗体应答。这种抗原含有B细胞表位，但没有T细胞表位。这类偶联物的蛋白部分(“载体”蛋白)提供了 T细胞表位，其刺激辅助性T细胞，然后依次刺激抗原特异性的B细胞以分化成浆细胞并且产生针对该抗原的抗体。辅助性T细胞还可以刺激其他免疫细胞，例如细胞毒性T细胞，并且载体可以在产生细胞介导的免疫和抗体中起到类似作用。某些缺乏T细胞表位的抗原例如重复的B细胞表位(例如，细菌多糖)的聚合物，具有有限程度的本质上的免疫原性。这些被称为不依赖性T抗原。这些抗原受益于与载体(例如，破伤风类毒素)的结合，在这种情况下它们引起更强的抗体应答。在本专利技术的优选实施方案中，所述独特型抗原包含独特型免疫球蛋白的Fab或F(ab) 2’ Fd片段或由独特型免疫球蛋白的Fab或F(ab) 2’ Fd片段组成。独特型抗原可以在免疫球蛋白重链和轻链可变区内，S卩(Fab、F(ab)2’ Fd片段)，或确实嵌合在重链和轻链可变区和另一个抗体恒定区之间。根据本专利技术的一个方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.02.26 GB 1003293.61.一种疫苗，其包含 i)从罹患淋巴瘤或白血病的患者中分离出的独特型抗原； )连接至所述独特型抗原的⑶40单克隆抗体佐剂或其⑶40结合片段；和iii)第二佐剂，其增强对连接的独特型抗原和CD40单克隆抗体或其CD40结合片段佐剂的免疫应答。2.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述第二佐剂选自由细胞因子组成的组，所述细胞因子选自由GMCSF、干扰素Y、干扰素α、干扰素β、白介素12、白介素23、白介素17、白介素2、白介素1、TGF、TNFa和TNFP组成的组。3.根据权利要求1所述的的疫苗，其中所述佐剂为TLR激动剂，例如CpG寡核苷酸、鞭毛蛋白、单磷酰基脂质A、poly1:C及其衍生物。4.根据权利要求3所述的疫苗，其中所述佐剂为poly1:C。5.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述佐剂是细菌细胞壁的衍生物，例如胞壁酰二肽(MDP)和/或海藻糖二棒状霉菌酸酯(TDM)和/或单磷酰基脂质A[MPL]。6.根据权利要求5所述的疫苗，其中所述佐剂为MPL。7.根据权利要求1-6中任一项所述的疫苗，其中所述独特型抗原包含所述独特型抗原的Fab或F(ab)2’片段或由所述独特型抗原的Fab或F (ab) 2’片段组成。8.一种用于治疗淋巴瘤或白血病的疫苗，其包含 i)从罹患淋巴瘤或白血病患者中分离出的独特型抗原； )连接至所述独特型抗原的⑶40的单克隆抗体佐剂或其⑶40结合片段；和 iii)第二佐剂，其增强对所连接的独特型抗原和CD40单克隆抗体或其CD40结合片段佐剂的免疫应答。9.根据权利要求8所述的用途，其中所述淋巴瘤或白血病为B细胞淋巴瘤或白血病。10.根据权利要求9所述的用途，其中所述B细胞淋巴瘤选自慢性淋巴细胞性白血病、B细胞幼淋巴细胞性白血病、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、伯基特氏淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞性白血病、B细胞幼淋巴细胞性白血病、伯基特氏淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、骨髓瘤、B细胞急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞淋巴瘤、B细胞幼淋巴细胞性白血病、淋巴浆细胞淋巴瘤(例如，瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症)、脾边缘区淋巴瘤、浆细胞赘生物、浆细胞骨髓瘤、浆细胞瘤、结外边缘区B细胞淋巴瘤(也称为MALT淋巴瘤)、结性边缘区B细胞淋巴瘤(NMZL)、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、纵隔(胸腺)大B细胞淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤/白血病。11.根据权利要求8所述的用途，其中所述淋巴瘤为免疫缺陷相关淋巴瘤。12.根据权利要求11所述的用途，其中所述免疫缺陷相关淋巴瘤为HIV相关。13.根据权利要求11所述的用途，其中所述免疫缺陷相关淋巴瘤为移植相关。14.根据权利要求11所述的用途，其中所述免疫缺陷相关...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·希思，J·卡尔琳莱特，
申请(专利权)人：艾助万提斯有限公司，
类型：
国别省市：