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pUC19-TVG质粒的构建及使用方法技术

技术编号:8484852 阅读:305 留言:0更新日期:2013-03-28 04:13
pUC19-TVG质粒的构建及使用方法。本发明专利技术的技术方案提供了一种新型的载体pUC19-TVG,其特征在于,所述载体是基于限制性内切酶酶切及连接原理由载体pUC19改造而来,载体中含有包括EcoRI、MluI、NotI、XhoI、HindIII在内的多克隆位点,不含Xho?I、Mlu?I、Sac?I、Kpn?I、Cla?I、EcoRV、NcoI、Pst?I、BglII、Sal?I、Pst?I、BamH?I、Sca?I、Xba?I酶切位点,因此该载体能够实现多基因片段依赖酶切位点的融合及单一基因的分段和拼接,同时该载体还可以用于解决长片段基因克隆过程中极易出现的错配问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程
,具体涉及一种能够有效解决基于酶切位点基因融合问题的新载体及其应用示范。
技术介绍
pBR322质粒是目前在基因克隆中广泛使用的一种大肠杆菌质粒载体。符号质粒载体pBR322中的“P”代表质粒;“BR”代表两位研究者Bolivar和Rogigerus姓氏的字首; “322”是实验编号。PBR322是一个人工构建的重要质粒,有万能质粒之称。在pBR322质粒载体的构建过程中,一个重要目标是缩小基因组的体积,移去一些对基因克隆载体无关紧要的DNA片段,限制酶识别位点,同时还要设法使质粒同存在任何易位子统统失去功能。易位子的转移(即易位)有可能导致选择记号的丧失,甚至也有可能使克隆的DNA片段丧失或重排。PBR322质粒是由来源于pBR322质粒易位子Tn3的氨苄青霉素抗性基因(amp^,来源于pSClOl质粒的四环素抗性基因(tef)和来源于ColEl的派生质粒Pmbl的DNA复制起点(ori)三部分组成。质粒载体PBR322的大小为4361bp,相对分子质量较小的是它第一个优点。优点之二是它带有一个复制起始位点,保证了该质粒只在大肠杆菌的细胞中行使复制的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种能够有效解决基于酶切位点基因融合问题的新载体pUC19?TVG,其特征在于多克隆位点处序列为(SEQ?ID?NO:1),其结构如图1所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:邬敏辰朱天地汪俊卿李剑芳
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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