本发明专利技术公开了一种水稻MYB转录因子蛋白基因OsMyb1及其应用,属于生物技术领域。该基因的cDNA序列及其编码氨基酸序列见SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.2。本发明专利技术基因OsMyb1为水稻中抗稻瘟病相关的Myb类转录因子蛋白基因,基因芯片结果和mRNA表达分析表明该基因受稻瘟病菌接种诱导。转基因实验证明该基因的过量表达提高了水稻对稻瘟病的抗病性。因此,OsMyb1可作为目的基因导入植物,提高植物的抗病性。
【技术实现步骤摘要】
—种水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybI及其应用
本专利技术属于基因工程领域,涉及一种水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl及其应用。
技术介绍
MYB类转录因子家族是指含有MYB结构域的一类转录因子。MYB结构域是一个含有 52个氨基酸的DNA结合域。植物中的MYB类转录因子以在其N端含有一段约52个氨基酸组成的MYB结构域为共同特征。玉米的Clorless I (C I)是植物中第一个被分离鉴定的MYB转录因子(Paz-Areset et al.,1987Paz_Ares J,Ghosal Dj Wienand U (1987) The regulatory cl locus of Zea mays encodes a protein with homology to myb proto-oncogene products and with structural similarities to transcriptional activators. EMBO J. 6 (12) : 3553-3558),随后,拟南芥(Romero et al.,1998 Romero I,Fuertes A,Benito MJ,Malpica JMj Leyva A,Paz-Ares J. More than 80 R2R3-MYB regulatory genes in the genome of Arabidopsis thaliana. The Plant Journal,1998,14 (3) : 273-284)、金鱼草(Waites et al. ,1998 Waites Rj Selvadurai HR,Oliver IR(1998)The PHANTASTICA gene encodes a MYB transcription factor involved in growth and dorsoventrality of lateral organs in antirrhinum. Cell,93 (5) : 779-789)、棉花(Loguerico et al. , I 999Loguerico LL,Zhang JQ,Wilkins TA(1999)Differential regulation of six novel MYB—domain genes defines two distinct expression patterns in allotetrapIoid cotton(Gossypium hirsutum L.). Mol Gen Genet. 261:660-67 1),苹果(Takos et al.,2006 Takos AM,JaffeFWj Jacob SR,Bogs J,Robinson SPj Walker AR (2006) Light-1nduced expression of a MYB gene regulates anthocyanin biosynthesis in red apples. Plant Physiol. 142:1216-1232)等植物中也分离鉴定出功能各异的MYB蛋白。对MYB类转录因子的功能研究结果表明,MYB蛋白主要作用有参与植物次级代谢过程,调节细胞形态,参与植物对生物和非生物胁迫的应答,在植物对激素反应中起作用, 调节植物的生物钟,在细胞循环和增殖中起作用等(刘蕾,2008刘蕾,杜海,唐晓凤,吴燕民,黄玉碧,唐益雄(2008)MYB转录因子在植物抗逆胁迫中的作用及其分子机理.遗传,30 (10): 1265-1271)。Vailleau 等(2002 Vailleau Fj Daniel X,Tronchet M(2002) A R2R3-MYB gene,AtMYB30, acts as a positive regulator of the hypersensitive cell death program in plants in response to pathogen attack. PNAS 99 (15):10179-10184) 发现在AtMYB30过量表达的拟南芥与病原细菌互作过程中表现出抗病反应,抑制表达 AtMYB30的拟南芥对几种病原细菌的抗性下降;Van等(2008 Van SC, Van S (2008)Plant immune responses triggered by beneficial microbes. Current Opinion in Plant Biology, 11:443-448)通过基因敲除的方法构建MYB72缺陷型拟南芥,对假单胞菌、寄生霜霉、链格孢菌、灰霉菌的抵抗能力降低,说明拟南芥MYB72在植物抗病方面起作用;Fekete 等(2009 Fekete C,Fung RWj Szabo Z (2009)Up-regulated transcripts in a compatiblepowdery mildew-grapevine interaction. Plant Physiol Biochem. 47:732-738)通过构建白粉病菌诱导葡萄藤的SSH文库,发现MYB转录因子及一些抗病相关基因的表达,这说明 MYB可能参与葡萄藤对白粉病的防御过程。目前,越来越多的研究结果表明植物中MYB类转录因子在抗病性方面的功能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于公开水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl的抗病性基因工程应用,该基因来自水稻,可作为目的基因导入植物,提高植物抗病性,进行植物品种改良。本专利技术的目的可通过如下技术方案实现水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl,该基因的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。本专利技术所述的水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl编码的水稻MYB转录因子蛋白, 其氨基酸序列如SEQ ID NO. 2所示。含有本专利技术所述的水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl的表达载体。所述的表达载体优选将所述的水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl插入双元表达载体pCAMBIA1300S的Kpn I酶切位点所得。水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl的基因工程应用。优选本专利技术所述的水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl在通过基因工程手段培育稻瘟病抗性品种中的应用。水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl的基因工程应用,优选包括如下步骤I)总RNA的提取选用水稻抗稻瘟病菌品种“黑壳子粳”(太湖流域粳稻地方品种), 待水稻幼苗长至3-4叶期,用稻瘟病菌孢子(5X IO4Hir1)接种处理,24小时后立即取叶片液氮冷冻,保存于_80°C冰箱。取部分叶片,用研钵研碎,转移入盛有Trizol裂解液的1. 5mL EP管,充分振荡后,抽提总RNA,电泳鉴定总RNA质量; 2)水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl的克隆分析黑壳子粳接种稻瘟病前后的基因芯片表达数据发现芯片探针OsAffx. 21972.1. Sl_at受到稻瘟病的诱导(未发表的数据)。 以该探针序列搜索水稻基因组序列和EST序列数据库,拼接得到858bp水稻MYB转录因子蛋白基因OsMybl的本文档来自技高网...
【技术保护点】
水稻MYB转录因子蛋白基因OsMyb1,其特征在于该基因的cDNA序列如SEQ?ID?NO.1所示。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:鲍永美,张红生,黄骥,储瑞珍,王建飞,王州飞,
申请(专利权)人:南京农业大学,
类型:发明
国别省市:
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