治疗眼部疾病的方法技术

本发明专利技术涉及一种抑制受试者视网膜神经节细胞缺失的组合物和方法，包括向受试者眼睛表面局部无创伤性地向受试者眼睛表面施用眼科组合物，所述眼科组合包含治疗有效量的至少一种siRNA；所述siRNA下调与视网膜神经节细胞缺失相关的目标基因表达，从而抑制受试者视网膜神经节细胞的缺失。本发明专利技术的方法还涉及一种具有结构基序的化学修饰siRNA化合物的用途，所述结构基序下调在哺乳动物眼睛视网膜组织表达的人类基因的表达。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种治疗需要的受试者的眼部障碍的无创伤性方法，包括向所需受试者眼睛表面局部施用药物组合物的步骤，所述药物组合物包含与受试者视网膜中视网膜神经节细胞缺失相关的目标基因的治疗型寡核苷酸。此外，本专利技术涉及一种提高患有眼部疾病、障碍或损伤的受试者视网膜神经节细胞存活的无创伤性方法。
技术介绍
向视网膜组织传输核酸化合物，特别是向视网膜神经节细胞是一个很大的给药挑战。迄今为止，滴眼剂被认为主要用于治疗眼前段疾病是有效的，就是因为其已经表明，核酸不通过角膜，且不充足的药物浓度达到眼后段组织(reviewed in del Amo andUrtti,2008. Drug Discov Today 13 (3/4):135-143;Fattal and Bochot, 2006. Adv DrugDel Rev 56:1203-1223)。视网膜神经节细胞(RGC)是一种靠近眼睛视网膜内表面位置的神经细胞。视网膜神经节细胞由感光细胞接收视觉信息，并统一传送视网膜视觉信息至大脑中的几个区域。此外，同时仍然需要有抑制受试者视网膜神经节细胞缺失的无创伤性方法。各种眼部疾病和障碍是以视网膜神经节细胞(RGC)死亡为特征。因此，仍然需要有一种抑制患有眼部疾病、眼部障碍或眼部损伤或以存在感染眼部疾病、眼部障碍或眼部损伤的风险为特征和/或以视网膜神经节细胞(RGC)变性或死亡介导的受试者视网膜神经节细胞(RGC)缺失的无创伤性方法。专利技术概述本专利技术涉及一种与视网膜神经节细胞(RGC)变性或死亡相关的眼部疾病、眼部障碍或眼部损伤的无创伤性治疗方法及其使用的组合物。本专利技术的方法包括向受试者眼睛表面局部施用可用于提高受试者视网膜神经节细胞存活的治疗型寡核苷酸组合物。迄今为止，寡核苷酸已通过系统传输或玻璃体内注射，与有害副作用和患者依从性差相关的方法分别传输到眼部视网膜组织。本专利技术提供了包含寡核苷酸的局部眼科药物组合物，及其用于下调与受试者视网膜的视网膜神经节细胞缺失相关的目标基因表达的无创伤性方法，以挽救视网膜神经节细胞的凋亡并治疗眼部障碍。因此，一方面，本专利技术提供一种向患有眼部疾病、眼部障碍或眼部损伤的受试者视网膜组织传输寡核苷酸的无创伤性方法，其中包括向受试者眼睛表面局部施用包含寡核苷酸的眼科组合物。另一方面，本专利技术提供一种向患有眼部障碍的受试者视网膜神经节细胞传输寡核苷酸的无创伤性方法，其中包括向受试者眼睛表面局部施用包含寡核苷酸的眼科组合物。另一方面，本专利技术提供了一种减弱与患有眼部疾病、眼部障碍或眼部损伤的受试者视网膜的视网膜神经节细胞缺失相关的目标基因表达的方法，其中包括向受试者眼睛表面局部(无创伤性)施用药物组合物，所述药物组合物包含目标基因的mRNA产物的至少一种寡核苷酸，以一定用量经过一段时间能有效减弱受试者视网膜基因的表达。 另一方面，本专利技术提供一种治疗受试者患有视网膜神经节细胞缺失或视网膜神经节细胞损伤的方法，并提供神经保护剂给患有或者存在感染眼部疾病、眼部障碍或眼部损伤风险的受试者。该方法包括向受试者眼睛表面局部施用眼科药物组合物，所述眼科药物组合物包括受试者视网膜目标基因靶向的至少一种寡核苷酸，以一定用量经过一段时间能有效抑制视网膜神经节细胞缺失或视网膜神经节细胞损伤。在不同实施例中，眼科药物组合物被配制为霜、泡沫、膏、软膏、乳剂、包括滴眼剂、凝胶、喷雾、悬浮液、微乳液、微球、微囊剂、纳米球、纳米粒子、脂质囊泡、脂质体、聚合物囊泡、眼罩或隐形眼镜的液体溶液。在一些实施例中，药物组合物被配制为滴眼剂。在优选实施例中，向眼睛施用眼科组合物，例如，是通过滴眼剂滴注或通过施用薄雾。在某些实施例中，至少一种目标眼部mRNA基因是选自任一 SEQ ID N0:l_58所述mRNA多核苷酸。在某些实施例中，至少一种目标基因是选自被转录为任一 SEQ ID NO: 1-58所示mRNA多核苷酸的基因。在一些实施例中，至少一种寡核苷酸是选自化学修饰的siRNA、未修饰的RNA、反义、核酶、miRNA和shRNA。在优选实施例中，至少一种寡核苷酸是化学修饰的siRNA。在一些实施例中，siRNA正义和反义寡核苷酸均是选自显示于表B1-B36中的正义和相应的反义寡核苷酸对，如SEQ ID NO:59-33，596所述。在一些实施例中，眼部障碍、疾病或损伤是选自青光眼、干眼症、糖尿病视网膜病变(DR)、糖尿病性黄斑水肿(DME)或老年性黄斑变性(AMD)。在其他实施例中，眼部障碍、疾病或损伤是视神经炎、视网膜中央静脉阻塞、视网膜分枝静脉阻塞(BRV0)。在进一步实施例中，眼部障碍、疾病或损伤是色素性视网膜炎(RP)、缺血性视神经病变或视神经损伤。在进一步的实施例中，眼部障碍、疾病或损伤是早产儿视网膜神经节的视网膜病变(R0P)、黄斑变性、遗传性视神经病变、代谢性视神经病变，以及由于毒剂或药物不良反应或维生素缺乏症引起的视神经病变。在另一个实施例中，该障碍是与肿瘤疾病相关的视力丧失。在不同实施例中，至少一种siRNA化合物被传输到受试者眼睛作为液体溶液，其中包括滴眼剂。在不同实施例中，本专利技术提供了一种减弱与患有眼部疾病、障碍或损伤的受试者的视网膜神经节细胞缺失相关的目标眼部基因表达的方法，其中包括向受试者眼睛表面局部施用以滴眼剂为配方的眼科药物组合物。在不同实施例中，目标眼部mRNA的表达在患有眼部疾病、障碍或损伤的受试者视网膜眼部细胞中减弱。在不同实施例中，眼部细胞包括但不仅限于泪腺腺泡细胞、泪腺导管细胞、视网膜神经节细胞(RGC)、视网膜色素上皮(RPE)细胞、脉络膜细胞、角膜细胞、睫状突细胞或小梁网细胞或其组合。本专利技术提供了一种抑制受试者视网膜神经节细胞缺失的方法，其中包括无创伤性地向受试者眼睛表面施用眼科组合物，所述眼科组合物包括至少一种siRNA的治疗有效量，所述siRNA下调与受试者视网膜的视网膜神经节细胞缺失相关的目标基因表达，从而抑制视网膜神经节细胞的丧失。在某些实施例中，两种或多种目标基因根据本专利技术方法被下调。至少一种与受试者视网膜的视网膜神经节细胞缺失相关的目标基因(眼部mRNA)的减弱表达赋予眼部神经保护特性。在不同实施例中，至少一种眼部目标基因是选自表Al至A4的列表，如SEQ ID NO: 1-58所述。在一个实施例中，所述眼部障碍是青光眼。因此，本专利技术提供了一种抑制患有青光眼受试者的视网膜神经节细胞缺失的方法，其中包括局部(无创伤性)向受试者眼睛表面施用眼科组合物，所述眼科组合物包括包括至少一种siRNA的治疗有效量，所述siRNA下调与 受试者视网膜的视网膜神经节细胞缺失相关的目标基因表达，从而抑制受试者眼睛视网膜神经节细胞的缺失。在优选实施例中，siRNA是化学修饰的。在一些实施例中，化学修饰的siRNA减弱基因在受试者眼睛视网膜(目标眼部mRNA)的表达。在其他实施例中，化学修饰的siRNA减弱目标mRNA在受试者眼睛视神经中的表达。在某些实施例中，减弱与受试者视网膜神经节细胞缺失相关的至少一种目标基因的表达是青光眼的有效治疗方法。在某些实施例中，至少一种目标基因是选自表Al JBSEQ ID NO: 1-35所述。在某些优选实施例中，该目标基因是选自 CASP2(SEQ ID本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有如下结构的双链RNA化合物：5’iB?GCCAGAAUGUGGAACUCCU?3“（正义链；SEQ?ID?NO:503）3“CGGUCUUACACCUUGAGGA?5“（反义链；SEQ?ID?NO:1004）其中每一个A、C、U和G是核糖核苷酸，并且每一个连续核糖核苷酸通过磷酸二酯键与下一个核糖核苷酸连接；其中正义链包括，从5’末端数，在位点1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17和19的非修饰核糖核苷酸，位点18的L?脱氧胞苷，和在5’末端共价连接的反向脱氧脱碱基（iB）；并且其中反义链包括，从5’末端数，在位点2、4、6、8、11、13、15、17和19的2’?O?Me糖基修饰核糖核苷酸，以及在位点1、3、5、7、9、10、12、14、16和18的非修饰核糖核苷酸。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：E·法因施泰因，E·艾伯特，I·梅特，A·巴伊兰，I·斯皮瓦克，H·卡林斯基，N·斯拉格尔，
申请(专利权)人：夸克医药公司，
类型：发明
国别省市：