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一种酶活性及热稳定性提高的脂肪氧合酶及其构建方法技术

技术编号:8484779 阅读:276 留言:0更新日期:2013-03-28 04:05
本发明专利技术公开了一种酶活性及热稳定性提高的脂肪氧合酶,是在GenBank?PA119公布的基因序列编码的蛋白质基础上,其N端氨基酸缺失,其中缺失尤以缺失30个为佳。使用本方法得到的新型脂肪氧合酶,酶学性质较好的突变株,热稳定性提高2.1倍,比酶活仍能维持初始的90%。改造后的酶更适合工业应用,可降低生产成本,提高生产效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种脂肪氧合酶,特别是一种酶活性及热稳定性提高的脂肪氧合酶。技术背景微生物脂肪氧合酶(Lipoxygenase, LOX, ECl, 13. 11. 12)属于氧化还原酶,是一类含非血红素铁的蛋白质,能专一催化具有顺,顺4-烯结构的多不饱和脂肪酸,通过分子内加氧,形成具有共轭双键的氢过氧化衍生物,此物质是相当重要的化学和药物合成的中间体,同时能将其转化为酮,是食品风味物质醛与醇的前体物质。因此在食品领域有着广泛的应用前景。但脂肪氧合酶自身的一些缺陷如比酶活、热稳定性等因素,限制了脂肪氧合酶的应用范围。因此基于已得到的脂肪氧合酶在大肠杆菌中的表达平台,利用氨基酸缺失,对脂肪氧合酶进行分子改造,以期得到酶学性质更适合工业应用的脂肪氧合酶。
技术实现思路
为改善脂肪氧合酶比酶活低,热稳定性差的现状,本研究通过对脂肪氧合酶的N 端氨基酸进行缺失,从而使其柔性降低刚性增强,改变催化特性,提高热稳定性。为解决上述技术问题,本专利技术的技术方案为在GenBank PA1169公布的基因序列编码的氨基酸基础上,其N端氨基酸缺失,其中N端氨基酸缺失优选20个和30个氨基酸, 更优选30本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种酶活性及热稳定性提高的脂肪氧合酶,其特征在于在GenBank?PA1169公布的基因序列编码的脂肪氧合酶基础上,其N端氨基酸缺失。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陈坚堵国成刘松陆信曜冯岳
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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