一种卡拉胶降解菌及其发酵方法和应用技术

技术编号:8484722 阅读:176 留言:0更新日期:2013-03-28 03:59
本发明专利技术涉及一种新土地杆菌属的细菌,具体的说是一种降解卡拉胶的新菌及其发酵的方法和应用,其命名为卡拉胶降解菌13-Q,即Pedobacter?hainanensis?sp.13-Q,该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏单位名称:中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏日期:2011年12月9日,其保藏编号为CGMCC?NO.5564。本发明专利技术还对该菌发展了一套培养技术,能从该菌稳定生产具有降解卡拉胶能力的酶。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种新土地杆菌属的细菌,特别是一种卡拉胶降解菌及其发酵方法与应用。
技术介绍
卡拉胶是从某些的红藻中提取酸性的线性多聚糖,属于亲水性的线性硫酸化半乳糖家族。它们主要由交替的3-连接的β-D-吡喃半乳糖(G-单元)和4-连接的α-D-吡喃半乳糖(D-单元)或4-连接的3,6-内醚-a -D-吡喃半乳糖(DA_单元),形成重复的二糖单元组成。卡拉胶因具有优良的热可逆凝胶化、抗蛋白凝结、亲水无毒等性能而广泛应用于食品工业中。卡拉胶还用于医药行业,如作为微生物培养基、缓释胶囊/片剂、药膏基、鱼肝油乳化剂等。卡拉胶寡糖是卡拉胶的降解产物,分子量较小,溶解性较好,同时因糖链上的活性基团充分暴露出来,使其活性较卡拉胶显著提高,拓宽了医药上的应用领域。研究发现卡拉胶寡糖具有特殊的医药疗效,它对许多重要病毒病原(如疱疹病毒、粘液病毒、HPV等) 具有广谱抑制活性,有许多证据表明卡拉胶寡糖能够在抗HIV上提供保护。卡拉胶寡糖还对免疫系统具有持续性作用,能有效的抗胃蛋白酶活、抗溃疡、抗凝血、抗栓物质。目前降解卡拉胶的方法有物理法、化学法、酶解法。其中酶解法以其降解过程容易控制,反应条件温 和,对环境没有污染等优点而倍受青睐。虽然目前已在很多种微生物中发现卡拉胶酶,但由于酶活不高,产酶量小等缺点,不能满足对卡拉胶寡糖日益增长的需求, 因此寻找具有能分泌降解卡拉胶能力酶的菌种是十分需要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能分泌卡拉胶降解酶的新菌种,并提供该新菌种的分离培养方法和降解卡拉胶生成寡糖的方法。(以下部分与权利要求一致)本专利技术所述的卡拉胶降解菌(Pedobacter hainanensis sp. ) 13-Q菌株(CGMCC NO. 5564)分离自海南省海口市黎安镇麒麟菜晾晒处的土壤中,经一系列形态学、生理生化、 16S rRNA、脂肪酸组分分析、醌型分析表明它属于土地杆菌属,但又区别于土地杆菌属中的其它种,定名为卡拉胶降解菌(Pedobacter hainanensis sp. )13_Q。该菌分类位置比较独立,申请人已针对该菌发展了一套培养技术,能从该菌稳定生产具有降解卡拉胶能力的酶。 该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏单位名称中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏日期2011年12月9日,其保藏编号为CGMCC NO. 5564。所述卡拉胶降解菌菌株的生物化学特征为菌落形态特征为在卡拉胶固体培养基上生长良好,菌落黄色,圆形,表面略凸起,光滑,反光,不透明,边缘整齐,直径约为1. Omm ;菌体形态特征为细胞杆状,O. 3^0. 5 μ mX1. 3^2. O μ m,单个或成对排列,革兰氏染色阴性,不生孢,运动;主要生理生化特征在卡拉胶液体培养基中可产生卡拉胶降解酶;好氧;可以利用L-阿拉伯糖、D-木糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露醇、鼠李糖、α -甲基-D-葡萄糖苷、N-乙酰-葡萄糖胺、熊果苷、七叶灵、柳醇、纤维二糖、麦芽糖、乳糖、海藻糖、龙胆二糖、D-松二糖、葡萄糖酸盐。但是葡萄糖和阿拉伯糖产酸。该菌的氧化酶、过氧化氢酶、碱性磷酸酶、酯酶(C4)、类脂酯酶 (CS)反应为阳性;不呈现脲酶、色氨酸脱氨酶、鸟氨酸脱羧酶活性;该菌不能水解淀粉、明胶、酪素、菊糖等;不生成吲哚和硫化氢;硝酸盐还原呈阴性反应;在麦康凯培养基上不能生长。脂肪酸组分特征主要脂肪酸及比例为iso-C15:0 (40. 4%), Iso-C15 : 0 2-0Η and/or C16ll ω 7c (18. 9%) and iso-C17:。3_0Η(18·4%)。醌型特征主要优势醌为甲基萘醌Κ7 (ΜΚ-7),含量大约为92.9%。DNA G+C mol% 含量特征DNA G+C mol% 含量为 42. 7%。 遗传学特征所述卡拉胶降解菌(Pedobacterhainanensis sp. )13_Q 菌株的 16S rRNA 全基因序列。菌株16S rRNA全基因序列(139lbp) (Genbank登录号为JQ083404)为I gtcgaggggc agcggggact ttcgggttcg ccggcgaccg gcgcacgggt gcgtaacgcg61 tatgcaacct acctttatca gggggatagc ccggagaaat ccggattaac accgcataaa121atcacagtaccgcatggtataatgatcaaatatttataggataaagatgggcatgcgtgt181cattagctagttggagaggtaacggctcaccaaggcgacgatgactaggggatctgagag241gatgaccccccacactggtactgagacacggaccagactcctacgggaggcagcagtaag301gaatattggtcaatggagggaactctgaaccagccatgccgcgtgcaggaagactgccct361atgggttgtaaactgcttttgtatgggaataaaccctggtatgtataccaggctgaatgt421accataagaataaggatcggctaactccgtgccagcagccgcggtaatacggaggatcca481agcgttatccggatttattgggtttaaagggagcgtaggcggcctgttaagtcaggggtg541aaagacggtggctcaaccatcgcagtgcctttgatactgataggcttgaatatagttgag601gtaggcggaatgtgacaagtagcggtgaaatgcatagatatgtcacagaacaccgattgc661gaaggcagctatattgacgctgaggctcgaaagcgtggggatcaaacagg721attagataccctggtagtccacgccctaaacgatgataactcgatgttagcgatatacag781ttagcgtccaagcgaaagcgttaagttatccacctggggagtacgcccgcaagggtgaaa841ctcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggaggagcatgtggtttaattcgatgata901cgcgaggaaccttacccgggcttgaaagttactgcattactcagagatgagtaagacctt961cgggacaggaaactaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgccgtgaggtgttgggtt1021 aagtcccgca acgagcgcaa cccctatgtt tagttgccag catttaaggt ggggactcta1081 aacagactgc ctgcgcaagc agagaggaag gatgggacga cgtcaagtca tcatggccct1141 tacgtccggg gctacacacg tgctacaatg gtcggtacag agggccgcta cccagcgatg1201 ggatgccaat ctcaaa本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卡拉胶降解菌,其特征在于:命名为卡拉胶降解菌13?Q,即Pedobacter?hainanensis?sp.13?Q,该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏单位名称:中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏日期:2011年12月9日,其保藏编号为CGMCC?NO.5564。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:杜昱光孟彦羽傅赟彬赵勇尹恒王文霞拓亚琴
申请(专利权)人:中国科学院大连化学物理研究所
类型:发明
国别省市:

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