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一种在解脂耶罗维亚酵母中制备多肽的方法技术

技术编号:8456484 阅读:324 留言:0更新日期:2013-03-22 07:26
本发明专利技术涉及一种在hp4d启动子调节下在解脂耶罗维亚酵母中制备蛋白质、优选外源蛋白质的方法。具体而言,本发明专利技术描述了一种通过调节碳的供应和/或氮的供应而调节解脂耶罗维亚酵母的生长速率的方法。发现生长速率小于0.045h″l对于增加解脂耶罗维亚酵母生物质和增加所生产的感兴趣的外源蛋白质的量而言是最优的。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】—种在解脂耶罗维亚酵母中制备多肽的方法
技术介绍
本专利技术涉及一种在解脂耶罗维亚酵母(Yarrowia Iipolytica)中制备多肽的方法。特别地,本专利技术涉及一种通过操控酵母的生长条件并由此操控所述酵母的生长过程,对使用hp4d启动子在解脂耶罗维亚酵母(Y. Iipolytica)中表达感兴趣的多肽进行优化的方法。解脂耶罗维亚酵母是一种用于生产柠檬酸的非常规酵母,其已被美国食品和药物管理局(American Food and Drug Administration, FDA)确定为公认安全(GRAS)状态(Fickers et al.,2005)。许多分子工具均可用于外源蛋白质在解脂耶罗维亚酵母中的表达,因为该酵母具有高的分泌能力。多拷贝带载体(Multi-copy vector)含有ura3d4标记,其在多拷贝互补中是需要的,以允许对带多个插入的转化株进行筛选(Madzak et al. , 2004)。所述ura3d4筛选标记确保对带10 - 13个完整表达盒(integrated cassette)拷贝的转化株的筛选(Juretzek et al.,2001)。所述hp4d本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:彼得勒斯·雅各布斯·范泽尔
申请(专利权)人:CSIR公司
类型:
国别省市:

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