治疗β-ENaC-相关疾病的有机组合物制造技术

本公开内容涉及用于治疗β-ENaC相关性疾病的方法中的RNAi活性剂，所述疾病例如囊性纤维化、1型假性醛固酮减少症(PHA1)、李德尔综合征、高血压、碱中毒、低钾血症和肥胖相关性高血压，使用治疗有效量的针对β-ENaC的RNAi活性剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗β-ENaC-相关疾病的有机组合物基于35U. S. C. § 119(a)_(d)，本申请要求于2010年4月23日提交的美国临时申请61/327，379，和于2010年5月11日提交的美国临时申请61/333，398的优先权，其内容通过引用全文整合到本文中。专利技术背景环境和机体之间的粘膜表面具有多种保护机制。一种防御形式是用液体清洁表面。液体的量反映了在上皮液体分泌(通常反映了与水和阳离子的反荷离子偶联的阴离子分泌作用)和液体吸收(通常反映了与水和反荷阴离子偶联的Na+吸收)之间的平衡。许多粘膜表面疾病是由分泌(太少)和吸收(太多)之间失衡导致液体过少而引起的。一种平衡液体层的方法是减少Na+通道介导的液体吸收。非电压门控的阿米洛利敏感型钠通道控制许多器官中的液体和电解质的跨上皮运输。许多紧密型上皮的顶膜含有钠通道，其主要特征是与利尿剂阻断剂阿米洛利的高亲和力。这些通道介导钠主动重吸收的第一步，这是对维持体内的水盐体内稳态关键性的步骤。在脊椎动物中，通道控制肾、结肠、肺和汗腺中的钠重吸收；且还在味觉中发挥作用。Na+和液体吸收的限速步骤是受表皮的钠(Na+)通道(ENaC)介导的。这些钠通道是由3个亚基组成的异聚复合物a -ENaC, β -ENaC和Y -ENaC0β -ENaC (也被称为SCNN1B)编码该钠通道的β亚基，该基因中的突变和/或表达改变与若干种疾病相关(和/或与疾病治疗相关)，包括囊性纤维化、I型假性醛固酮减少症(PHAl)、李德尔综合征、高血压、碱中毒、低钾血症和肥胖相关性高血压。对于β-ENaC相关性疾病的治疗存在需要。专利技术概述·本公开内容涵盖了针对β -ENaC的RNAi活性剂，其用于治疗β -ENaC相关性疾病，例如囊性纤维化、I型假性醛固酮减少症(PHAl)、李德尔综合征、高血压、碱中毒、低钾血症和肥胖相关性高血压。本公开内容还涵盖了治疗具有至少部分由a-ENaC表达介导的病理性状态的人对象的方法，方法包括向对象施用治疗有效量的针对β -ENaC的RNAi活性剂。本公开内容提供了可用于降低对象中的β -ENaC水平的特定的RNAi活性剂和方法，所述对象例如哺乳动物，如人。本公开内容具体提供了包含β-ENaC的至少15个或更多个连续核苷酸的双链RNAi活性剂。具体而言，本公开内容提供了这样的活性剂，所述活性剂包含15个或更多个连续核苷酸，所述连续核苷酸与例如表I提供的RNAi活性剂的连续核苷酸存在0、1、2或3个核苷酸的差异。在一个实施方案中，RNAi活性剂可以包含每条链少于30个核苷酸，例如18-23个核苷酸，和/或19-21个核苷酸，和/或例如表I中提供的那些。双链RNAi活性剂可以在3’和/或5’端的一端或两端具有平端或1、2、3或4个核苷酸(即，l_4nt)的突出端。双链RNAi活性剂还可以任选的包含一个或两个3’帽和/ 或一个或多个修饰的核苷酸。本文提供的修饰的序列变体包括其余相同，但含有用相应的修饰核苷酸对天然存在的核苷酸的取代的序列。此外，RNAi活性剂可以仅含有天然存在的核糖核苷酸亚基，或者在一个或多个取代的核苷酸亚基上含有一个或多个对糖、磷酸或碱基的修饰，不论所述亚基包含核糖核苷酸亚基还是脱氧核糖核苷酸亚基。在一个实施方案中，所公开的RNAi活性剂的修饰的变体包括这样的RNAi活性剂,所述RNAi活性剂具有相同的序列,但在一个或多个核苷酸亚基上具有对一个或多个糖、磷酸或碱基的一个或多个修饰。在一个实施方案中，修饰改善RNAi 活性剂的功效、稳定性和/或降低RNAi活性剂的免疫原性。本公开内容的一个方面涉及包含至少一个非天然核苷碱基的双链寡核苷酸。在某些实施方案中，非天然的核苷碱基是二氟甲苯基、硝基吲哚基、硝基吡咯基或硝基咪唑基。在特定的实施方案中，非天然的核苷碱基是二氟甲苯基。在某些实施方案中，两条寡核苷酸链中仅一条链含有非天然的核苷碱基。 在某些实施方案中，两条寡核苷酸链都含有非天然的核苷碱基。RNAi活性剂可以任选的与经选择改善一种或多种特征的配体结合，所述特征是例如活性剂(例如，胆固醇或其衍生物)的稳定性、分布和/或细胞摄入。RNAi活性剂可以是分离的或者是本文描述方法使用的药物组合物的一部分。特别的是，所述药物组合物可以配制成用于向肺或鼻道递送，或者配制成用于肠胃外施用的。药物组合物可以任选的包含两种或多种RNAi活性剂，每种活性剂针对β-ENaC mRNA的相同或不同的区段。任选的，药物组合物可以进一步包含用于任何β -ENaC-相关性疾病的任何已知治疗，或与所述 β -ENaC-相关性疾病的任何已知治疗联合使用。本公开内容还提供了用于降低细胞中的β-ENaC mRNA水平的方法，特别是在以 ENaC的过表达或活性过高为特征的疾病的情况下。本公开内容还涵盖了治疗具有这样的病理学状态的人对象的方法，所述状态至少是部分由β-ENaC的表达介导的，方法包括向对象施用治疗有效量的RNAi活性剂β-ENaC的步骤。此类方法包括向对象施用一种本公开内容的RNAi活性剂的步骤，如下文进一步所述。本方法利 用了选择性降解细胞中的靶RNA 的RNA干扰所涉及的细胞机制，并且包括将细胞与本公开内容的RNAi活性剂之一接触的步骤。此类方法可以直接在细胞上实施，或者可以在哺乳动物对象上实施，后者是通过向所述对象施用一种本公开内容的RNAi活性剂/药物组合物。降低细胞中的靶β-ENaC RNA导致所产生的编码β-ENaC蛋白质的量降低。在生物体中，这可以导致上皮电位差降低、流体吸收平衡和粘膜纤毛清除率增加。本公开内容的方法和组合物(例如方法和β-ENaC RNAi活性剂组合物)可以以本文描述的任何剂量和/或制剂使用，以及用本文描述的任何施用途径使用。本公开内容的一个或多个实施方案的细节描述在附图和下文的说明中。根据说明书、附图和权利要求，本公开内容的其他特征、目标和优点是显而易见的。附图简介图 1Α-1Β 描述了 RNAi 活性剂 AD20807、AD20826、AD20832、AS20834、AD20848 和 AD20861在体内敲低β -ENaC活性的能力。图2A-2C描述了 β -ENaC RNAi活性剂AD20832对人支气管上皮细胞中的ENaC通道功能活性的体外效应。专利技术详述本公开内容涵盖了针对β -ENaC的RNAi活性剂，所述RNAi活性剂用于治疗β -ENaC-相关性疾病(例如，与β -ENaC中的突变和/或改变的表达、水平和/或活性相关的疾病，和/或通过调控β -ENaC的表达、水平和/或活性可治疗的疾病)，例如囊性纤维化、I型假性醛固酮减少症(PHAl)、李德尔综合征、高血压、碱中毒、低钾血症和肥胖相关性高血压。本公开内容还提供了治疗具有这样的病理学状态的人对象的方法，所述状态至少是部分由β -ENaC的表达介导的，方法包括向对象施用治疗有效量的RNAi活性剂β -ENaC 的步骤。本公开内容的多种实施方案包括包括本文描述的反义链的RNAi活性剂。在一个实施方案中，本公开内容涉及包含RNAi活性剂的组合物，所述RNAi活性剂包含正义链和反义链，其中反义链包含至少15个连续的核苷酸，所述至少15个连续的核苷酸与例如表I提供的β -本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·德福格罗尔斯，J·L·迪纳尔，E·海克曼，G·欣克尔，S·米尔斯坦，AM·普里奇诺，A·斯普拉格，
申请(专利权)人：诺瓦提斯公司，
类型：
国别省市：