一种特异性检测植物乳杆菌的检测方法及其试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种特异性检测植物乳杆菌的检测方法及试剂盒。该检测方法包括步骤：（1）提取基因组DNA；（2）以（1）所提取的DNA为模板，采用如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5和SEQ?ID?NO.6所示的引物进行PCR反应；（3）对（2）得到的扩增产物进行电泳检测和结果判断。该试剂盒包括序列如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5和SEQ?ID?NO.6所示的引物。该引物和方法检测植物乳杆菌的灵敏度和准确度相比现有技术有大幅度提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程
，具体涉及特异性检测植物乳杆菌的检测方法及其试剂盒。
技术介绍
乳酸菌是一群形态代谢性能和生理学特征不完全相同且能发酵碳水化合物产生乳酸的革兰氏阳性细菌。目前在自然界中已发现的乳酸菌在细菌分类学上可以划分为43个属，包括373个种及亚种，其中绝大多数是厌氧菌或兼性厌氧菌。人类对乳酸菌的分类鉴定和利用已经有久远的历史，并积累了丰富的经验和知识，形成了至今一直沿用的传统分类鉴定方法，包括形态特征、生理生化反应及血清学反应等，这些方法都是基于微生物表面受体的特异性，属于表型分类法。 随着科技的进步，分子生物学方法以其较高的准确性及稳定性等优点逐步替代传统的形态学和生理学检测方法，并已成功介入到益生菌的鉴定领域。16S rDNA序列同源性分析作为细菌系统发育和亲缘关系研究已被普遍接受和广泛应用，但是乳杆菌属内许多种的16S rDNA基因序列具有较高同源性，利用该方法无法使鉴定精确到种。例如，16S rDNA基因序列分析法不能将相近的植物乳杆菌与戊糖乳杆菌区分开。伴随着高通量测序技术的快速发展，大量乳酸菌菌株的基因组图谱已被解析。这些基因组数据可以使我们了解不同本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异性检测植物乳杆菌（Lactobacillus?plantarum）的方法，其特征在于，其包括如下步骤：（1）提取待测样品的基因组DNA；（2）以步骤（1）所提取的基因组DNA为模板，采用核苷酸序列分别如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2、SEQ?ID?NO.3、SEQ?ID?NO.4、SEQ?ID?NO.5和SEQ?ID?NO.6所示的引物进行多重PCR反应，以扩增特征性片段；（3）对步骤（2）得到的扩增产物进行电泳检测并进行结果判断。

【技术特征摘要】
1.一种特异性检测植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的方法,其特征在于,其包括如下步骤 (1)提取待测样品的基因组DNA； (2)以步骤(I)所提取的基因组DNA为模板，采用核苷酸序列分别如SEQID NO. USEQID NO. 2、SEQ ID NO. 3、SEQ ID NO. 4、SEQ ID NO. 5 和 SEQ ID NO. 6 所示的引物进行多重PCR反应，以扩增特征性片段； (3)对步骤(2)得到的扩增产物进行电泳检测并进行结果判断。2.如权利要求I所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述多重PCR反应的反应体系中包括浓度各为 O. 2 O. 5 μ mol/L 的序列分别如 SEQ ID NO. USEQ ID NO. 2,SEQ ID NO. 3,SEQID NO. 4、SEQ ID NO. 5 和 SEQ IDN0. 6 所示的引物，O. I O. 3mmol/L 的 dNTP’lXPCI^lW液，O. 5 I. 5mmol/L 的 Mg2+，O. 05 O. 15U/ μ L 的 Taq DNA 聚合酶和 I. O 2. Ong/ μ L 的DNA模板。3.如权利要求I所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述多重PCR反应的反应体系中包括浓度各为 O. 4 μ mol/L 的序列分别如 SEQ ID NO. USEQ ID NO. 2,SEQ ID NO. 3,SEQ IDNO. 4,SEQ ID NO. 5 和 SEQ ID NO. 6 所示的引物，O. 2mmol/L 的 dNTP，I XPCR 缓冲液，Immol/L 的 Mg2+，O. 05U/ μ L 的 Taq DNA 聚合酶，2. Ong/ μ L 的 DNA 模板。4.如权利要求I所...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈臣，任婧，周方方，艾连中，
申请(专利权)人：光明乳业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：