鉴定大豆开花期长短的分子标记及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种鉴定大豆开花期长短的分子标记及其应用。所述分子标记为用序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增大豆品种冀豆12号的基因组DNA得到的大小为270bp的分子标记A；和/或，用序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增大豆品种冀NF58的基因组DNA得到的大小为311bp的分子标记B。本发明专利技术所提供的分子标记可用于大豆品种或株系开花期长短的鉴定或筛选，大大提高了育种效率，在实际育种和生产中具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种鉴定大豆开花期长短的分子标记及其应用。
技术介绍
大豆开花期是重要的生育期性状之一，是控制营养生长与生殖生长转化的重要因素。开花期长短对多个产量相关性状都有影响，准确预测开花期的长短对筛选适合的大豆品种进行育种具有重要意义。分子标记是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记，是DNA水平遗传多态性的直接的反映。与其他几种遗传标记——形态学标记、生物化学标记、细胞学标记相比，DNA分子标记具有的优越性有大多数分子标记为共显性，对隐性的性状的选择十分便利；基因组变异极其丰富，分子标记的数量几乎是无限的；在生物发育的不同阶段，不同组织的DNA都可用于标记分析；分子标记揭示来自DNA的变异；表现为中性，不影响目标性状的表达，与不良性状无连锁；检测手段简单、迅速。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种鉴定或辅助鉴定大豆开花期长短的分子标记。所述分子标记为如下I)或2)的分子标记I)分子标记A和分子标记B ；2)分子标记A ；所述分子标记A为用序列表序列I所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链 DNA组成的引物对PCR扩增大豆品种冀豆12号的基因组DNA得到的大小为270bp的分子标记；所述分子标记B为用序列表序列I所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA 组成的引物对PCR扩增大豆品种冀NF58的基因组DNA得到的大小为311bp的分子标记；所述开花期长是指所述待测大豆从播种到开花的天数大于或等于43天；所述开花期短是指所述待测大豆从播种到开花的天数小于或等于36天。所述从播种到开花的种植地在本实施例中具体为中国河北省石家庄市室外大田， 播种时间具体为6月底。所述分子标记A和所述分子标记B是将所述PCR扩增的产物在5-7% (如6%)的聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离得到的；所述6%聚丙烯酰胺凝胶是指每配制IOOmL所述聚丙烯酰胺凝胶使用丙烯酰胺57g 和双苯酰亚胺3克。本专利技术保护上述分子标记在大豆育种中的应用。本专利技术还提供一种鉴定或辅助鉴定大豆开花期长短的方法，包括用序列表序列I 所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增待测大豆的基因组 DNA，若所述PCR扩增的产物为所述分子标记A，则所述待测大豆为开花期长的大豆或候选为开花期长的大豆；若所述PCR扩增的产物为所述分子标记B，则所述待测大豆为开花期短的大豆或候选为开花期短的大豆；所述开花期长是指所述待测大豆从播种到开花的天数大于或等于43天；所述开花期短是指所述待测大豆从播种到开花的天数小于或等于36天；所述从播种到开花的种植地在本实施例中具体为中国河北省石家庄市室外大田，播种时间具体为6月底。本专利技术保护所述方法在筛选所述开花期长的大豆中的应用。本专利技术保护所述方法在筛选所述开花期短的大豆中的应用。 在上述方法或应用中，所述待测大豆为大豆品种冀豆12号、冀NF58或由所述冀豆12号和異NF58衍生的品种或品系。在上述方法或应用中，所述由冀豆12号和冀NF58衍生的品种或品系为将所述冀豆12号和冀NF58杂交并繁衍至F2代以上的世代。在本专利技术的实施例中，所述由冀豆12号和冀NF58衍生的品种或品系为以冀豆12号为母本、冀NF58为父本的F9:11重组自交系群体。实验证明，与实测开花期天数结果相比，用序列表序列I所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对A，PCR扩增待测大豆(以冀豆12号为母本、冀NF58为父本的F9:11重组自交系群体的64个株系)的基因组DNA，通过得到的分子标记(分子标记A和分子标记B)预测上述待测大豆开花期长短，准确率可达93. 8%。本专利技术可用于鉴定或筛选大豆品种或株系的开花期长短，大大提高育种效率，在实际育种和生产中具有广阔的应用前景。附图说明图I为用引物对A PCR扩增待测大豆的6%聚丙烯酰胺凝胶电泳图。其中，从左至右的泳道依次为以冀豆12号为母本、冀NF58为父本的F9:11重组自交系群体中的编号分别为 5、6、10、13、15、22、28、32、35、38、39、45、46、54、58、66、68、71、72、75、76、77、79、98、99、102、110、111、112、114、116、131、132、150、158 和 167 的家系、大豆品种冀豆 12 号(J)、冀NF58 (N)。图2为用引物对X PCR扩增待测大豆的6%聚丙烯酰胺凝胶电泳图。其中，从左至右的泳道依次为大豆品种冀豆12号(J)、冀NF58(N)、以冀豆12号为母本、冀NF58为父本的卩9:11重组自交系群体中的编号分别为5、6、10、13、15、22、28、32、35、38、39、45、46、54、58、66、68、71、72、75、76、77、79、98、99、102、110、111、112、114、116、131、132、150、158 和 167 的豕系。图3为用引物对A PCR扩增待测大豆的6%聚丙烯酰胺凝胶电泳图。其中，从左至右的泳道依次为大豆品种冀豆12号(J)、3个冀NF58(N)、以冀豆12号为母本、冀NF58为父本的F9:11重组自交系群体中的编号分别为1、7、9、16、19、20、41、42、48、49、50、63、73、81、84、86、87、88、96、127、138、151、156、161、162、163、168 和 170 的家系。图4为用引物对X PCR扩增待测大豆的6%聚丙烯酰胺凝胶电泳图。其中，从左至右的泳道依次为大豆品种冀豆12号(J)、冀NF58(N)、以冀豆12号为母本、冀NF58为父本的 F9111 重组自交系群体中的编号分别为 1、7、9、16、19、20、41、42、48、49、50、63、73、81、84、86、87、88、96、127、138、151、156、161、162、163、168 和 170 的家系。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。大豆品种冀豆12号夏播开花期43天，河北冀丰农产品科技有限公司。大豆品种冀NF58 :夏播开花期36天，河北冀丰农产品科技有限公司。实施例I、利用分子标记测定大豆品种冀豆12号和大豆品种冀NF58利用SDS法提取大 品种冀丑12号的基因组DNA,以该基因组DNA为I旲板,用序列表序列I所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对A进行PCR扩增，取10 μ I PCR扩增产物，在95°C变性3min，立即放至冰上冷却，用6%聚丙烯酰胺凝胶(测序胶)在90W恒功率下电泳分尚I. 5小时，获得大小为270bp的分子标记A。利用SDS法提取大豆品种冀NF58的基因组DNA，以该基因组DNA为模板，用序列表序列I所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对A进行PCR扩增，取10 μ I PCR扩增产物，在95°C变性3min，立即放至冰上冷却，用6%聚丙烯酰胺凝胶(测序胶)在90W恒功率下电泳分尚I. 5小时,获得大小为311bp的分子标记B。同时利用引物对X (由序列表序列3所示的单链DNA和序列表序列4所示的单链DNA组成)对上述两个大豆品种冀豆12号的基因组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于鉴定或辅助鉴定待测大豆开花期长短的分子标记，其特征在于：所述分子标记为如下1）或2）的分子标记：1）分子标记A和分子标记B；2）分子标记A；所述分子标记A为用序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增大豆品种冀豆12号的基因组DNA得到的大小为270bp的分子标记；所述分子标记B为用序列表序列1所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增大豆品种冀NF58的基因组DNA得到的大小为311bp的分子标记；所述开花期长是指所述待测大豆从播种到开花的天数大于或等于43天；所述开花期短是指所述待测大豆从播种到开花的天数小于或等于36天。

【技术特征摘要】
1.一种用于鉴定或辅助鉴定待测大豆开花期长短的分子标记，其特征在于所述分子标记为如下I)或2)的分子标记1)分子标记A和分子标记B；2)分子标记A；所述分子标记A为用序列表序列I所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增大豆品种冀豆12号的基因组DNA得到的大小为270bp的分子标记；所述分子标记B为用序列表序列I所示的单链DNA和序列表序列2所示的单链DNA组成的引物对PCR扩增大豆品种冀NF58的基因组DNA得到的大小为311bp的分子标记；所述开花期长是指所述待测大豆从播种到开花的天数大于或等于43天；所述开花期短是指所述待测大豆从播种到开花的天数小于或等于36天。2.根据权利要求I所述的分子标记，其特征在于所述分子标记A和所述分子标记B是将所述PCR扩增的产物在5 — 7%的聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离得到的。3.权利要求I或2所述的分子标记在大豆育种中的应用。4.一种鉴定或辅助鉴定大豆开花期长...

【专利技术属性】
技术研发人员：张孟臣，王涛，闫龙，杨春燕，
申请(专利权)人：河北省农林科学院粮油作物研究所，
类型：发明
国别省市：