环氧化物水解酶基因、编码酶、载体、工程菌及应用制造技术

技术编号:8449219 阅读:216 留言:0更新日期:2013-03-21 03:25
本发明专利技术公开了一种源自于壤霉菌ZJB120203的环氧化物水解酶基因、编码酶、载体、重组基因工程菌,以及在制备重组环氧化物水解酶中的应用;本发明专利技术环氧化物水解酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的表达重组质粒pET28a-EH,再转化至大肠杆菌BL21中,获得重组大肠杆菌,该重组大肠杆菌含有重组环氧化物水解酶,可以利用重组大肠杆菌为酶源,以外消旋环氧氯丙烷、外消旋的苯基环氧乙烷为底物,进行生物转化反应制备高光学纯度的S-环氧氯丙烷和R-苯基环氧乙烷。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从壤霉菌ZJB120203中提取的环氧化物水解酶基因、编码酶、载体、工程菌及应用
技术介绍
环氧化物水解酶(EC 3. 3. 2. 3)是一组功能相似的酶系,能够立体选择性催化环氧化合物生成光学活性的环氧化物和相应邻位二醇。作为一种水解酶它具有一般水解酶的特点如1.反应不需要辅酶的协助。2.具有广泛的来源。3.在非水溶剂中仍具有催化活力。4.这些反应常常显示出化学、区域和立体对映选择性,能够对同类型广泛的底物进行作用。环氧化物水解酶广泛存在于自然界中,在哺乳动物、昆虫、微生物和植物中均有发现。哺乳动物环氧化物水解酶参与了体内有害异体物质的代谢,并有调控血压等功能;植物环氧化物水解酶能参与角质以及抗菌物质的合成;昆虫环氧化物水解酶具有分解代谢昆虫发育过程中重要的化合中间体保幼激素以及代谢植物释放的化学预防化合物的重要功能; 而微生物是环氧化物水解酶的重要的来源。由于微生物种类的多样性、生长速度快、易于培养和产量高等优点,从微生物中筛选获得环氧化物水解酶是目前主要的途径。近年,已从多种微生物中发现了环氧化物水解酶,如Rhodococcus equi, Rhodoco本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种环氧化物水解酶基因,其特征在于所述环氧化物水解酶基因的核苷酸序列为SEQ?ID?NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.一种环氧化物水解酶基因,其特征在于所述环氧化物水解酶基因的核苷酸序列为SEQ ID NO 1 所示。2.一种由权利要求I所述环氧化物水解酶基因编码的环氧化物水解酶。3.如权利要求2所述的环氧化物水解酶,其特征在于所述环氧化物水解酶的氨基酸序列为SEQ ID NO 2所示。4.一种含权利要求I所述环氧化物水解酶基因的重组载体。5.一种由权利要求4所述重组载体转化得到的重组基因工程菌。6.一种权利要求I所述环氧化物水解酶基因在制备重组环氧化物水解酶中的应用。7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述的应用为将含所述环氧化物水解酶基因构建载体,再将载体转化大肠杆菌,获得的重组基因工程菌进行诱导培养,培养液分离获得含环氧化物水解酶的菌体细胞。8.一种含权利要求2所述环氧化物水解酶基因的环氧化物水解酶在制备手性环氧化物中的应用,其特征在于所述应用为以含环氧化物水解酶的重组基因工程菌经诱导培养获得的湿菌体为酶源,以外消旋环氧化物为底物,于PH ...

【专利技术属性】
技术研发人员:郑裕国薛锋柳志强邹树平胡忠策沈寅初
申请(专利权)人:浙江工业大学
类型:发明
国别省市:

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