一种宽pH作用范围木聚糖酶及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种宽pH作用范围木聚糖酶XynA（EC?3.2.1.8)及其应用，属于酶工程和基因工程领域。该木聚糖酶XynA来源于Streptomyces?sp.HJ，其最适pH5.5，pH稳定范围3～11；最适温度60℃，50℃半衰期为30h；Km和Vmax分别为3.45mg/mL，845.23μmol/min/mg。其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1，成熟蛋白436个氨基酸残基。重组XynA在E.coli?BL21(DE3)中表达胞外酶活为213.5U/mL，是野生菌Streptomyces?sp.HJ酶活的11倍。XynA有较宽的pH作用范围，尤其在碱性环境下，其可能在竹原纤维生物酶脱胶、纸浆漂白等行业具有潜在利用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种木聚糖酶及其应用，特别是一种宽pH作用范围的木聚糖酶，属于酶工程和基因工程领域。
技术介绍
木聚糖(Xylan) (EC 3. 2. I. 8)是植物细胞壁半纤维素组分的主要成分，占植物碳水化合物总量的三分之一。在自然界中，木聚糖是继纤维素之后含量最为丰富的多聚糖。木聚糖的主链由多个毗喃木糖基通过β_1，4-糖苷键连结形成，侧链含多种不同取代基。木聚糖酶属于0-glycoside hydrolases(EC 3. 2. I. x),可将木聚糖降解成低聚木糖和木糖单糖。它是一种复合酶，主要包括 endo-β-I, 4-xylanase (EC 3· 2· I. 8)和 β-xylosidase (EC3. 2. I. 37)。前者从主链内部随机作用于β -I, 4-糖苷键，将木聚糖分解成低聚木糖；后者则作用于低聚木糖的末端，释放出木糖单糖。目前已经发现的endo- β -I, 4-xylanase主要分布在5、7、8、10、11、43等家族的糖苷水解酶中，其中大部分属于GH familylO和11两大家族。GH familylO木聚糖酶通常含有两个结构域，包括催化结本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种宽pH作用范围木聚糖酶，其特征在于其氨基酸序列如以下1）或2）或3）所示：1）其氨基酸序列为SEQ?ID?NO.1所示序列；2）在1）限定的氨基酸序列的基础上氨基酸序列经过一个或者几个氨基酸取代、缺失或添加，且具有木聚糖酶活性的氨基酸序列；3）与1）或2）限定的氨基酸序列具有90%以上同源性，且具有木聚糖酶活性的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种宽PH作用范围木聚糖酶，其特征在于其氨基酸序列如以下I)或2)或3)所示 I)其氨基酸序列为SEQ ID NO. I所示序列； 2 )在I)限定的氨基酸序列的基础上氨基酸序列经过一个或者几个氨基酸取代、缺失或添加，且具有木聚糖酶活性的氨基酸序列； 3)与I)或2)限定的氨基酸序列具有90%以上同源性，且具有木聚糖酶活性的氨基酸序列。2.编码权利要求I所述木聚糖酶的基因，其特征在于其核苷酸序列如SEQID NO. 2所示。3.含有权利要求I或2所述木聚糖酶的基因工程菌。4.权利要求3所述基因工程菌的构建方法，其特征在于包括如下步骤 1)设计引物克隆木聚糖酶的基因xyn...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴敬，陈晟，何洁，宿玲恰，陈坚，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：