一种海蛾提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种海蛾提取物及其制备方法和应用。通过体积分数为50%~80%的乙醇浸泡、甲醇浸泡或热水煮沸三种方法处理干燥海蛾，减压回收浸泡后的体积分数为50%~80%的乙醇水溶液、甲醇或水后得到海蛾总浸膏；将得到的海蛾总浸膏混悬于水中，得到海蛾总浸膏溶液，用60~90沸程的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对海蛾总浸膏溶液依次进行萃取，减压回收萃取后的乙酸乙酯和正丁醇，得到的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位即为海蛾提取物。本发明专利技术的海蛾提取物具有较好的抗氧化能力，可以应用于制备抗氧化保健食品或药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及海洋生物医药领域，具体涉及一种海蛾提取物及其制备方法和应用。技术背景海蛾(Pegasus laternarius Cuvier)是一种近海生活的小鱼，另丨」名海麻雀、海燕， 属于海蛾鱼目(Pegasiformes)、海蛾鱼科(Pegasidae)。广东沿海民间常以全鱼干品为药用，其全体具化痰止咳、宣肺透疹、壮阳补骨、消瘿散结、燥湿止泻等功效。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种具有较好的抗氧化功能的海蛾提取物及其制备方法和应用。本专利技术的海蛾提取物是通过以下方法制备的，该方法包括以下步骤(I)用甲醇浸泡、热水煮沸或体积分数为50°/Γ80%的乙醇水溶液浸泡三种方法处理干燥海蛾，分别浓缩后得到海蛾总浸膏；(2)将步骤(I)得到的海蛾总浸膏混悬于水中，得到海蛾总浸膏溶液，用6(T90°C 沸程的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对海蛾总浸膏溶液依次进行萃取，对乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物进行浓缩去除溶剂，得到的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位即为海蛾提取物。上述步骤(I)中所述的用体积分数为509Γ80%的乙醇水溶液浸泡优选用体积分数为75%的乙醇水溶液浸泡3次，每次浸泡24小时；所述的用甲醇浸泡，优选浸泡3次，每次浸泡24小时；所述的热水煮沸,优选煮沸时间为3小时。步骤(I)和(2)中的浓缩为本领域提取过程中常见的操作方法，优选都为减压回收，其温度控制在50°C以下。上述步骤(2)所述的用6(T90°C沸程的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对海蛾总浸膏溶液依次进行萃取，每种有机溶剂与水的体积比优选为1:1，每种有机溶剂萃取次数为3次。用DPPH自由基清除活性实验、ABTS总抗氧化能力实验、FRAP总抗氧化能力实验对本专利技术的海蛾提取物进行检测，发现本专利技术的海蛾提取物能够明显抑制DPPH、ABTS和 FRAP，说明本专利技术的海蛾提取物具有抗氧化能力。因此，本专利技术还提供了上述海蛾提取物在制备抗氧化保健食品或药物中的应用。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果本专利技术的海蛾提取物具有较好的抗氧化功能，因此能用于制备抗氧化保健食品或药物，并且其原料一海蛾是资源丰富的渔业副产品，成本低廉，因此本专利技术具有良好的应用前景。附图说明图I是体积分数75%乙醇水溶液制备的海蛾提取物的乙酸乙酯萃取部位的DPPH抑制率；图2是体积分数75%乙醇水溶液制备的海蛾提取物的正丁醇萃取部位的DPPH抑制率；图3是体积分数75%乙醇水溶液制备的海蛾提取物的乙酸乙酯萃取部位的ABTS抑制率；图4是体积分数75%乙醇水溶液制备的海蛾提取物的正丁醇萃取部位的ABTS抑制率；图5是体积分数75%乙醇水溶液制备的海蛾提取物的乙酸乙酯萃取部位的FRAP抑制率； 图6是体积分数75%乙醇水溶液制备的海蛾提取物的正丁醇萃取部位的FRAP抑制率。具体实施例方式以下结合实施例来进一步解释本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限制。 实施例I :利用体积分数为75%的乙醇水溶液制备海蛾提取物3. 5kg干燥海蛾剪碎后用市售食品级的体积分数为75%的乙醇水溶液浸泡3次，每次24小时，用旋转蒸发仪减压(温度控制在50摄氏度以下)回收溶剂后得到海蛾总浸膏。将海蛾总浸膏混悬于水中，得到海蛾总浸膏溶液，用石油醚(6(T9(TC沸程)按照体积比I :1对海蛾总浸膏溶液萃取3次，取出石油醚(6(T9(TC沸程)相，剩下的水相用乙酸乙酯按照体积比I :1的比例萃取3次，取出乙酸乙酯相，剩下的水相用正丁醇按体积比I :1的比例萃取3次，取出正丁醇相；用旋转蒸发仪减压(温度控制在50摄氏度以下)回收乙酸乙酯相和正丁醇相中的溶剂后，得到乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位，即本实施例的海蛾提取物。体积分数75%的乙醇水溶液制备的海蛾提取物的抗氧化活性实验(I)、乙酸乙酯和正丁醇萃取部位的DPPH自由基清除活性实验将上述乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位添加到无水乙醇中配置各自的梯度溶液，使各自的梯度溶液的浓度分别为16mg/ml,8mg/ml,4mg/ml,2mg/ml和lmg/ml,两种萃取部位溶液各设5个重复，将O. 5mg/ml DPPH无水乙醇溶液100 μ L分别加入100 μ L的乙酸乙酯萃取部位溶液和正丁醇萃取部位溶液后稍加震荡，37°C进行反应，分别于反应30min、60min后在492nm波长下测定加入DPPH的两个萃取部位溶液的吸光度值(Ap)，同时测定(Ac)与(Amax)。以O. 2mg/mL和O. lmg/mL的抗坏血酸(V。)为阳性对照，计算DPPH抑制率。按下述公试计算DPPH 抑制率=[I — (Ap — Ac) /AmaJ X 100%实验结果如图I和图2所示。由图I可以看出，乙酸乙酯萃取部位的DPPH抑制率与乙酸乙酯萃取部位溶液浓度及反应时间有关，乙酸乙酯萃取部位的DPPH抑制率随乙酸乙酯萃取部位溶液浓度的增加而增大，并最终趋近于O. 800 ;反应60min下的8mg/ml与16mg/ml乙酸乙酯萃取部位溶液的DPPH抑制率与反应30min相近,而反应60min下的Img/ml、2mg/ml、4mg/ml乙酸乙酯萃取部位溶液的DPPH抑制率均高于30min。由图2可以看出，正丁醇萃取部位的DPPH抑制率与正丁醇萃取部位溶液的浓度及反应时间有关，DPPH抑制率随正丁醇萃取部位溶液浓度的增加而增大，并最终趋于O. 800 ； 60min反应时间下16mg/ml正丁醇萃取部位溶液的DPPH抑制率与30min反应时间相近,而 60min反应时间下lmg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml正丁醇萃取部位溶液的DPPH抑制率均高于30min反应时间。(2)乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位的ABTS总抗氧化能力实验将上述乙酸乙酯和正丁醇萃取部位分别添加到无水乙醇中配置各自的梯度溶液， 使各自的梯度溶液的浓度分别为I. 6mg/ml,0. 8mg/ml,0. 4mg/ml,0. 2mg/ml和0. lmg/ml,于 96孔酶标板每个检测孔中加入20 μ L终浓度为O. 5mM的过氧化物酶工作液，然后在样品检测孔中分别加入10 μ L上述不同浓度的两种萃取部位的溶液，在阴性对照孔中加入IOyL 无水乙醇，在标准曲线检测孔中分别加入终浓度为O. 075，O. 060，O. 045，O. 030，O. 015和 O. 0075mM的10 μ L Trolox标准溶液，轻轻混匀；每个检测孔内加入170 μ L终浓度为O. 5mM 的ABTS工作液，轻轻混匀；在空白对照孔中加入200μ L无水乙醇。于室温孵育6，10，20， 45和60min后测定405nm处的吸光度值，样品和Trolox的吸光度值为As，空白对照为Ac。 计算ABTS抑制率公式如下 ABTS 抑制率=[(Ac — As) /Aj X 100%实验结果如图3和图4所示。由图3可以看出，乙酸乙酯萃取部位的ABTS抑制率与乙酸乙酯萃取部位溶液的浓度及反应时间有关，乙酸乙酯萃取部位的ABTS抑制率随乙酸乙酯萃取部位溶液浓度的增加而增大，并随反应时间的增加而增大。由图4可以看出，正丁醇萃取部位的ABTS抑制率与正丁醇萃取部位溶液的浓度及反应时间有关，正丁醇萃取部位的ABTS抑制率随正丁醇萃取部位溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种海蛾提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）用甲醇浸泡、热水煮沸或体积分数为50%~80%的乙醇水溶液浸泡三种方法处理干燥海蛾，分别浓缩后得到海蛾总浸膏；（2）将步骤（1）得到的海蛾总浸膏混悬于水中，得到海蛾总浸膏溶液，用60~90℃沸程的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对海蛾总浸膏溶液依次进行萃取，对乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物进行浓缩去除溶剂，得到的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位即为海蛾提取物。

【技术特征摘要】
1.一种海蛾提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)用甲醇浸泡、热水煮沸或体积分数为509Γ80%的乙醇水溶液浸泡三种方法处理干燥海蛾，分别浓缩后得到海蛾总浸膏； (2)将步骤(I)得到的海蛾总浸膏混悬于水中，得到海蛾总浸膏溶液，用6(T90°C沸程的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对海蛾总浸膏溶液依次进行萃取，对乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物进行浓缩去除溶剂，得到的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位即为海蛾提取物。2.根据权利要求I所述的海蛾提取物的制备方法，其特征在于，所述的用体积分数为50°/Γ80%的乙醇水溶液浸泡，为用体积分数为75%的乙醇水溶液浸泡...

【专利技术属性】
技术研发人员：周雪峰，陈哲凡，杨斌，林秀萍，刘娟，刘永宏，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：