一种抑制BMP15基因表达的siRNA 及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种抑制水牛骨形态发生蛋白15（bonemorphogeneticprotein15，BMP15）基因表达的siRNA，属于基因工程技术领域。本发明专利技术所述的siRNA正义链具有SEQIDNO:1~3所示的任一序列。本发明专利技术还公开了含有该siRNA的shRNA编码基因及由其构建的慢病毒干扰质粒pshRNA-copGFPLentivector。通过实时定量Real-timePCR检测发现，各siRNA片段分别能使水牛BMP15mRNA表达量降低29.25%，57.75%，82.5%；ELISA检测BMP15蛋白表达量也相应降低。本发明专利技术的siRNA片段及其表达载体可用于制备抑制水牛BMP15表达的制剂，能够显著下调BMP15基因的表达量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学以及生物工程
，具体涉及水牛抑制骨形态发生蛋白15（BMP15）基因表达的siRNA片段。 
技术介绍
1998年，华盛顿卡耐基研究院的AndrewFire和马萨诸塞大学癌症中心的CraigMello首次发现RNA干扰(RNA interference，RNAi)， RNAi是由双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)分子引发的转录后基因沉默过程，是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制。RNAi是通过双链RNA诱导与之同源的mRNA降解，导致目标基因转录后缄默的现象或机制。 siRNA是RNAi机制中最重要的发现。生物学研究证实，siRNA为3′端突出2-3nt，长为19-23 nt的双链RNA，5′端为磷酸基，3′端为羟基，这种结构特点说明dsRNA被与RNaseIII相似的酶加工过。RNA干扰包括起始阶段和效应阶段 (initiation and effecting steps)。在起始阶段，加入的双链RNA被切割为21-23个核苷酸的小分子干扰RNA (s本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抑制水牛骨形态发生蛋白15基因表达的siRNA，其特征在于，所述siRNA的正义链具有以下任一序列：BMP15？1：SEQ？ID？NO:1；BMP15？2：SEQ？ID？NO:2；BMP15？3：SEQ？ID？NO:3。

【技术特征摘要】
1.一种抑制水牛骨形态发生蛋白15基因表达的siRNA，其特征在于，所述siRNA的正义链具有以下任一序列：
BMP15-1：SEQ ID NO:1；
BMP15-2：SEQ ID NO:2；
BMP15-3：SEQ ID NO:3。
2.一种shRNA，其特征在于含有权利要求1所述的siRNA。
3.如权利要求2所述的shRNA，其特征在于，是以下任一双链核苷酸序列：
BMP15-1dsDNA：正义链具有如SEQ ID NO:4所示的核苷酸序列，反义链具有如SEQ ID NO:5所示的核苷酸序列；
BMP15-2dsDNA：正义链具有如SEQ ID N...

【专利技术属性】
技术研发人员：习欠云，张永亮，施振旦，肖敏，焦莉，石德顺，刘庆友，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：