转基因棉花多重PCR-DHPLC检测引物及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种转基因棉花的多重PCR-DHPLC检测引物及检测方法，所述引物具有较强的特异性，能够用于PCR扩增以及DHPLC分析。所述检测方法提供了一种操作简便、扩展性能好、灵敏度高的转基因棉花检测方法，实现了转基因棉花的多靶标检测。利用DHPLC对PCR扩增产物进行分析，其片段大小区分率可达数个碱基，分辨率高。本发明专利技术的引物和检测方法为转基因棉花检测提供了一种简单、方便、有效、可靠的高通量检测方法，特别适合用于口岸检验检疫、农业生产、植物保护等部门使用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种转基因产品的检测，特别是涉及一种转基因棉花多重PCR-DHPLC检测引物及检测方法。
技术介绍
目前对转基因棉花的检测方法主要包括常规PCR，实时荧光PCR、PCR-基因芯片等。传统的常规PCR检测方法的扩展性存在一定的局限，随着待检目标的增加，需要对体系中的每套引物的用量及比例重新进行优化，并且兼顾扩增效率等因素，工作量较大；另一方面，通常采用的凝胶电泳分析扩增产物的方法，区分效率不高，检测结果不理想。实时荧光PCR虽然在检测灵敏度等方面较常规PCR检测方法有优势，但是由于目前仪器自身及荧光染料研制的限制，仅能同时提供互不干扰的4个荧光通道，也限制了该技术在检测通量 扩展。常规的多套PCR-基因芯片检测方法，需要多套引物进行扩增，操作步骤繁琐，并不适合大规模的高通量检测。变性高效液相色谱技术(Denaturing High-performance LiquidChromatography, DHPLC)是一种简单、快速、非凝胶的核酸分析方法,分辨率高、扩展性能好、灵敏度高。该技术在50°C条件下分析样品，样品峰的洗脱只由碱基对的数量决定洗脱顺序，当过柱的乙腈浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于转基因棉花多重PCR?DHPLC检测的引物，其特征在于：所述引物包括引物对1，以及引物对2、引物对3、引物对4中的至少一个；引物对1的上游引物含有Seq?ID?No.1所示序列，下游引物含有Seq?ID?No.2所示序列；引物对2的上游引物含有Seq?ID?No.3所示序列，下游引物含有Seq?ID?No.4所示序列；引物对3的上游引物含有Seq?ID?No.5所示序列，下游引物含有Seq?ID?No.6所示序列；引物对4的上游引物含有Seq?ID?No.7所示序列，下游引物含有Seq?ID?No.8所示序列；Seq?ID?No.1：5’?TCCATGCCGCCTCACAAG?3’Seq?...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：章桂明，向才玉，凌杏园，潘广，程颖慧，康林，李鹤遥，
申请(专利权)人：深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：