本发明专利技术提供了预防、治疗或减轻糖尿病的方法，通过对有需要的受试者施用治疗有效量的阻断DLL4-Notch信号途径的DLL4拮抗剂。如在糖尿病的小鼠模型中观察到的，DLL4拮抗剂通过调节T细胞（Treg）的扩增，展示了对胰岛的保护作用，降低了血糖水平，并阻断了自身抗体的产生，包括针对胰岛素和谷氨酸脱羧酶65(GAD65)的自身抗体。因此，本发明专利技术还提供了降低血糖，和/或减少或阻断自身抗体产生的方法，通过对有需要的受试者施用治疗有效量的阻断DLL4-Notch信号途径的DLL4拮抗剂。合适的用于本发明专利技术的DLL4拮抗剂包括特异性结合DLL4和阻断DLL4-Notch相互作用的抗体或抗体片段,DLL4的细胞外结构域,等等。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用DLL4拮抗剂治疗糖尿病的方法 专利技术背景专利
此专利技术涉及 用δ样配体4Φ114)拮抗剂治疗疾病、紊乱或病症的方法，其中增加调节T细胞(Treg细胞或Treg)的数量是有益的。更具体地,本专利技术的方法可通过用Dl 14拮抗剂阻断Dl 14与Notch受体的结合，从而增加Treg的数量，预防、治疗或减轻糖尿病。此外，本专利技术涉及用D114拮抗剂降低血糖水平，或减少或阻断自身抗体，包括分别针对胰岛素和谷氨酸脱羧酶65(GAD65)的自身抗体的产生的方法。 相关领域的描述Notch受体及其配体之间的相互作用代表了一条在进化上保守的途径，此途径不仅对细胞命运的决定很重要，而且对调节在造血作用和发育中的胸腺中的种系决定(lineage decision)很重要(Artavanis-Tsakonas 等人，1999, Science284:770-776;Skokos 等人，2007;J Exp Med 204:1525-1531;和 Amsen 等人，2004，Cellll7:515-526)。最近有研究显示，D114_Notchl抑制导致在T细胞发育的完全阻断，并伴随B细胞的异位出现(ectopic appearance)和树枝状细胞(DC)的扩增，DC是由胸腺内的原 T 细胞到 DC 的命运转化产生(Hozumi 等人，2008，J Exp Med 205(11) : 2507-2513; Koch等人，2008，J Exp Med 205 (11) : 2515-2523;和 Feyerabend等人，2009，Immunity30:1-13)。因此，越来越多的证据表明，Notch信号转导对决定造血祖细胞中的细胞命运决定是至关重要的。此外，已有研究显示了 DC对调节T细胞(Treg)体内平衡的体内反馈控制(Darrasse-JSze 等人，2009，J Exp Med 206 (9) : 1853-1862)。然而，Notch 信号转导在控制DC来源和发育，和因此在Treg体内平衡中的作用仍然未知。这是一个非常重要的问题，因为鉴定诱发Treg扩增的新方法可用于治疗自身免疫疾病和紊乱。人D114(hD114)的核酸和氨基酸序列分别显示在SEQ ID N0:1和2中。D114拮抗剂及其用途在 WO 2007/143689，W02007/070671, WO 2008/076379，WO 2008/042236，和W0/2008/019144 中公开。 专利技术概述本专利技术是部分基于专利技术人的如下观察，即特异性结合D114并阻断D114结合Notch受体的抗体能够完全预防在小鼠中的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)(此为人多发性硬化症的动物模型)的发展，而对照抗体没有预防EAE。此外，专利技术人已发现，抗D114抗体的此作用与增加的Treg细胞数有关。另外，还观察到，抗D114抗体避免了血糖水平的增加和保持了 NOD/ShiLtJ小鼠(I型糖尿病的动物模型)中的胰岛数和形态，且这些作用至少部分是通过Treg的扩增介导的。因此，在第一个方面，本专利技术涉及增加Treg细胞数的方法，其包括对有需要的受试者施用有效量的Dl 14拮抗剂，其中所述Dl 14拮抗剂阻断Dl 14和Not ch受体之间的相互作用，且Treg细胞数增加。在第二个方面，本专利技术涉及预防、治疗或减轻疾病、紊乱或病症的方法，其中增加Treg细胞数是有益的，所述方法包括对有需要的受试者施用治疗有效量的D114拮抗剂。本专利技术的方法可治疗的疾病或紊乱是任意疾病、紊乱或病症，其通过去除、抑制或降低D114活性而受益，即改善、减轻、抑制或预防，从而在治疗的受试者中增加Treg细胞数。本专利技术的方法可治疗的这样的疾病或紊乱之一是糖尿病，即I型和2型糖尿病。因此，在一个实施方案中，本专利技术提供了预防、治疗或减轻I型或2型糖尿病的方法，其包括对有需要的受试者施用治疗有效量的Dl 14拮抗剂。在第三个方面，本专利技术涉及降低血糖水平的方法，其包括对有需要的受试者施用治疗有效量的Dl 14拮抗剂。在第四个方面，本专利技术涉及减少或阻断自身抗体的产生的方法，其包括对有需要的受试者施用治疗有效量的D114拮抗剂。自身抗体可包括针对胰岛素的自身抗体，针对GAD65的自身抗体，等等。·在一个实施方案中，用于上述本专利技术的任意方法的D114拮抗剂是D114抗体或其片段(“抗D114Ab”或“D114Ab”)，其以高亲和力特异性结合D114并阻断D114与Notch受体的结合和/或阻断DlH-Notch信号途径。抗体可为多克隆、单克隆(mAb)、嵌合、人源化或全人抗体或其片段。抗体片段可为单链抗体、Fab或(Fab’)2。在一个实施方案中，Dl 14Ab或其抗原结合片段结合hDl 14 (SEQ ID NO: 2)的N-端结构域(残基 S27-R172)，或 δ /Serrate/Lag-2 (DSL)结构域(残基 V173-C217)，或N-端-DSL结构域(残基S27-C217)中的表位。在另一个实施方案中，D114Ab或其抗原结合片段结合hD114(SEQ ID NO: 2)的EGF结构域，即约氨基酸残基Q218-N251 (结构域I)，E252-D282 (结构域 2)，D284-E322 (结构域 3)，E324-E360 (结构域 4)，S362-E400 (结构域5)，K402-E438(结构域6)，H440-E476(结构域7)，或S480-E518 (结构域8)之一中的表位。在一些实施方案中，抗体或抗体片段可结合涉及超过一种上面枚举的表位的构象表位。用于本专利技术的方法的D114Ab或其片段能够以高亲和力结合人D114，并具有通过表面等离子共振测量的约InM或更低，约500pM或更低，约300pM或更低，约200pM或更低，约IOOpM或更低，或约50pM或更低的平衡解离常数(Kd)。在一个实施方案中，D114Ab或其片段包含重链可变区(HCVR)，其包含3个重链互补决定区，HCDR1，HCDR2和HCDR3，分别具有SEQ ID NO: 22，24和26的氨基酸序列。在另一个实施方案中，抗体或其片段包含轻链可变区(LDVR)，其包含3个轻链互补决定区，IXDRl，LCDR2和LCDR3，分别具有SEQ ID NO: 30，32和34的氨基酸序列。在另一个实施方案中，D114Ab或其片段包含重链和轻链⑶R序列，所述⑶R序列包含SEQ ID NO: 22，24，26，30，32和34的⑶R序列组合。在另一个实施方案中，D114Ab包含HCVR，其包含SEQ ID N0:20或116的氨基酸序列，或D114Ab包含LCVR，其包含SEQ ID N0:28或118的氨基酸序列。在另一个实施方案中，D114Ab 包含 SEQ ID NO: 20/28 (REGN281)或 116/118 (REGN421)的 HCVR/LCVR组合。在某些实施方案中，D114Ab包含选自下述的重链⑶Rl/⑶R2/⑶R3组合和轻链 CDR1/CDR2/CDR3 组合:SEQ ID NO: 6/8/10 和 SEQ ID NO: 14/16/18，分别地;SEQID NO:38/40/42 和 SEQ I本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：D·斯科克斯，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：
国别省市：
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