人源化抗C-MET 拮抗剂制造技术

本发明专利技术涉及人源化抗C-MET拮抗剂。本发明专利技术提供了治疗用抗C-MET抗体，以及含有这些抗体的组合物和使用这些抗体的方法。

【技术实现步骤摘要】

一般而言，本专利技术涉及分子生物学和生长因子调控领域。更具体的说，本专利技术涉及HGF/c-met信号途径的调节物，及所述调节物的用途。·背景HGF是间充质衍生的多效因子，对许多不同细胞类型具有促有丝分裂、促运动和促形态发生活性。HGF作用是通过特定的酪氨酸激酶c-met介导的，而且在多种肿瘤中经常观察到异常HGF和c-met表达。参见例如Maulik et al. , Cytokine&GrowthFactor Reviews (2002), 13:41-59;Danilkovitch-Miagkova&Zbar, J. Cl in. Invest.(2002)，109(7) : 863-867。在肿瘤进展和转移中牵涉HGF/c_Met信号途径的调控。参见例如 Trusolino&Comoglio, Nature Rev. (2002)，2:289-300。HGF结合Met受体酪氨酸激酶(RTK)的胞外域并调控不同生物学过程，诸如细胞分散、增殖和存活。HGF-Met信号传导对于正常胚胎发育是至关重要的，尤其是在肌肉祖细胞迁移及肝和神经系统发育中(Bladt et al. , 1995;Hamanoue et al. , 1996;Mainaet al. , 1996; Schmidt et al. , 1995; Uehara et al.，1995)。Met 和 HGF 敲除小鼠的发育表型非常相似，表明HGF是Met受体的关联配体(Schmidt et al. , 1995;Uehara etal.，1995)。HGF-Met还在肝再生、血管发生和伤口愈合中发挥作用(Bussolino etal. , 1992;Matsumoto and Nakamura, 1993;Nusrat et al. , 1994)。Met 受体前体经蛋白水解切割成由二硫键连接的胞外α亚基和跨膜β亚基(Tempest et al.，1988)。β亚基包含胞质激酶结构域，而且在C末端包含多底物停靠位点，衔接物蛋白质在此结合并起动信号传导(Bardelli et al. , 1997;Nguyen et al. , 1997;Pelicci et al. , 1995;Ponzettoet al. , 1994;Weidner et al. , 1996)。HGF 结合后，Met 活化分别经由 Gabl 和 Grb2/Sos介导的PI3激酶和Ras/MAPK活化而导致酪氨酸磷酸化和下游信号传导，它驱动细胞运动和增殖(Furge et al. , 2000; Hartmann et al. , 1994; Ponzetto et al. , 1996; Royal andPark, 1995)。Met据显示在经致癌原处理的骨肉瘤细胞系中正在转化(Cooper etal. , 1984;Park et al.，1986)。已在多种人癌症中观察到Met过表达或基因扩增。例如，Met蛋白在结肠直肠癌中过表达至少5倍，且据报道在肝转移中有基因扩增(DiRenzo et al. , 1995;Liu et al.，1992)。Met蛋白据报道还在口腔鳞状细胞癌、肝细胞癌、肾细胞癌、乳癌和肺癌中过表达(Jin et al. , 1997;Morello et al.，2001;Natali etal. , 1996; Olivero et al. , 1996; Suzuki et al.，1994)。此外，已在肝细胞癌、胃癌和结肠直肠癌中观察到 mRNA 过表达(Boix et al. , 1994;Kuniyasu et al. , 1993;Liu etal.，1992) ο已在肾乳头状癌中发现Met激酶结构域中的许多突变，它们导致组成性受体活化(Olivero et al. , 1999; Schmidt et al. , 1997; Schmidt et al.，1999)。这些活化突变造成组成性Met酪氨酸磷酸化，并导致MAPK激活、病灶形成和肿瘤发生(Jeffers etal. , 1997) ο此外，这些突变增强细胞运动和侵入(Giordano et al. , 2000; Lorenzato etal.，2002)。转化细胞中HGF依赖性Met活化介导运动、分散和迁移增加，最终导致侵入性肿瘤生长和转移(Jeffers et al. , 1996;Meiners et al.，1998)。Met已显示与驱动受体活化、转化和侵入的其它蛋白质相互作用。在肿瘤细胞中，Met据报道与K 6κ 4整联蛋白相互作用以促进HGF依赖性侵入性生长，κ6κ4整联蛋白是胞外基质(ECM)组分诸如层粘连蛋白的受体(Trusolino et al.，2001)。此外，Met胞外域已显示与脑信号蛋白家族的成员丛蛋白BI相互作用，且增强侵入性生长(Giordano et al.，2002)。而且，已知牵涉肿瘤发生和转移的⑶44v6据报道也与Met和HGF形成复合物并导致 Met 受体活化(Orian-Rousseau et al. , 2002)。Met是包括Ron和Sea在内的RTK亚家族的成员(Maulik et al.，2002)。Met胞外域的结构预测表明它与脑信号蛋白和丛蛋白共享同源性。Met的N末端包含约500个氨基酸的Sema结构域，它在所有脑信号蛋白和丛蛋白中是保守的。脑信号蛋白和丛蛋白属于首先因其在神经发育中的作用而描述的一个分泌和膜结合蛋白质大家族(Van Vactor andLorenz, 1999)。不过，新近将脑信号蛋白过表达与肿瘤侵入和转移关联起来。在丛蛋白、脑信号蛋白和整联蛋白中发现的富含半胱氨酸PSI结构域(也称为Met相关序列结构域)邻近Sema结构域，随后是4个IPT重复片段，它们是在丛蛋白和转录因子中发现的免疫球蛋白样区。最近的研究表明Met Sema结构域足以使HGF和肝素结合(Gherardi et al.，2003)。此外，Kong-Beltran 等人(Cancer Cell (2004)，6:61-73)报道了 Met 的 Sema 结构域是受体二聚化和活化所必需的。已报道了靶向HGF/c-met途径的许多分子。这些分子包括抗体，诸如那些美国专利5，686，292中所描述的。c_met胞外域的一部分据显示还具有针对HGF/c-met途径的拮抗作用。不过，考虑到该途径在各种病理状态的病因学中所发挥的重要作用，显然继续需要具有最适于开发成治疗剂的临床特性的药剂。本文描述的专利技术满足这一需求并提供了其它好处。完整收入本文引用的所有文献,包括专利申请和出版物,作为参考。专利技术公开本专利技术部分基于HGF/c-met生物学途径的多种拮抗剂的鉴定，该途径是呈现为重要且有利治疗靶的生物学/细胞过程。本专利技术提供了以干扰HGF/c-met活化为基础的组合物和方法，包括但不限于干扰HGF与c-met胞外部分结合及受体多聚化。如本文所述，本专利技术的拮抗剂为靶向与异常或不想要的HGF/c-met途径信号传导有关的病理状况提供了重要的治疗剂和诊断剂。因此，本专利技术提供了与调节HGF/c-met途径有本文档来自技高网...

【技术保护点】
抗c?met抗体，其包含：(a)至少一种选自下组的HVR序列：(i)包含序列A1?A17的HVR?L1，其中A1?A17是KSSQSLLYTSSQKNYLA(SEQ?ID?NO:1)(ii)包含序列B1?B7的HVR?L2，其中B1?B7是WASTRES(SEQ?ID?NO:2)(iii)包含序列C1?C9的HVR?L3，其中C1?C9是QQYYAYPWT(SEQ?ID?NO:3)(iv)包含序列D1?D10的HVR?H1，其中D1?D10是GYTFTSYWLH(SEQ?ID?NO:4)(v)包含序列E1?E18的HVR?H2，其中E1?E18是GMIDPSNSDTRFNPNFKD(SEQ?ID?NO:5)(vi)包含序列F1?F11的HVR?H3，其中F1?F11是XYGSYVSPLDY(SEQ?ID?NO:6)且X不是R；及(b)至少一种变体HVR，其中所述变体HVR包含SEQ?ID?NO:1、2、3、4、5或6中所示序列的至少一个残基的修饰。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：马克S丹尼斯，卡伦比尔莱西，朱迪扬，郑重，
申请(专利权)人：健泰科生物技术公司，
类型：发明
国别省市：