一种基于亚甲基蓝指示剂定量检测PCR的电化学安培检测法制造技术

本发明专利技术公开一种基于亚甲基蓝DNA指示剂技术定量检测PCR扩增产物的电化学安培电流测定方法，并将其应用于正常人线粒体实际样品的PCR产物定量检测，包括如下步骤：根据待测基因扩增片段进行PCR扩增所需引物的设计及合成，本发明专利技术以正常人线粒体基因序列为例；将经过预处理的玻碳电极放置于含有扩增标本的PCR反应体系，并在体系中加入一定量的DNA杂交指示剂亚甲基蓝；根据目标片段设定相应的PCR反应条件，在进行扩增的同时，采用电化学电流-时间曲线法采集亚甲蓝的电流信号变化，实现PCR扩增产物的电化学检测。该法不仅选择性、灵敏度高，还实现了对PCR产物的定量检测，且与传统方法比较更为快捷、简便、经济。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种基于亚甲基蓝DNA指示剂技术定量检测PCR扩增产物的电化学 安培电流测定方法。
技术介绍
随着分子生物学和生物技术的发展，特别是人类基因组计划的实施，让人们更深刻的认识到作为遗传信息的携带者，DNA的结构变化会对生物体产生重大的影响，并且与多种遗传疾病的起因有关。因此，人们对DNA的检测手段变得越来越重要。在基因分析技术中，聚合酶链反应(PCR)技术以其简便、快速、灵敏的优势，成为基因诊断和分析的重要手段。但是PCR技术存在着急需解决的二大问题一是不能定量，二是污染所致的假阳性。90年代初期，随着分子生物学技术研究的不断进展，定量PCR技术取得了突飞猛进的发展，其中实时定量PCR (real-time quantitative PCR)技术便是一种具有革命性意义的定量PCR技术，所谓实时定量PCR是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量。与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前已得到广泛应用。尽管如此，RT-PCR所使用的光学仪器，因存在体积庞大，价格昂贵本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于亚甲基蓝指示剂定量检测PCR的电化学安培检测法，为基于亚甲基蓝DNA指示剂技术检测基因PCR扩增产物的电化学安培电流测定方法，通过亚甲基蓝的电流强度的变化实现实时监测基因扩增过程中PCR扩增产物数量的变化或者实现对扩增终产物的定量测定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：林新华，陈元仲，王昆，刘爱林，
申请(专利权)人：福建医科大学，
类型：发明
国别省市：