一种腈水解酶及其基因序列与应用方法技术

本发明专利技术涉及一种新型腈水解酶及其基因的克隆和表达。从恶臭假单胞菌（Pseudomonasputida）XY4（编号CGMCC?No.3830）的总DNA获得腈水解酶基因SEQ?ID?NO:1，该基因全长1113个核苷酸，编码370个氨基酸SEQ?ID?NO:2。本发明专利技术还公开了重组腈水解酶的构建、高效表达和纯化的方法，以及纯化重组腈水解酶的最适作用温度和pH。以质粒pET28a(+)为表达载体，以E.coliRosetta-gami(DE3)为表达宿主，实现腈水解酶基因的高效表达。重组腈水解酶最适作用温度为55℃，最适作用pH为7.5，能高效转化3-氰基吡啶为烟酸，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及源自恶臭假单胞菌iPsGudomorms put i da ) XY4 (保藏编号CGMCCNo. 3830)的一种新型腈水解酶的基因序列，以及腈水解酶工程菌的构建、重组腈水解酶的高效表达和分离纯化，属于酶基因工程及酶工程领域。
技术介绍
腈水解酶能够催化腈类化合物转化为具有广泛应用价值的羧酸类化合物，如丙烯酸、扁桃酸、烟酸、异烟酸、亚氨基二乙酸、甘氨酸等。同时该酶可以用于处理含有腈的废水和腈污染的有毒废水。腈水解酶作用底物的广泛性及优良的化学、区域、立体选择性使其在羧酸合成中表现出巨大应用潜力，在制药、饲料、食品、环保等领域具有良好的应用前景。 烟酸，又称为3-吡啶甲酸，是人体必需的13种维生素之一，广泛应用于食品和饲料添加剂。烟酸作为药物除了能够治疗糙皮病外，还可以用于治疗动脉粥样硬化、心血管疾病、糖尿病等。另外烟酸可作为形成活性污泥的生化激素、空气和废气的除臭剂。烟酸在染料、感光材料、洗涤剂等方面也有一定的应用。烟酸的生产可采用化学方法和生物方法合成，目前在工业上，仍主要采用化学法来进行烟酸的生产，如氨氧化法、气相氧化法、电解氧化法和吡啶羟基化法等，所采用原料一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种来源于恶臭假单胞菌（Pseudomonas？putida）XY4（编号CGMCC3830）的新型腈水解酶，其完整的DNA序列和氨基酸序列如SEQ？ID？NO:1和SEQ？ID？NO:2所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：许正宏，朱小燕，李恒，史劲松，龚劲松，钱建瑛，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：