本发明专利技术公开了一种呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条、试剂盒及其制备方法。本发明专利技术的试纸条采用免疫捕获法原理测定IgG抗体，通过一次操作即可联合检测出呼吸道合疱病毒、腺病毒、流行性感冒病毒、肺炎支原体IgG抗体，简化了操作过程；用本发明专利技术所述的试纸条检测，简便、快速、准确，结果清晰易辨，适合大批量检测，适用于基层筛查和流行病学调查。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属·于免疫诊断试剂
，涉及一种，具体涉及一种可同时检测常见呼吸道病毒感染四项指标的一板四联IgG抗体胶体金快速检测试纸条、试剂盒及其制备方法。
技术介绍
免疫球蛋白G (Immunoglobulin G, IgG)是人或动物体内最重要的抗体之一。一种抗原(细菌或病毒等)进入机体后，最早出现的免疫球蛋白是IgM抗体，之后出现IgG抗体，但IgM在人体内的半衰期很短，往往不利于检测与诊断。尽管在某些情况下还可能出现IgA抗体，由于其临床意义同IgG基本相同，并且IgA含量很低，在临床检测中得实际意义不大，因而在临床检测中一般不予以区分。通过检测体内IgG抗体的存在，可以诊断人或动物对特定抗原的免疫反应状态。若检测出特异性IgG抗体，表明有近期感染的发生。IgG在体内半衰期长，且能够稳定表达，对于疾病检测与诊断，有非常重要的意义。呼吸道病原体，习惯上是指一群能侵犯呼吸道的病原体。具有感染力强，传播快，发病急等特点。流行性感冒病毒是流行性感冒的病原体。经飞沫传播，侵入呼吸道粘膜柱状上皮细胞内增殖，引起细胞变性、坏死、脱落，局部粘膜充血水肿等。呼吸道合胞病毒是引起婴幼儿下呼吸道疾病最常见的病毒，大约有60%急性婴儿喘息性支气管炎和肺炎是由该病毒引起，在大龄儿童和成人主要引起上呼吸道感染。腺病毒是一群能在呼吸道、眼、消化道、尿道及膀胱等组织内增殖并引起疾病的病毒，腺病毒感染可常年流行，主要通过呼吸道、目艮结膜或胃肠道传播，引起婴幼儿上呼吸道感染。肺炎支原体是引起原发性非典型性肺炎及其他呼吸道感染性疾病的常见病原微生物，直接借助呼吸道的飞沫传染，全年均可发病，以秋冬季节较多，主要见于儿童和青少年。一般呈散发，也可发生小流行。儿童支原体肺炎有一定的流行规律。除呼吸道外，肺炎支原体还能引起其他系统严重的并发症。呼吸道疾病的诊断方法主要依靠分离培养和血清学试验，包括病原体培养、冷凝聚试验、间接血凝抑制试验、补体结合试验、PCR方法等。病原体培养、冷凝聚试验、间接血凝抑制试验、补体结合试验由于灵敏度低且特异性差大大限制了其在临床上的应用。PCR法虽然灵敏度高特异性强，但是由于操作复杂，对操作人员的技术要求较高，也限制其临床的推广使用。目前，呼吸道疾病抗体检测是国内外公认的临床诊断呼吸道疾病感染较为可靠，但大多数只进行呼吸道疾病感染的单项指标检测。而通过联合检测呼吸道合疱病毒、腺病毒、流行性感冒、肺炎支原体这几种常见的病原微生物抗体，能够为临床快速诊断呼吸道疾病提供全面可靠的、准确的方法。目前联合检测呼吸道疾病感染IgG抗体的方法不多，还未有通过一次操作过程即可联合检测呼吸道疾病感染病原特异性IgG抗体的方法。虽然单独检测病原IgG抗体后，再综合分析检测结果对疾病的诊断并无影响，但操作过程繁琐，检测不够方便快捷。
技术实现思路
针对现有检测技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种。采用本专利技术的试纸条或试剂盒，可通过一次操作实现快速检测呼吸道合疱病毒、腺病毒、流行性感冒、肺炎支原体抗体，从而简化操作过程，实现快速检测的目的。本专利技术的第一个目的是这样实现的一种呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，包括底板，在底板的一面顺次相互搭接地粘附有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述样品垫上贴有全血滤血膜，所述金标垫为涂覆有兔抗人IgG抗体-胶体金复合物的玻璃纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上有四条检测线和一条质控线，所述四条检测线分别包被有呼吸道合疱病毒重组抗原、腺病毒重组抗原、流行性感冒病毒重组抗原、肺炎支原体重组抗原，所述质控线上包被有羊抗兔抗体。 优选地，所述呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，其中的重组兔抗人IgG抗体-胶体金复合物以浸泡的方式涂覆在玻璃纤维素膜上干燥而得，浸泡条件为室温浸泡3小时，干燥条件为37°C干燥5小时。优选地，所述呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，其中所述呼吸道合疱病毒重组抗原、腺病毒重组抗原、流行性感冒病毒重组抗原、肺炎支原体重组抗原、羊抗兔抗体，分别以O. 03 O. 05mg/mL的浓度划到硝酸纤维素膜上包被并干燥，干燥条件为37°C干燥5小时。进一步优选地，所述呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，其中样品垫一端压住金标垫一端O. 5 Imm,金标垫另一端压住硝酸纤维素膜一端O. 5 Imm,吸水垫的一端压住硝酸纤维素膜另一端O. 5 1mm。本专利技术的第二个目的是这样实现的一种呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试剂盒，包括样本处理瓶和检测试纸条，所述样本处理瓶内装有样本处理液，所述的检测试纸条同实现本专利技术第一个目的所述的技术方案。优选地，所述呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试剂盒，其中所述的样本处理液为PH7. 0±0. 2的磷酸盐缓冲液。本专利技术的第三个目的是这样实现的一种呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤(I)将将呼吸道合疱病毒重组抗原、腺病毒重组抗原、流行性感冒重组抗原、肺炎支原体重组抗原、羊抗兔抗体分别稀释到包被浓度O. 03 O. 05mg/mL,将五种包被液分别划到硝酸纤维素膜上的指定位置，将已包被的硝酸纤维素膜37°C干燥5小时备用；(2)采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，在金溶胶中按照20 μ g/mL 40 μ g/mL比例缓慢加入兔抗人IgG抗体,充分反应后，以8000rpm离心30分钟，弃上清，稀释至原体积的1/3，然后用混合液室温浸泡金标垫3小时,37 °C干燥5小时备用；(3)将全血滤血膜贴在样品垫上；(4)在底板的一面顺次相互搭接地粘附有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，确保样品垫一端压住金标垫一端O. 5 Imm,金标垫另一端压住硝酸纤维素膜一端O.5 1mm，吸水垫的一端压住硝酸纤维素膜另一端O. 5 1mm，得试纸条；(5)将试纸条放入塑料板卡内，压实，装入铝箔袋中封口 ；(6)配制pH7. 0 + 0.2的磷酸盐缓冲液，作为样本处理液装入样品处理瓶，ImL/瓶；(7)将试纸条和样品处理瓶按照I: I的配比组装制成试剂盒。与现有技 术相比，本专利技术具有如下优点和显著的进步呼吸道疾病IgG抗体联合检测试剂盒(胶体金法)采用免疫捕获法原理测定IgG抗体，通过一次操作即可联合检测出常见四项呼吸道疾病特异性抗IgG抗体，简化了操作过程；所用病原抗原为多表位的重组抗原，特异性好，灵敏度高；本专利技术所述试剂盒检测简便、快速、准确、易于普及，特别适用于基层筛查和流行病学调查，对常见呼吸道疾病感染起到辅助诊断作用。具体实施例方式以下是本专利技术的具体实施例，对本专利技术的技术方案做进一步作描述，但是本专利技术的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本专利技术构思的改变或等同替代均包括在本专利技术的保护范围之内。实施例I :呼吸道疾病IgG抗体联合检测试剂盒(胶体金法)的构成I.样品处理瓶样品处理瓶(购自杭州北域)装有ImL样品处理液(磷酸缓冲液，主要原料购自国药集团)。2.试纸条60*5mm底板(购自上海杰一公司)；吸水垫为15*5mm的粗纤维滤纸(购自上海杰一公司)；25*5mm硝酸纤维素膜(购自Mill ipore公司)依次包被呼吸道合疱病毒重组抗原(购自meridian公司)、腺病毒重组抗原(购自meridian公司)、流本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，包括底板，在底板的一面顺次相互搭接地粘附有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于：所述样品垫上贴有全血滤血膜，所述金标垫为涂覆有兔抗人IgG抗体？胶体金复合物的玻璃纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上有四条检测线和一条质控线，所述四条检测线分别包被有呼吸道合疱病毒重组抗原、腺病毒重组抗原、流行性感冒病毒重组抗原、肺炎支原体重组抗原，所述质控线上包被有羊抗兔抗体。
【技术特征摘要】
1.一种呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，包括底板，在底板的一面顺次相互搭接地粘附有样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于所述样品垫上贴有全血滤血膜，所述金标垫为涂覆有兔抗人IgG抗体-胶体金复合物的玻璃纤维素膜，所述硝酸纤维素膜上有四条检测线和一条质控线，所述四条检测线分别包被有呼吸道合疱病毒重组抗原、腺病毒重组抗原、流行性感冒病毒重组抗原、肺炎支原体重组抗原，所述质控线上包被有羊抗兔抗体。2.根据权利要求I所述呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，其特征在于重组兔抗人IgG抗体-胶体金复合物以浸泡的方式涂覆在玻璃纤维素膜上干燥而得，浸泡条件为室温浸泡3小时,干燥条件为37°C干燥5小时。3.根据权利要求I所述呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，其特征在于所述呼吸道合疱病毒重组抗原、腺病毒重组抗原、流行性感冒病毒重组抗原、肺炎支原体重组抗原、羊抗兔抗体，分别以O. 03 O. 05mg/mL的浓度划到硝酸纤维素膜上包被并干燥，干燥条件为37°C干燥5小时。4.根据权利要求1-3任一项所述呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试纸条，其特征在于样品垫一端压住金标垫一端O. 5 Imm,金标垫另一端压住硝酸纤维素膜一端O. 5 Imm,吸水垫的一端压住硝酸纤维素膜另一端O. 5 1mm。5.一种呼吸道疾病IgG抗体的胶体金法检测试剂盒，其特征在于包含样本处理瓶和权利要求I所述的检测试纸条，...
【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：南京凯基生物科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。