防治根结线虫的复合微生物制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种防治根结线虫的复合微生物制剂及其制备方法。所述复合微生物制剂包括：淡紫拟青霉孢子粉或发酵液、增效剂和载体；其中，所述的增效剂选自植物生长激素、诱抗剂或具有杀线效果的无机盐中的任意一种或多种。本发明专利技术从植物生长激素、诱抗剂或无机盐中筛选出能够增加淡紫拟青霉防效且不影响淡紫拟青霉孢子萌发和菌丝生长的增效剂，将所筛选到的增效剂和载体加入到淡紫拟青霉孢子粉或发酵液中制备得到防治根结线虫的复合微生物制剂。本发明专利技术复合微生物制剂对根结线虫具有良好的防治效果，还能够提高植物的抗病力并能显著促进植物根系生长。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种真菌复配制剂，尤其涉及一种防治根结线虫的淡紫拟青霉 (P. Iilacinus)复合微生物制剂及其制备方法,本专利技术还涉及该复合微生物制剂在防治植物根结线虫中的用途，属于淡紫拟青霉生防制剂领域。
技术介绍
淡紫拟青霉(P. Iilacinus)是一种土壤及多种植物根围的习居菌,对南方根结线虫的寄生率很高，可达80%以上。现已认为淡紫拟青霉是一种非常重要的植物寄生线虫卵寄生真菌，目前已广泛应用于防治根结线虫、胞囊线虫等有害植物寄生线虫。到目前为止， 世界上已经有了多种以淡紫拟青霉分生孢子为主要有效成分的杀线制剂，其中包括可湿性粉剂、颗粒剂及微胶囊菌剂等。淡紫拟青霉可以寄生线虫卵且寄生率高，但是对二龄幼虫的寄生效果较差，而且淡紫拟青霉在一定程度上还有利于卵孵化，所以在其制剂中添加具有对二龄幼虫有杀害作用但不影响淡紫拟青霉孢子萌发和菌丝生长的物质将能有效提高淡紫拟青霉的杀线虫效果。因此，筛选能够出促进淡紫拟青霉分生孢子萌发或抑制根结线虫卵孵化的增效物，将其与淡紫拟青霉孢子进行复配得到复合微生物制剂将能够有效提高淡紫拟青霉孢子防治根结线虫的效果。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是提供一种有效防治根结线虫的淡紫拟青霉复合微生物制剂；本专利技术的目的之二是提供一种制备上述淡紫拟青霉复合微生物制剂的方法；本专利技术的目的之三是将所述的淡紫拟青霉复合微生物制剂应用于防治植物根结线虫。本专利技术的上述目的是通过以下技术方案来实现的一种防治根结线虫的复合微生物制剂，包括淡紫拟青霉孢子粉或发酵液、增效剂和载体；其中，所述的增效剂选自植物生长激素、诱抗剂或/和无机盐中的任意一种或多种。所述的植物生长激素优选为吲哚乙酸、2，4-D、萘乙酸或吲哚丁酸中的任意一种或多种；其中，按质量百分比计，吲哚乙酸占制剂总量的O. 00001-0. 005 %，优选为 O. 0001-0. 001 %，最优选为O. 001 % ；2, 4-D占制剂总量的O. 00005-0. 005 % ;萘乙酸占制剂总量的O. 00001-0. 001 %,更优选为O. 00001-0. 0001 % ;吲哚丁酸占制剂总量的 O. 0003-0. 0008 %，优选为0. 0003-0. 0005 %，更优选为 O. 0005 %。所述的诱抗剂优选为草酸或水杨酸；按质量百分比计，草酸占制剂总量的 O. 05-0. 15%，优选为O. 05-0. 1% ;水杨酸占制剂总量的O. 001-0. 01%。本专利技术通过实验发现，制剂中含有高浓度的草酸对淡紫拟青霉孢子萌发有显著的促进作用，其中，当制剂中草酸的用量为500-1500mg/L(即0. 05-0. 15% )，尤其是 500-1000mg/L(即0. 05-0. 1% )时，其对于淡紫拟青霉孢子萌发的促进作用最为显著。本专利技术进一步的实验发现，制剂中浓度为10-1000mg/L的水杨酸对淡紫拟青霉孢子萌发抑制率和菌丝日生长速率抑制率的影响均为极显著(p〈0. 01)。通过LSD多重比较表明，水杨酸各用量之间存在差异性(P〈0. 05)。各用量水杨酸对淡紫拟青霉孢子萌发菌丝日生长速率均有一定抑制作用，制剂中低用量(10-100mg/L)的水杨酸对其抑制率较小，随着其在制剂中用量的增加抑制率显著增高，当其在制剂中的含量大于500mg/ml时，孢子萌发抑制率大于 50%，菌丝生长速率抑制率达到了 100%。因此，本专利技术制剂中水杨酸的用量优选为占制剂总量的 0. 001-0. 01%。本专利技术还考察了多种无机盐对于淡紫拟青霉孢子萌发或其菌丝生长的影响效果。试验结果发现，大多数的无机盐对于淡紫拟青霉孢子或萌发或菌丝生长均有严重的抑制作用，不适宜作为淡紫拟青霉的增效剂。本专利技术从大量的无机盐中最终筛选到CuS04、 (NH4)2SCVNH4Cl和NH4NO3这四种无机盐对于淡紫拟青霉孢子或萌发或菌丝生长具有一定的促进作用，有作为淡紫拟青霉杀线虫的增效剂的可能性；其中，NH4Cl对淡紫拟青霉孢子萌发有较为显著的促进作用，NH4NOjf淡紫拟青霉孢子萌发和菌丝生长均有明显的促进作用， 这两种铵盐不仅对根结线虫卵的孵化抑制率很高，对二龄根结线虫幼虫表现为半致死浓度的这两种铵盐对淡紫拟青霉分生孢子寄生卵表现为促进作用，由此，本专利技术发现将NH4Cl或 NH4NO3加入到淡紫拟青霉孢子粉或发酵液中能显著提高淡紫拟青霉的杀线虫效果。本专利技术通过更进一步的试验发现，无机盐占制剂总量的1.0-2. 2%，尤其是1.0-1. Iwt %时，最有利于淡紫拟青霉孢子萌发或菌丝生长。淡紫拟青霉孢子粉或发酵液可通过各种商业途径购买得到，本领域所属技术人员也可按照文献中所公开的方法制备得到淡紫拟青霉孢子粉或发酵液；作为参考，本领域技术人员可参考下述方法制备得到淡紫拟青霉孢子粉(I)制备淡紫拟青霉发酵液；(2)从淡紫拟青霉发酵液中回收孢子产物；(3)干燥所回收的淡紫拟青霉孢子产物，即得淡紫拟青霉粉。淡紫拟青霉发酵液的制备方法已在各种文献中公开(例如周靖等.淡紫拟青霉 (P. Iilacinus)培养条件的优化.微生物学杂志.2007年3月第27卷第2期.45-48 ;毛成利等，淡紫拟青霉的研究开发.化学工程师.2004年7月.63-64.)，本领域所属技术人员可按照文献中所公开的各种方法制备得到淡紫拟青霉发酵液；例如，采用三级培养方法，即 种子培养、二级液体扩大培养和液体发酵培养，制备得到淡紫拟青霉菌发酵液；其中，在液体发酵培养时，可以采用发酵罐发酵或采用摇瓶培养的方式进行发酵培养；三级培养所用到的培养基及其培养条件均已在文献中公开，作为参考，其中，所述的液体发酵培养基的组成成分包括碳源和氮源；所述的碳源包括但不限于葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉或玉米粉中的任一种或多种。所述的氮源包括但不限于硝酸钠、硫酸铵、蛋白胨或黄豆粉中的任一种或多种。本专利技术的目的之二的是提供了一种制备上述淡紫拟青霉复合制剂的方法，该方法包括以下步骤将各组分混合在一起，搅拌均匀，粉碎过筛，制备得到相应的微生物制剂，可以是颗粒制剂、粉剂、可湿性粉剂或微胶囊菌剂等。其中，所述的载体可以是硅藻土、高岭土、木屑、活性碳或草炭、农作物秸杆、干燥的农家肥等；此外，本专利技术的制剂中还可加入辅料或/和助剂；所述的辅料可以是蟹壳粉或几丁质等；所述的助剂可以是润湿剂、分散剂或稳定剂等。本专利技术从植物生长激素、诱抗剂、无机盐等多种促进植物根系生长的或提高植物抗病性或提高杀线效果的物质中筛选对淡紫拟青霉孢子萌发和菌丝生长影响较小的物质作为增效剂，将所筛选到的增效剂与淡紫拟青霉孢子粉或发酵液复配得到本专利技术淡紫拟青霉复合微生物制剂，该复合微生物制剂能够有效促进促进植物根系生长，诱导植物根系产生对根结线虫等病害的抗性，且能够提高淡紫拟青霉对根结线虫的防治效果。说明如无特别说明，本专利技术中所述的百分比均为质量百分比。附图说明图I植物生长激素对淡紫拟青霉孢子萌发的影响试验结果。图2植物生长激素对淡紫拟青霉菌丝生长的影响试验结果。图3诱抗剂对淡紫拟青霉孢子萌发的影响试验结果。图4诱抗剂对淡紫拟青霉菌丝生长速率的影响试验结果。图5无机盐对淡紫拟青霉孢子生长的影响试验结果。图6无机盐对淡紫拟青霉菌丝生长的影响试验结果。说本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种防治线虫的复合微生物制剂，其特征在于，包括：淡紫拟青霉(P.lilacinus)孢子粉或发酵液、增效剂和载体；其中，所述的增效剂选自植物生长激素、诱抗剂或具有杀线效果的无机盐中的任意一种或多种。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪来发，王曦茁，郭志斌，林彩丽，田国忠，马建伟，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所，
类型：发明
国别省市：