治疗和预防无乳链球菌的免疫原性蛋白和组合物制造技术

本发明专利技术提供用于治疗和预防无乳链球菌(Streptococcus?agalactiae)(B型链球菌;GBS)的蛋白和组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术提供用于治疗和预防无乳链球菌(Streptococcus agalactiae) (B型链球菌；GBS)的蛋白和组合物。
技术介绍
革兰氏阳性菌无乳链球菌(或“B型链球菌”，简称“GBS”)会在免疫受损个体和新生儿中引起严重的疾病，菌血症和脑膜炎。有两种新生儿感染。第一种(早发，通常在出生5天内)表现为菌血症和肺炎。婴儿穿过产道时发生垂直收缩。GBS在约25%年轻女性的阴道中移生，通过有该菌移生的母亲阴道分娩婴儿中约1%会受到感染。致死率50-70%。第二种是脑膜炎，出生后10-60天发生。若怀孕女性用III型荚膜接种，则婴儿会被动免疫，迟发性脑膜炎发病率会降低但不是完全消除。“GBS”中的“B”表不兰氏分类法(Lancefield classification),其基于稀酸中可溶性糖(称为C糖)的抗原性。兰氏分类鉴定到13种C糖，称为A-0，其可在血清学上区分。最常感染人类的生物体在A、B、D和G群中。B群中株系基于其多糖荚膜的结构被分为10个血清型(la、lb、II、III、IV、V、VI、VII、VIII 和 XI)。已经进行研究开发基于蛋白和基于多糖的针对GBS的疫苗，但目前没有市售可得的GBS疫苗。因此需要针对无乳链球菌(S. agalactiae)感染的有效疫苗。本专利技术目的是提供能用于开发所述疫苗的蛋白和免疫原性组合物。
技术实现思路
革兰氏阳性菌的菌毛结构被认为是感兴趣的疫苗候选物。GBS具有三种菌毛变体，各由不同毒力岛(pathogenicity island) PI-1、PI_2a和PI_2b编码。各毒力岛由5种基因组成，所述基因编码菌毛骨架蛋白(BP) ;2种辅助蛋白(API和AP2);和2种涉及菌毛组装的分选酶蛋白。所有GBS株系载有这3种毒力岛中至少一种且这些毒力岛编码的菌毛结构蛋白(BP、AP1和AP2)的序列通常非常保守。然而，毒力岛2a(BP-2a)编码的骨架蛋白序列(本文称为GBS59)在GBS株系中不同。所述GBS59菌毛亚基有至少7个进化支，并且所述进化支之间的序列相同性低至48%。所述7个GBS59进化支的参比氨基酸序列是SEQ ID NO: I (衍生自GBS株2603)、SEQ ID N0:2(衍生自 GBS 株 515)、SEQ ID NO: 3 (衍生自 GBS 株 CJB111)、SEQ ID N0:4(衍生自 GBS 株 H36B)、SEQ ID NO: 5 (衍生自 GBS 株 CJBl 10)、SEQ ID NO: 6 (衍生自 GBS 株 DK21)和 SEQ ID NO: 7 (衍生自 GBSNEM316)。针对特定GBS59进化支产生的血清对表达该进化支的其他GBS菌株有活性，但对表达其它五种进化支之一的菌株无活性，即进化支内有交叉保护，但进化支间没有交叉保护。因此，根据本专利技术，提供包含GBS59的至少两个不同进化支的免疫原性组合物。GBS59的不同进化支可作为单独的多肽或融合成一条多肽存在于免疫原性组合物内。包含多个GBS59进化支作为疫苗成分可提高针对GBS的免疫原性组合物的菌株覆盖。另外，本专利技术人鉴定出包含负责诱导免疫原性反应的表位的GBS59进化支内的结构域。因此免疫原性组合物可以包含GBS59的至少两个不同进化支的片段，所述片段含有一个或多个所述结构域或所述结构域的亚片段，而不是所述全长GBS59蛋白。另外，GBS59的至少两个不同进化支的所述片段可以作为单一多肽链融合。使用GBS59进化支片段而不是全长蛋白有助于制备对GBS菌株覆盖提高的疫苗。因此，本专利技术提供一种包含以下至少两个的免疫原性组合物a)包含第一氨基酸序列的第一多肽，其中所述第一氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID NO: I有至少a%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDNO: I或与SEQ ID NO: I有至少a%序列相同性的序列中至少t个连续氨基酸的片段组成；b)包含第二氨基酸序列的第二多肽，其中所述第二氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:2有至少b%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:2或与SEQ ID NO: I有至少b%序列相同性的序列中至少u个连续氨基酸的片段组成；c)包含第三氨基酸序列的第三多肽，其中所述第三氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:3有至少c%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:3或与SEQ ID NO:3有至少c%序列相同性的序列中至少V个连续氨基酸的片段组成；d)包含第四氨基酸序列的第四多肽，其中所述第四氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:4有至少d%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:4或与SEQ ID NO:4有至少d%序列相同性的序列中至少w个连续氨基酸的片段组成；e)包含第五氨基酸序列的第五多肽，其中所述第五氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:5有至少e%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:5或与SEQ ID NO:5有至少e%序列相同性的序列中至少X个连续氨基酸的片段组成；和/或f)包含第六氨基酸序列的第六多肽，其中所述第六氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID NO:6有至少序列一致性，和/或(ii)由SEQ IDN0:6或与SEQ ID NO:6有至少f%序列相同性的序列中至少I个连续氨基酸的片段组成；和/或g)包含第七氨基酸序列的第七多肽，其中所述第七氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:7有至少g%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:7或与SEQ ID NO:7有至少g%序列相同性的序列中至少z个连续氨基酸的片段组成。所述免疫原性组合物可以包含所述7个氨基酸序列中的2、3、4、5、6或全部7个。本专利技术也提供包含下列至少两个的多肽a)包含第一氨基酸序列的第一多肽，其中所述第一氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID NO: I有至少a%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDNO: I或与SEQ ID NO: I有至少a%序列相同性的序列中至少t个连续氨基酸的片段组成；b)包含第二氨基酸序列的第二多肽，其中所述第二氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:2有至少b%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:2或与SEQ ID NO: I有至少b%序列相同性的序列中至少u个连续氨基酸的片段组成；c)包含第三氨基酸序列的第三多肽，其中所述第三氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:3有至少c%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:3或与SEQ ID NO:3有至少c%序列相同性的序列中至少V个连续氨基酸的片段组成；d)包含第四氨基酸序列的第四多肽，其中所述第四氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:4有至少d%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:4或与SEQ ID NO:4有至少d%序列相同性的序列中至少w个连续氨基酸的片段组成；e)包含第五氨基酸序列的第五多肽，其中所述第五氨基酸序列包含的氨基酸序列⑴与SEQ ID N0:5有至少e%序列相同性，和/或(ii)由SEQ IDN0:5或与SEQ ID NO:5有至少e%序列相同本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·格兰迪，D·迈文，C·D·日努阿多，
申请(专利权)人：诺华有限公司，
类型：
国别省市：