本发明专利技术提供了一种兔窦房结慢性损伤模型的建立方法，该方法是将兔麻醉后，背位固定于兔台上，记录体表心电图；于胸前区备皮，沿胸骨右缘第三肋处纵行开胸，逐层分离表皮及肌肉组织，钳断右侧第三肋，经纵膈打开心包，暴露右心耳；将连接心电图v1导联的电极置于兔的近窦房结区并缓慢移动，当心电图显示出窦房结区电图特征时，即向电极所在区施加20％的甲醛溶液，待兔心率下降至原心率的50％～70％时，静脉注射硫酸阿托品2mg，至心率停止回升时，停止施加甲醛；冲洗胸腔，逐层关胸，饲养备用。本发明专利技术还提供一种实施所述方法的窦房结定位注射渗透电极。与现有技术相比，本发明专利技术方法造模成功率高，且模型较稳定，可行性、重复性好。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医学领域中的动物模型领域，具体涉及一种兔窦房结慢性损伤模型的建立方法。
技术介绍
病态窦房结综合征(Sick Sinus Syndrome, SSS)是一种临床常见的难治性心律失常疾病，其发病机制尚未明确，已有研究表明，窦房结细胞损伤导致起搏及传导功能障碍是其直接原因。建立稳定、可重复的窦房结慢性损伤(Chronic Sinus Node Dysfunction,CSND)模型是对SSS进行实验研究的前提。CSND模型成功的关键是在尽可能减少动物窦房结周围组织及其他组织器官损伤·的前提下，造成窦房结慢性损伤，使心脏电生理各项指标在造模后一段时间内趋于稳定，符合临床SSS的特征。目前CSND模型的建立方法主要通过冰冻消融窦房结区法、射频消融窦房结区法、结扎窦房结血供动脉法、甲醛湿敷窦房结区法等造成窦房结细胞损伤来实现。这些方法存在较难精确定位窦房结区、损伤范围较大、存活率较低的弊端。例如，冰冻消融窦房结区法及射频消融法依赖于大型设备，操作难度较大，不适宜建立类似兔这样较小动物的CSND模型；结扎窦房结血供动脉法可成功建立窦房结急性损伤模型，兔窦房结主要血供来源于右冠脉，但兔窦房结区面积较小，暴露右冠脉部位欠佳，使用该法易造成心脏其他组织损伤，对建立CSND模型难度较大；甲醛湿敷法虽然能够建立CSND模型，但需在体表进行3 5cm切口并钳断2根肋骨，损伤较大，此外，甲醛湿敷法难以精确定位窦房结区，容易造成心脏其他组织的损伤，并易造成右心耳出血及胸膜破裂导致气胸，不利于模型动物术后存活。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种兔窦房结慢性损伤模型的建立方法。本专利技术采用的技术方案是一种兔窦房结慢性损伤模型的建立方法，包括以下步骤(一 )将兔麻醉后，背位固定于兔台上，记录体表心电图；( 二)胸前区备皮，沿胸骨右缘第三肋处纵行开胸I. 5-2. 5cm,逐层分离表皮及肌肉组织，钳断右侧第三肋，经纵膈打开心包，暴露右心耳；(三)将连接心电图Vl导联的电极置于兔心脏的近窦房结区表面并缓慢移动，根据心电图的特征(即心电图显示出窦房结区电图特征)定位窦房结区的准确位置，向该位置施加20%的甲醛溶液，待兔心率下降至原心率的50% 70%时，停止施加甲醛溶液，静脉注射硫酸阿托品2mg，如兔心率稳定于原心率的50% 70%，则可实施步骤(四)；如注射硫酸阿托品后兔心率回升到原心率的70%以上，则需再次施加甲醛溶液，当兔心率又下降至原心率的50% 70%时，停止施加甲醛溶液，再次静脉注射硫酸阿托品2mg，如此交替施加两种药物，直至静脉注射硫酸阿托品后兔心率仍稳定于原心率的50% 70% ;(四)冲洗胸腔，逐层关胸，饲养备用。优选地,所述兔为大耳白兔。优选地,所述步骤(一)中，所述麻醉采用以3%戍巴比妥钠按30mg/kg剂量耳缘静脉麻醉实施。优选地，所述步骤(三)中，所述向窦房结区施加甲醛溶液的方法是通过注射器向窦房结区表面推注甲醛溶液。这样可以根据需要随时启动或停止施加甲醛溶液，并且便于准确控制甲醛溶液的用量和推注速度。更优选地，所述甲醛溶液通过直径不超过4_的无菌棉球施加至窦房结区表面。这样的设计不仅使甲醛溶液对窦房结区的浸润位置更加准确，而且可以将甲醛溶液锁住而不致外流，以减少甲醛溶液对周围组织的损伤。优选地，在完成步骤(三)后，应待兔心率稳定于原心率的50% 70%达2小时后再实施步骤(四)。 为了更好地实施本专利技术兔窦房结慢性损伤模型的建立方法，本专利技术同时还提供一种用于实施步骤(三)的窦房结定位注射渗透电极装置。一种窦房结定位注射渗透电极装置，所述装置包括储液器(I)、注液接口(2)、金属电极针(3);其中储液器(I)包括储液器主体(Ia)和储液器颈(Ib);储液器主体(Ia) —端封闭，另一端与储液器颈(Ib)连通；储液器颈(Ib) —端与储液器主体(Ia)连通，另一端开放；注液接口(2)的一端与储液器主体(Ia)连通，另一端开放，且该开放端可与医用注射器实现密闭连接；金属电极针(3)从内部贯穿储液器主体(Ia)和储液器颈(Ib)，且其两端从储液器(I)中伸出；金属电极针(3)从储液器主体(Ia)伸出的一端用于连接心电图Vl导联，金属电极针(3)从储液器颈(Ib)伸出的一端用于将储液器(I)内的液体导至窦房结区。优选地，金属电极针(3)与所述储液器颈(Ib)内壁之间的空隙使储液器主体(Ia)中的液体仅凭重力作用不能流出，需在所述注射器的推力作用下沿金属电极针(3)的下端流出。这样不仅可以用注射器精确控制施加液体的用量，而且可以控制液体流出的速度。优选地，金属电极针(3)从储液器颈(Ib)端伸出的一端的末端缠绕无菌棉。这样可将多余甲醛溶液锁住而不致外流，减小了对周围组织的损伤；且电极一直固定于窦房结区，确保了窦房结区定位的一致性。优选地，所述金属电极针(3)从储液器颈(Ib)端伸出的一端的末端弯成圆环(3b)或爪钩，所述圆环(3b)或爪钩的内径不超过4mm。以本专利技术窦房结定位注射渗透电极的上述优选实施方式实施制备兔窦房结慢性损伤模型的步骤(三)时，金属电极针下端的金属圆环(3b)缠绕有无菌棉，棉球有效直径不超过4_，将所述金属电极针的上端(3a)连接心电图vl导联，然后将金属圆环(3b)置于近窦房结区并缓慢移动，当心电图显示出窦房结区电图特征时，停止移动金属圆环(3b)并固定位置，使用注射器(例如规格为Iml的注射器)与注液接口(2)密闭连接并缓慢向储液器主体(Ia)中注入20%的甲醛溶液，在注射压力的作用下，甲醛溶液进入储液器颈(lb)，并沿金属电极针(3)到达金属圆环(3b)上的无菌棉球，从而在窦房结区直径4mm的局部位置内发挥药效。与现有的各种兔窦房结慢性损伤模型建立方法相比，本专利技术的方法具有如下优占-^ \\\ ·I.方法简单，易于操作，不依赖于大型设备；2.采用注射器进行甲醛溶液的推注，易于控制甲醛溶液的使用量；3.金属圆环(3b)上缠绕的直径不超过4mm的无菌棉球，可将多余甲醛溶液锁住而不致外流，减小了对周围组织的损伤；且电极一直固定于窦房结区，避免了因直接使用注射器注射药物时反复插拔而感染的机会及窦房结定位的不一致性；4.通 过窦房结电图准确定位窦房结区，使甲醛溶液的施加靶位更加准确、具体，相比于甲醛湿敷法中直接用棉球敷药，可显著降低因窦房结周围组织及心脏其他组织损伤而造成心脏出血的几率；5.相比于甲醛湿敷法，由于施药靶位准确，因此可将胸部切口的长度由原来的3-5cm减小到2cm左右，需钳断的肋骨也由原来的2根减少到I根，从而可有效避免手术造成的右心耳出血及胸膜破裂导致的气胸，提高了模型动物的术后存活率；6.造模成功率高，且模型较稳定；7.可行性、重复性好。附图说明图I为兔窦房结电图；图中所示信息包括心率为164次/分、最大值O. 79mV、最小值-O. 99mV、峰峰值I. 78mV ;特征为出现深大负向之P波及相对较小的QRS波群。图2为窦房结定位注射渗透电极装置的纵向剖面图的简化示意图。附图标记列表I储液器Ia储液器主体Ib储液器颈2储液器上的注液接口3金属电极针(全针通常用不锈钢制成)3a金属电极针的上端3b金属电极针下端的金属圆环具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种兔窦房结慢性损伤模型的建立方法，包括以下步骤：(一)将兔麻醉后，背位固定于兔台上，记录体表心电图；(二)胸前区备皮，沿胸骨右缘第三肋处纵行开胸1.5？2.5cm，逐层分离表皮及肌肉组织，钳断右侧第三肋，经纵膈打开心包，暴露右心耳；(三)将连接心电图v1导联的电极置于兔心脏的近窦房结区表面并缓慢移动，当心电图显示出窦房结区电图特征时，向电极所处的窦房结区表面局部施加20％的甲醛溶液，待兔心率下降至原心率的50％～70％时，停止施加甲醛溶液，静脉注射硫酸阿托品2mg，如兔心率稳定于原心率的50％～70％，则可实施步骤(四)；如注射硫酸阿托品后兔心率回升到原心率的70％以上，则再次施加甲醛溶液，当兔心率又下降至原心率的50％～70％时，停止施加甲醛溶液，再次静脉注射硫酸阿托品2mg，如此交替施加两种药物，直至静脉注射硫酸阿托品后兔心率仍稳定于原心率的50％～70％；(四)冲洗胸腔，逐层关胸，饲养备用。
【技术特征摘要】
1.一种兔窦房结慢性损伤模型的建立方法，包括以下步骤 (一)将兔麻醉后，背位固定于兔台上，记录体表心电图； (二)胸前区备皮，沿胸骨右缘第三肋处纵行开胸1.5-2.5cm，逐层分离表皮及肌肉组织，钳断右侧第三肋，经纵膈打开心包，暴露右心耳； (三)将连接心电图Vl导联的电极置于兔心脏的近窦房结区表面并缓慢移动，当心电图显示出窦房结区电图特征时，向电极所处的窦房结区表面局部施加20%的甲醛溶液，待兔心率下降至原心率的50% 70%时，停止施加甲醛溶液，静脉注射硫酸阿托品2mg，如兔心率稳定于原心率的50% 70*%，则可实施步骤(四)；如注射硫Ife阿托品后兔心率回升到原心率的70%以上，则再次施加甲醛溶液，当兔心率又下降至原心率的50% 70%时，停止施加甲醛溶液，再次静脉注射硫酸阿托品2mg，如此交替施加两种药物，直至静脉注射硫Ife阿托品后兔心率仍稳定于原心率的50% 70% ； (四)冲洗胸腔，逐层关胸，饲养备用。2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，所述步骤(一)中，所述麻醉是以3%戊巴比妥钠按30mg/kg剂量耳缘静脉注射实施的。3.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，所述步骤(三)中，所述施加甲醛溶液的方法是通过用注射器向电极所处的窦房结区表面局部推注甲醛溶液而实现。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述注射器的尖端附有直径不超过4mm的无菌棉球。...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘如秀，
申请(专利权)人：中国中医科学院广安门医院，
类型：发明
国别省市：
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