TRAIL R2-特异性多聚体支架制造技术

本发明专利技术提供了特异性结合TRAIL受体2(TRAIL?R2)(参与细胞凋亡的细胞膜受体)的基于腱糖蛋白-3FnIII结构域的多聚体支架。本发明专利技术还提供了具有增强的对于靶的亲和力、增强的稳定性和减小的免疫原性的工程变体。此外，本发明专利技术还涉及作为预防剂、治疗剂或诊断剂的工程多价支架以及它们抗由表达TRAIL?R2的细胞引起的疾病的用途，特别地涉及抗癌的治疗性用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】TRAILR2-特异性多聚体支架专利技术背景参考序列表本申请通过引用以标题为“2943.011PC02_sequence_listing.txt”的文本文件(于2011年4月12日创建的并且大小为211千字节)与本申请一起通过EFS-Web提交的序列表将其并入本文。专利
本专利技术总体上涉及抗体模拟物的领域，具体地涉及用于例如产生具有新型结合特征的产物的基于纤连蛋白III型(Fn3)结构域的多聚体支架。具体地，本专利技术涉及衍生自人胰糖蛋白C的第3FnIII结构域的TRAILR2-特异性多聚体支架，以及它们用于TRAILR2受体检测和TRAILR2-介导的功能的调节例如癌症和其它障碍的治疗的用途。背景领域能够特异性结合期望的靶表位的生物分子具有作为治疗剂、研究和医学诊断工具的极大重要性。该类分子的公知实例为抗体。可选择特异性结合几乎任何结构表位和具有对于所述表位的亲和力的抗体。然而，经典抗体是难以在简单真核系统中表达的结构复杂的异源四聚体分子。因此，大多数抗体使用复杂且昂贵的哺乳动物细胞表达系统来产生。具有相对确定的三维结构的蛋白质(通常称为蛋白质支架)可用作用于设计工程产物的试本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.04.13 US 61/323,7081.一种包含以线性串联形式连接的六个TRAILR2特异性Tn3单体支架的TRAILR2-特异性重组多聚体支架，其中(a)每一个Tn3单体支架包含命名为A、B、C、D、E、F和G的7个β链，连接命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的6个环区域，其中：(i)AB环是SEQID：35的序列，BC环是SEQIDNO：97序列，CD环是SEQIDNO：37的序列，DE环是SEQIDNO：179的序列，EF环是SEQIDNO：39的序列，FG环是SEQIDNO：170的序列，(ii)AB环是SEQID：35的序列，BC环是SEQIDNO：97序列，CD环是SEQIDNO：37的序列，DE环是SEQIDNO：102的序列，EF环是SEQIDNO：39的序列，FG环是SEQIDNO：106的序列，(iii)AB环是SEQID：35的序列，BC环是SEQIDNO：97序列，CD环是SEQIDNO：37的序列，DE环是SEQIDNO：102的序列，EF环是SEQIDNO：39的序列，FG环是SEQIDNO：108的序列，或(iv)AB环是SEQID：35的序列，BC环是SEQIDNO：97序列，CD环是SEQIDNO：37的序列，DE环是SEQIDNO：102的序列，EF环是SEQIDNO：39的序列，FG环是SEQIDNO：170的序列，且β链A、B、C、D、E、F和G的序列分别为IEV、ALITW、CELAYGI、TTIDL、YSI、YEVSLIC和KETFTT；(b)所述Tn3单体支架以线性串联形式连接；(c)所述重组多聚体支架特异性结合TRAILR2；且(d)所述Tn3单体支架具有至少一个二硫键来连接所述7个β链其中两个。2.根据权利要求1所述的多聚体支架，其中所述多聚体支架包含7或8个TRAILR2特异性Tn3单体支架。3.根据权利要求1所述的多聚体支架，其中至少2个Tn3单体支架直接连接而无间插在所述Tn3单体支架之间的接头。4.根据权利要求1所述的多聚体支架，其中至少2个Tn3单体支架通过接头连接。5.根据权利要求4所述的多聚体支架，其中所述接头包括肽接头。6.根据权利要求5所述的多聚体支架，其中所述肽接头为柔性肽接头。7.根据权利要求5所述的多聚体支架，其中所述肽接头包含(GxS)y序列，其中x和y为整数，其中x＝1、2、3或4，并且其中y＝1、2、3、4、5、6或7。8.根据权利要求1-7中任一项所述的多聚体支架，其中，所述多聚体支架对于TRAILR2的结合与TRAILR2特异性Tn3单体支架对于TRAILR2的结合相比较得到了增强。9.根据权利要求1-7中任一项所述的多聚体支架，其中所述多聚体支架对于TRAILR2的结合与TRAILR2特异性Tn3单体支架对于TRAILR2的结合相比较增强了对所述靶的作用。10.根据权利要求8所述的多聚体支架，其中对TRAILR2的结合相对于TRAILR2特异性Tn3单体支架对于TRAILR2的结合的增强为结合亲和力的增强和/或结合亲合力的增强。11.根据权利要求8所述的多聚体支架，其中对于TRAILR2的结合亲和力和蛋白质稳定性与TRAILR2特异性Tn3单体支架对于TRAILR2的结合亲和力和蛋白质稳定性相比较得到了增强。12.根据权利要求8所述的多聚体支架，其中对于TRAILR2的结合亲合力和蛋白质稳定性与TRAILR2特异性Tn3单体支架对于TRAILR2的...

【专利技术属性】
技术研发人员：M·巴卡，T·迪斯泰德，J·斯维斯，D·泰斯，
申请(专利权)人：米迪缪尼有限公司，
类型：
国别省市：