超级细菌NDM和KPC基因双重荧光定量PCR检测方法及其试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种超级细菌NDM和KPC基因双重荧光定量PCR检测方法及其试剂盒，利用特异性设计的引物和探针，优化扩增体系和条件，能在同一体系同时完成KPC和NDM两个基因的检测，较单重荧光定量PCR更加高效、省时省力，本方法特异性好、重复性佳、灵敏性高，且可以利用已建立的标准曲线对未知样本进行定量分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及荧光定量PCR
，特别涉及检测超级细菌耐药基因的双重荧光定量PCR技术及其试剂盒。
技术介绍
碳青霉烯是有着广谱抗菌活性的一类β -内酰胺类抗生素，常作为治疗高产Ampc和超广谱的β_内酰胺酶的革兰阴性杆菌引起的感染的最有效的药物。但随着碳青霉烯类抗生素的广泛使用，细菌也逐渐获得对此类药物的耐药性。近年来，耐碳青霉烯的非发酵菌已成为医院感染的严重问题，而且耐碳青霉烯的肠杆菌细菌的报道也越来越多，这种耐碳青霉烯的革兰阴性杆菌的快速传播和流行正日益成为令人担忧的全球性问题。细菌对碳青霉烯类抗生素耐药主要原因是产生碳青霉烯酶，其包括Ambler 分子分类的Α、B、D三类酶。其中A类中的新增成员KPC (Klebsiella PneumoniaeCarbapenemase)和 B 类中新增成员 NDM (New Delhi metallo-β-lactamase),因其能够水解除头霉素类以外几乎所有的β_内酰胺类抗菌药物而引起了世界各国抗感染专家和临床微生物工作者的极大关注。携带有NDM或KPC基因的细菌也被称为“超级细菌”。特别是携带有NDM的“超级细菌”目前仅对替加本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种超级细菌的双重荧光定量PCR检测方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：（1）提取待检样本的DNA模板；（2）对DNA模板进行PCR扩增，所用引物和探针序列如下：NDM基因上游引物NDM？F：TTGGCGATCTGGTTTTCC（SEQ？ID？NO.1），NDM基因下游引物NDM？R：GGTTGATCTCCTGCTTGA（SEQ？ID？NO.2），NDM基因的探针NDM？probe：TGGCAGCACACTTCCTATCTCG（SEQ？ID？NO.3），KPC基因上游引物KPC？F：CGCAACTGTAAGTTACCG（SEQ？ID？NO.4），KPC基因下游引物KPC？R：CATGCCT...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：芮勇宇，郑芬，孙静静，王前，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：