一种从植物提取物中筛选1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸合酶抑制剂的方法技术

本发明专利技术涉及一种从植物提取物中筛选1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸合酶(DXS酶)抑制剂的方法。通过采用柱前衍生-高效液相色谱法检测底物的转化量来评价所添加的植物提取物对DXS酶的磷酸丙糖异构化活性的抑制作用。主要涉及到：将植物提取物加入到DXS酶催化的磷酸丙糖异构化反应体系中，在一定温度下反应后，以磷酸酶水解反应体系中的磷酸丙糖，再加入2，4-二硝基苯肼进行衍生化，然后以高效液相色谱法利用甲醇-水或乙腈-水为流动相梯度，紫外检测仪检测。本方法在筛选过程中，所用底物D-甘油醛3-磷酸(D-GAP)或磷酸二羟丙酮(DHAP)均不含同位素标记；筛选过程简单、快速、可行性强，不需要用昂贵的大型仪器检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶抑制剂的筛选领域，具体涉及一种从植物提取物中筛选I-脱氧-D-木酮糖5-磷酸合酶(DXS酶)抑制剂的简便方法。
技术介绍
萜类化合物又称类异戊二烯，是生物体内广泛存在的一类天然烃类化合物，它们在生物体中发挥着重要的作用，如植物甾醇参与生物膜的构建；泛醌参与呼吸作用；类胡萝卜素及叶绿素的侧链和质体醌参与光合作用；雌激素参与细胞间信号传递过程并可控制个体的生长发育；多萜醇和异戊二烯基团参与蛋白修饰；甜椒醇(capsidiol)等可作为抗菌素及植物抗毒素用于物种间相互防御；赤霉素、脱落酸、细胞分裂素和油菜素内酯调节植物生长发育；维生素A的存在可促进视网膜的正常功能，缺乏则导致夜盲症；维生素D能促·进钙、磷在肠内的吸收，维持血钙血磷的平衡，促进骨质的钙化等。同时，植物中所含的其它一些萜类化合物在调节植物与环境的关系上发挥重要的生态功能，如防御食草动物和病原微生物，吸引传粉动物和播种动物，作为中间感应化合物参与中间竞争等。萜类物质还具有抗氧化活性，在人体中可起着延缓衰老和增强免疫力的作用，其中不少萜类化合物还具有很好的药理活性，是中药和天然植物药的主要有效成分，如目前广泛使用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从植物提取物中筛选DXS酶抑制剂的方法，其特征在于：该方法包括以下环节：(1)建立筛选反应体系：采用D？甘油醛3？磷酸(D？GAP)或磷酸二羟丙酮(DHAP)作为底物，与二价金属离子和1？脱氧？D？木酮糖5？磷酸合酶(DXS酶)加入到缓冲液中，再加入所要检测的植物提取物样品，在25？45℃下孵育；所述二价金属阳离子为Mg2+、Mn2+、Co2+或Zn2+；然后加入磷酸酶，在30？45℃下孵肓，水解磷酸酯；然后加入色谱纯试剂和衍生化试剂进行衍生化；(2)按照以上环节(1)建立对照反应体系：采用D？甘油醛3？磷酸(D？GAP)或磷酸二羟丙酮(DHAP)作为底物，与二价金属离子和DXS酶加入到缓...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高文运，李恒，李瑾，胡玥，秦巍，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：