【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于动物基因工程领域，具体涉及抗猪瘟病毒的基因克隆及其稳定表达细胞系的构建。
技术介绍
猪痕病毒(CSFV)是一种小囊膜、单股正链RNA病毒，属于黄病毒科、痕病毒属。CSFV的基因组大约12. 5kb，只有I个大的开放性阅读框架(ORF)，所有结构蛋白和非结构蛋白均由该ORF所编码，编码多种蛋白在细胞和病毒的蛋白酶的加工和修饰下形成12种成熟的病毒蛋白，大约4000个氨基酸残基，分子量约438ku (Moormann R. J. M et al.，1990)。猪瘟病毒(CSFV)是引起猪的高度传染性致死性病毒性疫病一猪瘟的病原。猪瘟病毒的 感染可导致猪严重的白血球减少症、免疫抑制、广泛的血栓症和内皮损伤。猪瘟病毒引起的猪瘟疾病给世界养猪业带来巨大的挑战和威胁。尽管目前使用的猪瘟疫苗对猪有很好的保护作用，但猪瘟却始终无法得到彻底的根除，而且猪瘟病毒的感染也呈现了新的特点。目前猪瘟病毒感染除了一般看到的急性临床症状以外，还有一些情况为宿主并不表现明显的症状，呈现持续性感染状态，长期携带病毒而不表现临床症状的猪就成为重要的传染源。病毒引起持续性感染，必须具备...
【技术保护点】
一种抗猪瘟病毒的IRG6基因克隆及其稳定表达细胞系的构建，其特征在于：包括以下的步骤：(1)基因片段的获得；(2)载体的构建；(3)稳定表达IRG6蛋白细胞系的筛选；(4)检测报告基因的表达；所述的基因片段的获得，首先是采集猪瘟病毒感染猪的静脉血，用淋巴细胞分离液分离血液中的淋巴细胞，抽提细胞总RNA并反转录，然后根据NCBI数据库中公布的IRG6序列为模板，扩增出包含IRG6开放阅读框ORF的IRG6？KZ大片段；所述的载体构建是以IRG6？KZ和PCDNA？GFP质粒为模板分别设计两对含有酶切位点的引物，扩增出IRG6？E和GFP？E，并运用双酶切、T4连接酶将GFP和...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：罗廷荣，孙石开，蔡新斌，李晓宁，苏丽娟，尹珊，李晓泉，李延生，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：
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