一种从罗非鱼血液中提纯超氧化物歧化酶的方法技术

技术编号:8239237 阅读:233 留言:0更新日期:2013-01-24 19:11
本发明专利技术公开了一种从罗非鱼血液中提纯超氧化物歧化酶(SOD)的方法,包括以下步骤:将收集到的洁净罗非鱼血红细胞用双蒸水稀释后,经超声波辅助细胞破膜处理;依次加入无水乙醇和氯仿沉淀杂蛋白,离心,收集上清液,并用氮吹仪去除有机溶剂;将收集到的上清液在60℃条件下加热处理,离心,收集上清液;采用多功能蛋白快速纯化液相色谱系统控制,将经上述步骤得到的SOD液用阴离子交换进行纯化,得到的高纯度SOD液。本发明专利技术提纯方法耗时短,操作单元精简,适合于工业化生产;能较好地解决罗非鱼血排放造成的环境污染问题,并能够显著地增加企业的附加值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及水产鱼类深加工利用的方法,特别是。
技术介绍
超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)是一种源自于生物体内的氧自由基清除剂,它能够维持生物体内超氧阴离子的动态平衡,防止因体内O2 ■ ·浓度过高而引起的不良反应,被誉为“人体垃圾清道夫”,在抗衰老、抗炎症、抗氧化、抗辐射和防治肿瘤等方面显示出了独特的功能,已广泛应用于食品、医药和日用化工等行业。目前,国内外利用陆生动植物(特别是猪、牛、羊血液和大蒜)和微生物开发SOD的研究较多,而有关从水生生物如鱼、虾等中开发SOD的研究甚少,特别是利用罗非鱼血液提纯SOD的研究未见报道。 中国是世界上最大的罗非鱼养殖生产国家,罗非鱼加工厂将罗非鱼血作为废物排放,每年向环境中排放的罗非鱼血达I. 2X IO4吨。而罗非鱼血中富含如超氧化物歧化酶、血红蛋白等多种有效成分,实现罗非鱼血的综合利用不仅可以避免环境污染,而且能够显著地增加企业的附加值,优化企业的产业结构。常见的SOD提纯技术有热变性法、盐析法、有机溶剂法和层析法等,但是迄今报道的众多关于不同原材料的SOD提纯工艺和参数不尽相同,因此,开发一条适合罗本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从罗非鱼血液中提纯超氧化物歧化酶的方法,其特征在于包括以下步骤:a.红细胞破碎:将收集到的洁净罗非鱼血红细胞用1~2倍体积的双蒸水稀释后,在超声功率300~400W条件下作用15~20min进行红细胞破碎处理,然后5000×g离心15min,收集上层红细胞液;b.乙醇、氯仿沉淀:先后加入无水乙醇和氯仿到红细胞液中,边加边搅拌,搅拌20min后,静置30min,然后10000×g离心15min,收集上清液;再用氮吹仪处理去除乙醇和氯仿;c.热变性处理:将步骤b所得上清液在60℃条件下恒温水浴15~20min,冷却后10000×g离心15min,收集上清液;d.阴离子交换:将步骤c所得上清液在...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:李来好岑剑伟杨贤庆郝淑贤刘在军吴燕燕黄卉魏涯林婉玲邓建朝周婉君石红
申请(专利权)人:中国水产科学研究院南海水产研究所
类型:发明
国别省市:

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