硫酯酶以及使用其的脂肪酸或脂质的制造方法技术

技术编号:8218994 阅读:181 留言:0更新日期:2013-01-18 00:56
本发明专利技术涉及由序列号1所示的氨基酸序列构成的硫酯酶以及编码该蛋白质的硫酯酶基因、包含该基因的转化子、以及使用该转化子的脂肪酸或脂质的制造方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新型硫酯酶以及编码该硫酯酶的基因。另外,本专利技术涉及含有该硫酯酶基因的转化子以及使用该硫酯酶的脂肪酸或脂质的制造方法。
技术介绍
脂肪酸是脂质的I个主要构成成分,在生物体内与甘油进行酯结合构成三酰基甘油等脂质,在较多动植物中作为能量源被储藏利用的物质。在动植物内积蓄的脂肪酸或脂质作为食用或工业用受到广泛地利用,例如,单酰基甘油、二酰基甘油等被利用作食品的中间原料,其它各种工业产品的添加剂、中间原料。另外,还原碳原子数为12 18左右的高级脂肪酸所得到的高级醇的衍生物可以用作表面活性剂。例如,烷基硫酸酯盐或烷基苯磺酸盐等作为阴离子表面活性剂,另外,聚氧化烯烷基醚或烷基聚糖苷等作为非离子表面活性剂都可以用作清洁剂或杀菌剂。同样地,作为高级醇的衍生物的烷基胺盐或者单或二烷基季铵盐等阳离子表面活性剂日常用作杀菌剂,苯扎型季铵盐日常用作杀菌剂或防腐剂。特 别是,包含碳原子数为12左右的烷基部位的阴离子表面活性剂以及非离子表面活性剂作为表现出高清洁能力的清洁基材等,另外,包含碳原子数为14左右的烷基部位的阳离子表面活性剂作为优异的毛发护理剂等是有用的。进一步,碳原子数为18左右的高级醇作为植物的生长促进剂也是有用的。由于这样的脂肪酸类能够利用于各方面,因而其是有用的物质,所以进行使动植物等生物体内的脂肪酸或脂质的生产能力提高的尝试。例如,提出有通过导入乙酰基CoA羧化酶(ACCase)而使种子中的脂质量提高的方法(专利文献I、非专利文献I、专利文献5),通过导入酶sn-2酰基转移酶(SLCl-I)使种子中的脂质量提高的方法(专利文献2、专利文献3和非专利文献2),通过导入二酰基甘油酰基转移酶基因(DGAT)使种子中的脂质量提高的方法(专利文献4以及非专利文献3)等。另外,由于脂肪酸类的用途和有用性较大地依赖于其碳原子数,因此也进行控制脂肪酸的碳原子数、即链长的尝试。例如,提出有通过导入来自于加州月桂(Umbellularia californica (California bay))的酸基-ACP 硫酯酶使碳原子数为12的脂肪酸积蓄的方法(专利文献6、非专利文献4),通过导入来自于萼距花(Cuphea hookeriana)的酰基-ACP硫酯酶使碳原子数为8或10的脂肪酸积蓄的方法(专利文献7)、通过导入来自于樟树(Cinnamomum camphorum)的酰基-ACP硫酯酶使碳原子数为14的脂肪酸积蓄的方法(非专利文献5)等。现有技术文献专利文献专利文献I :日本特开2002-335786号公报专利文献2 :日本特表平11-506323号公报专利文献3 :国际公开第2008/076377号小册子专利文献4 :国际公开第2000/036114号小册子专利文献5 :美国专利第5,925,805号说明书专利文献6 :日本特表平7-501924号公报专利文献7 :日本特表平8-502892号公报非专利文献非专利文献I :Madoka Y, Tomizawa K, Mizoi J, Nishida I, Nagano Y, SasakiY. , uChloroplast transformation with modified accD operon increases acetyl-CoAcarboxylase and causes extension of leaf longevity and increase in seed yieldin tobacco”,Plant Cell Physiol. , 2002 Dec, 43 (12),p.1518-1525非专利文献2 :Zou J, Katavic V, Giblin EM, Barton DL, MacKenzie SL, KellerWA, Hu X, Taylor DC. , “Modification of seed oil content and acyl composition inthe brassicaceae by expression of a yeast sn-2 acyltransferase gene,,,PlantCell, 1997 Jun,9 (6) ,p. 909-923 非专利文献3 :Jako C, Kumar A, Wei Y, Zou J, Barton DL, Giblin EM, CovelloPS, Taylor DC.,“Seed-specific over-expression of an Arabidopsis cDNA encoding adiacylglycerol acyltransferase enhances seed oil content and seed weight”, PlantPhysiol. , 2001, 126 (2) ,p. 861-874非专利文献4:Voelker TA, Worrell AC, Anderson L, Bleibaum J, Fan C, HawkinsDJ, Radke SE, Davies HM. ,“Fatty acid biosynthesis redirected to medium chains intransgenic oilseed plants,,,Science. 1992 Jul 3; 257 (5066), p. 72-74.非专利文献5 :Yuan L, Voelker TA, Hawkins DJ. “Modification of thesubstrate specificity of an acyl-acyl carrier protein thioesterase by proteinengineering” Proc Natl Acad Sci USA. 1995Nov 7;92 (23),p.10639-10643.
技术实现思路
专利技术所要解决的课题本专利技术的课题在于提供一种新型硫酯酶以及编码该酶的硫酯酶基因。另外,本专利技术的课题在于提供含有该硫酯酶基因、并且提高了脂肪酸或包含这些脂肪酸的脂质的生产能力的转化子。进一步,本专利技术的课题在于提供使用该转化子的脂肪酸或包含这些脂肪酸的脂质的制造方法。解决课题的手段本专利技术者们为了提高动植物等中的脂肪酸或脂质的生产能力进行了专心研究。因此,着眼于对生物体内的脂肪酸和脂质的生物合成起重要作用的酶硫酯酶,尝试对较之现有硫酯酶的生产能力更高的新型硫酯酶进行了探索。其结果发现:从椰子(Cocos nuciferaL.)中分离新型编码硫酯酶的基因,并导入有该硫酯酶基因的转化子,与导入有其它硫酯酶基因的转化子相比较,其脂肪酸和脂质的生产能力都明显提高,以及脂质中所含的脂肪酸的组成与椰子胚乳的组成不同。基于这些发现至此完成本专利技术。本专利技术涉及下述(a) (C)的任意一种蛋白质(以下,也称为本专利技术的蛋白质)。(a)由序列号I所示的氨基酸序列构成的,并且具有硫酯酶活性的蛋白质,(b)由在序列号I所示的氨基酸序列中缺失、置换、插入和/或添加I个或多个氨基酸的氨基酸序列构成的,并且具有硫酯酶活性的蛋白质,(c)由与序列号I所示的氨基酸序列具有90%以上同一性(同源性)的氨基酸序列构成的本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:东条卓人远藤圭二
申请(专利权)人:花王株式会社
类型:
国别省市:

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