【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药卫生领域,特别是。
技术介绍
蛋白印迹实验是用来对组 织或细胞中的蛋白含量进行检测,该实验方法一直以来被医院检验科、高校生物专业研究生、科研学者等用来对动物、植物以及细胞内蛋白的含量进行测定,已广泛应用于蛋白的检测、抗体活性检测和疾病早期诊断等方面,被认为是鉴定特定蛋白的可靠方法,因此,快速精确的蛋白印迹实验方法就显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种快速,精确,灵敏的蛋白印迹实验方法。本专利技术的整体技术构思是对蛋白印迹实验所需要的试剂和需要进行的实验步骤进行改良,使蛋白印迹实验所需要的试剂耗费减少,时间缩短,同时保证了实验的速度和高质量的实验结果,可以用来进行各种组织/细胞中蛋白的检测包括如下工艺步骤(I)凝胶配制试剂盒将 I. 5 tris-HCL100ml, I. OM tris_HCL50ml,30%丙烯酰胺100ml, SDS 5ml, APS 5ml,TEMEDlml装配成试剂盒,4°C保存,可使用上百次,无需针对每种试剂进行单独配制。(2) 一步法试剂盒此系列试剂盒代替了传统的耗费4. 5小时的三步法(封闭,一抗孵育,二抗结合),使得研究者可在一小时内完成蛋白印迹实验。将蛋白自胶转至膜上后,在预处理溶液中孵育5分钟,接着在WB(蛋白印迹)溶液中与一抗孵育40分钟,然后洗膜三次,每次5分钟,然后应用化学发光底物显色。本专利技术所公开的方法是将凝胶配制所需要的各种试剂装配成试剂盒。使用一步法试剂盒使得封闭、一抗、二抗、洗膜时间大大缩短,广泛的应用于组织/细胞蛋白的检测,保证了实验结果的快速准确。具体实施例方式 ...
【技术保护点】
改良的蛋白印迹实验方法,其特征在于它包括如下工艺步骤:(1)凝胶配制试剂盒:将1.5M?tris?HCL100ml,1.0M?tris?HCL50ml,30%丙烯酰胺100ml,SDS?5ml,APS?5ml,TEMED1ml装配成试剂盒,4℃保存,可使用上百次,无需针对每种试剂进行单独配制。(2)一步法试剂盒:此系列试剂盒代替了传统的耗费4.5小时的三步法(封闭,一抗孵育,二抗结合),使得研究者可在一小时内完成蛋白印迹实验。将蛋白自胶转至膜上后,在预处理溶液中孵育5分钟,接着在WB(蛋白印迹)溶液中与一抗孵育40分钟,然后洗膜三次,每次5分钟,然后应用化学发光底物显色。
【技术特征摘要】
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