一种海水中四环素抗性基因的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种海水中四环素抗性基因的检测方法，步骤为：取1L海水样品，分别以中速定量滤纸和0.22μm?微孔滤膜抽滤，留取0.22μm?微孔滤膜作为检测样本，?SDS法提取DNA，采用PCR法对外输泵蛋白tet(A)和核糖体保护蛋白基因tet(M)进行检测，引物序列分别为tet-AF:?GCGCTNTATGCGTTGATGCA和tet-AR:?ACAGCCCGTCAGGAAATT；?tet-MF:?ACAGAAAGCTTATTATATAAC和tet-MR:?TGGCGTGTCTATGATGTTCAC，得到387bp和171bp的扩增带谱。检测结果电泳阳性，说明海水中含有四环素抗性基因。本方法为海洋环境新型污染物ARGs的检测提供了方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于水环境污染物的检测
，具体涉及一种海水中新型污染物-抗生素抗性基因tet的检测方法。
技术介绍
医疗和养殖中抗生素的大量使用，使抗生素通过生活污水和养殖废水途径进入水环境，环境中生物或细菌因此产生耐药性基因。耐药基因的传播导致耐药性可能从非致病菌转移到致病细菌，并进一步传播、发展成生态层次上的耐药性，而使没有接触到抗生素的个体也产生耐药性。Pruden等人(2006)首先将抗生素抗性基因(AntibioticResistanceGenes, ARGs)作为一种新型“环境污染物”提出。由于ARGs在生物体内可能长久而持续地传播，即使携带ARGs的细胞被杀灭或消亡，它释放到环境中的DNA因受脱氧核糖核酸酶的保护而仍然存在，并最终可能转移给其它细胞，因此，ARGs在环境中的持久性残留、菌群间的迁移、转化和传播，比抗生素残留本身对环境生态的危害更大。近海环境中城市污水和养殖用水的大量排入，使抗性基因容易扩散进入海水环境并传播给海水环境中微生物，获得了耐药性的微生物可能通过接触、食物等多种方式传播进入人体，对人类健康和水生生态系统安全构成巨大威胁。但迄今为止，抗生素抗性基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种海水中四环素抗性基因tet的检测方法，其特征在于，取1L待测海水样品，两次抽滤，采用SDS法提取水样中DNA，采用PCR法对外输泵蛋白tet(A)和核糖体保护蛋白基因tet(M)进行检测，检测得到387bp和171bp的扩增带谱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：任利华，孙国华，刘爱英，刘丽娟，姜向阳，宋秀凯，姜会超，
申请(专利权)人：山东省海洋水产研究所，
类型：发明
国别省市：