本发明专利技术为一种枯草芽孢杆菌DJ-6菌株（其在CGMCC的保藏编号为CGMCCNo.6314）及发酵液制备成悬浮剂的方法。该制剂能有效防治草莓炭疽病、草莓灰霉病、草莓枯萎病和草莓黄萎病。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种微生物及用途，更具体地说涉及一种枯草芽孢杆菌OfeciJAz1Ssubtiiis)Y)y&菌株、用途及其制剂的制备方法，属于生物农药
技术介绍
由植物病原真菌围小丛壳菌(67o 6 Ti 77a侵染引发的草莓炭疽病、灰葡萄孢菌cinerea)侵染引发的草莓灰霉病、尖孢镰刀菌草莓专化型oxysporium Schl. f. fragariae Winks et Wiliams)侵染引发的草莓枯病和由大_花轮枝抱菌(alboatrum和Verticillium t/aA7ia<9)侵染引发的草莓黄萎病是草莓上主要的真菌病害。草莓病害防治效果的高低，将直接影响到产量和种植户的收 益。草莓病害的防控常用化学药剂有喃菌酯(azoxystrobin)、醚菌酯(kresoxim-methyl)、苯醚甲环唑(difenoconazole)、烯]3亏菌酯(enestroburin)、卩定酸菌胺(boscalid)、多菌灵(carbendazim)、卩比唑醚菌酯(pyraclostrobin)和咪鲜胺(prochloraz)等。长期以来，由于多频次、多剂量施用化学药剂，造成病原菌对常用化学药剂都产生了不同程度的抗(耐)药性，生产上屡屡出现防治失败的事例。目前成功用于防治病害的生物农药专用制剂还没有。文献已报道生物防治控制病害的生防菌属(种)主要有(I)木霉菌属真菌spp.)中的绿色木霉(Tri choderma viri de)和哈茨木霉(Tri choderma harzianum ) ； (2)芽抱杆菌属细菌(.Bacillus spp.)中的枯草芽抱杆菌{Bacillus subtilis、、多粘芽抱杆菌{BacilluspoIymyxa )和巨大芽抱杆菌 iBacillus megaterium') ； (3)假单胞菌属细菌{Pseudomonasspp.)中的突光假单胞细菌fluorescens^)等。因草莓是即采即食的应时鲜果，且无果皮防护，所以对药剂的选择有很大的局限性。因此对草莓病害的生物防治在生产上具有一定迫切需求。本专利技术提供的可同时兼治草莓各类病害的颉颃细菌枯草芽孢杆菌DJ-6菌株及制剂，在现有技术中没有提及和公开。
技术实现思路
本专利技术解决现有技术存在的不足，提供一株分离自黄杜鹃花的内生芽孢杆菌枯草芽孢杆菌UaciBm subtilis)V)i-&菌株，该菌株可用于防治草莓炭疽病、草莓灰霉病、草莓枯萎病和草莓黄萎病。同时本专利技术还提供用该枯草芽孢杆菌DJ-6菌株加工成悬浮剂的制备方法。本专利技术是通过以下技术方案实现的 本专利技术的枯草芽孢杆菌(拉丁文学名为Bacillus subtil is )DJ-6菌株，已于2012年7月2日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路I号院3号中国科学院微生物研究所，保藏号为CGMCC No. 6314。本专利技术的菌种具有如下特征 (I)DJ-6菌株的细胞形态及生理生化特征(见表I)权利要求1.一种枯草芽孢杆菌SMiiJi1S)DJ-6菌株，该菌种已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No. 6314。2.根据权利要求I所述的枯草芽孢杆菌DJ-6菌株，其特征在于该菌株的16SrRNA基因序列为3.根据权利要求I所述的枯草芽孢杆菌DJ-6菌株，其特征在于该菌株的gyrB基因序列为4.权利要求I所述的枯草芽孢杆菌DJ-6在防治草莓炭疽病、草莓灰霉病、草莓枯萎病和草莓黄萎病方面的应用。5.一种用权利要求I所述的枯草芽孢杆菌DJ-6菌株发酵液制备而成的悬浮剂。6.一种制备权利要求4所述的悬浮剂的方法，其特征在于包括以下步骤(A)菌液的获得 用无菌芽签挑取事先在PDA固体培养基上划线培养好的DJ-6菌株单菌落斑，接种于装有5 mL PDA液体培养液的容积为20 mL的三角瓶中，于30 °C >200 rpm条件下振荡培养16h，过夜，将上步所得培养液5 mL全部接种于装有400 mL PDA培养液的容积为1000 mL的三角瓶中，200 rpm、30°C条件下振荡培养16 h ;把所得的400mL培养液接种于装有20 L培养液的容积为30L的发酵罐(镇江东方GUS-30)，20L发酵培养液中固容物含量为豆柏100g、马铃薯淀粉200 g、蔗糖25 g、酵母粉25 g、碳酸钙20 g、MnS04 1.0 g，设置发酵条件为溶氧100%，搅拌速度为350 rpm，发酵温度30 °C，发酵时间36 h，pH 7. 0-7. 2 ； (B)菌剂加工工艺 将发酵好的发酵液按如下方法加工成悬浮剂 (I)将发酵液离心(8000 rpm)后用20%丙三醇溶液(V/V)(溶液用无菌水配制)重新悬浮，测定悬浮液的活芽孢含量，根据测定结果用20%丙三醇溶液(V/V)调节悬浮液的活芽孢数，终含量调节成芽孢含量为LOXIOki cfu/mL (即每毫升含100亿个活芽孢);(2)在上述调节好的悬浮液中按5 g/L (W/V)的用量加入黄原胶，并搅拌均匀，得成品悬浮剂的浓度为100亿活芽孢/mL。7.根据权利要求5所述的制备悬浮剂的方法，其特征在于步骤(B)中所述的悬浮剂中的添加剂为丙三醇和和黄原胶。全文摘要本专利技术为一种枯草芽孢杆菌DJ-6菌株(其在CGMCC的保藏编号为CGMCCNo.6314)及发酵液制备成悬浮剂的方法。该制剂能有效防治草莓炭疽病、草莓灰霉病、草莓枯萎病和草莓黄萎病。文档编号C12R1/125GK102876604SQ201210354629公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月23日 优先权日2012年9月23日专利技术者杨敬辉, 吉沐祥, 姚克兵, 庄义庆 申请人:江苏丘陵地区镇江农业科学研究所本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种枯草芽孢杆菌（Bacillus？subtilis）DJ？6菌株，该菌种已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为：CGMCC？No.？6314。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨敬辉，吉沐祥，姚克兵，庄义庆，
申请(专利权)人：江苏丘陵地区镇江农业科学研究所，
类型：发明
国别省市：
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