抗-αvβ6抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了识别αvβ6整联蛋白的人源化抗体，所述抗体包含非人起源的可变区和人起源的免疫球蛋白的至少一部分。本发明专利技术还提供了包含所述抗体的药物组合物及其应用。本发明专利技术另外涉及用于制备此类抗体的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术在细胞生物学、免疫学和肿瘤学领域中。具体而言，本专利技术涉及识别ανβ6整联蛋白的人源化抗体，所述抗体包含非人起源的可变区和人起源的免疫球蛋白的至少一部分。本专利技术还涉及关于其制备的过程、包含其的药物组合物，以及通过施用人源化抗ανβ6抗体治疗各种疾病的方法。本专利技术还涉及在肿瘤细胞和组织表面上差异表达的整联蛋白ανβ6的鉴定，这种差异表达在确定肿瘤细胞的转移潜能中的用途，以及使用与整联蛋白α νβ 6结合的配体特别是抗体，诊断和治疗/预防肿瘤转移以及用于清除残留转移性肿瘤细胞的方法。相关领域整联蛋白是结合细胞外基质蛋白且介导细胞-细胞和细胞-细胞外基质相互作用(一般称为细胞粘附事件)的细胞表面糖蛋白受体(Ruoslahti，E.，J. Clin. Invest. 87 :1-5(1991)；Hynes, R. O. , Cell 69:11-25 (1992))。这些受体由非共价结合的 alpha (α)和beta (β)链构成，所述α链和β链组合以产生具有不同细胞和粘附特异性的各种异二聚蛋白质(Albeda，S. Μ.，Lab. Invest. 68 :4-14 (1993))。近期研究已暗示某些整联蛋白调节各种细胞过程，包括细胞粘附、迁移、侵袭、分化、增殖、凋亡和基因表达(Albeda，S. Μ.，Lab. Invest. 68 :4-14 (1993)；Juliano, R. , CancerMet. Rev. 13 :25-30 (1994)；Ruoslahti,E.和 Reed，J. C.，Cell77 :477-478 (1994);以及 Ruoslahti，E.和 Giancotti，F. G. ,CancerCellsl :119-126 (1989) ;Plow, Haas 等人 2000 ;van der Flier 和 Sonnenberg2001 )。ανβ6受体是作为细胞表面异二聚蛋白质表达的整联蛋白家族成员之一(Busk，Μ.等人，J. Biol. Chem. 267 (9):5790-5796 (1992))。尽管αν亚单位可以与各种β亚单位(β P β 3、β 5、β 6和β 8)形成异二聚体，但β 6亚单位只能与α ν亚单位作为异二聚体表达。α νβ 6整联蛋白已知是纤连蛋白、潜伏相关肽(LAP)和腱生蛋白C结合细胞表面受体，通过其上的RGD三肽结合位点与细胞外基质相互作用(Busk，Μ.等人，J. Biol. Chem. 267 5790-5796 (1992) ；ffeinacker, A.等人，J. Biol. Chem. 269 :6940-6948 (1994) ；Prieto,A. L.等人，Proc. Natl. Acad. Sci USA90 :10154-10158 (1993))。尽管 ανβ6 整联蛋白在超过10年前首次被鉴定和测序，但ανβ6特别是在疾病中的生物学意义仍有待研究。ανβ6的表达局限于上皮细胞，在其中它在健康组织中以相对低的水平表达，且在发育、损伤和创伤愈合期间显著上调(Breuss, J. Μ.等人,J. Histochem. Cytochem. 41 :1521-1527 (1993)；Breuss, J. Μ.等人，J. Cell Sci. 108 :2241-2251 (1995) ；Koivisto, L.等人，Cell Adhes.Communic. 7 :245-257 (1999);Zambruno，G.等人，J. Cell Biol. 129 (3):853-865 (1995)；Hakkinen, L.等人，J. Histochem. Cytochem. 48 (6):985-998 (2000))。日益增加的近期报道证实ανβ6在上皮起源的癌症中是上调的，所述癌症包括结肠癌(Niu，J.等人，Int.J. Cancer92 :40-48 (2001)；Bates,R. C.等人，J. Clin. Invest. 115 :339-347 (2005))、卵巢癌(Ahmed, N.等人，J. Cell Biochem. 84 :675-686 (2002) ；Ahmed, N.等人，J. Histochem.Cytochem. 50 :1371-1379 (2002) ；Ahmed, N.等人，Carcinogen. 23 :237-244 (2002))、鳞状细胞癌(Koivisto, L.等人，Exp. Cell Res. 255 :10-17 (2000) ；Xue, H.等人，Biochem.Biophys. Res. Comm. 288 :610-618 (2001) ；Thomas, G. J.等人，J. Invest. Derma toll 17 67-73 (2001) ；Thomas, G. J.等人，Int. J. Cancer 92 :641-650 (2001) ；Ramos, D. M.等人，MatrixBiol. 21 :297-307 (2002)； (Agrez,M.等人，Br. J. Cancer81 :90-97 (1999)；Hamidi,S.等人,Br. J. Cancer82 (8):1433-1440 (2000)；Kawashima,A.等人，Pathol. Res. Pract. 99(2):57-64 (2003))，和乳腺癌(Arihiro，K.等人，Breast Cancer7 :19-26 (2000))。已报道a v亚单位可能涉及肿瘤转移，和阻断这种亚单位从而可以预防转移(关于综述，参见Imhof, B. A.等人，in ,Attempts to Understand Metastasis Formation I. ^U. Giinthert和 ff. Birchmeier, eds.，Berlin Springer-Verlag,第 195-203 页(1996))。ανβ6整联蛋白在肿瘤细胞生物学中可能具有多重调节功能。近期研究已证实β6亚单位的细胞外和细胞质结构域介导不同细胞活性。细胞外和跨膜结构域已显示介导 TGF-β 活化和粘附(Sheppard, D. , Cancer and Metastasis Rev. 24 :395-402 (2005)；Munger, J. S.等人，Cell96 :319-328 (1999))。β 6亚单位的细胞质结构域包含独特的11氨基酸序列，所述氨基酸序列在介导α νβ 6调节的细胞增殖、MMP生产、迁移和前存活中是重要的(Li，X.等人，J. Biol. Chem. 278(43) :41646-41653 (2003) ；Thomas, G. J.等人，J. Invest. Derm. 117 (1):67-73 (2001) ；Thomas, G. J.等人，Br.J. Cancer 87 (8):859-867 (2002)；Janes,S. M.和 Watt，F. M.，J. Cell Bioll66 (3):419-431 (2004))。β6亚单位已被克隆、表达和纯化(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种与αvβ6特异性结合的人源化抗体，其包含SEQ？ID？NO：3的重链可变结构域序列和SEQ？ID？NO：4的轻链可变结构域序列。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：S·维奥莉特，L·A·库珀曼，K·J·西蒙，P·H·温莱博，H·范维利吉曼，J·萨尔丹哈，A·A·鲁格夫斯科，
申请(专利权)人：拜奥根IDEC马萨诸塞公司，
类型：发明
国别省市：