本领域已有检测简单肽的方法。然而，由于受检肽的异质性，检测一组肽混合物而非具有明确氨基酸序列的各别肽的有效血浆浓度的方法很复杂。本申请提供检测和评估随机序列聚合物(RSP)组合物的改进方法，检测和和定量测定RSP组合物的方法，根据肽亚组与某些捕获多肽的相互作用确定和富集RSP组合物中肽亚组的方法，和对需要的对象给予RSP组合物的方法，其中，剂量方案和用量可根据上述检测和定量方法加以确定和评估。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过对随机序列聚合物的组合物基于血清蛋白的检测，改进含随机序列聚合物的组合物的设计、生物利用度和效能的方法 相关申请本申请要求2009年11月17日递交的美国临时申请No. 61/281，470和2010年9月27日递交的美国临时申请No. 61/386,909的优先权益。
技术介绍
现有技术中已有检测简单多肽的方法。然而，由于受检多肽的异质性，检测一组多肽混合物而非具有明确氨基酸序列的一种多肽的有效血浆浓度方法很复杂。例如，含随机序列聚合物(RSP)的组合物包括随机掺入多肽链的氨基酸的复杂混合物。RSP组合物由氨 基酸的特性和比例而不是特定序列决定。鉴于多肽的多样性，需要对多种制造方法制备的这些RSP组合物的均一性和组成进行评估的改进方法。确定RSP组合物在体内的状态具有重要的免疫学意义，因为取决于给药途径和/或给药频率及血清蛋白与RSP组合物的结合，这种肽混合物可能激发初级炎症反应(THl型)或初级调控反应(TH2型)，导致其在受试对象中的药代动力学和药效学改变。更加严谨的设计和坚持给予RSP组合物可能提高治疗效果或者减少潜在的不良炎症应答反应。因此，为了治疗目的，需要定量分析RSP组合物的方法，例如有助于评估这种肽混合物在体内的状况和确定合适的剂量及给药方式。 专利技术概述本申请提供检测和评价RSP组合物的改进的方法。本专利技术提供检测和定量分析RSP组合物的方法。本专利技术提供基于肽亚组与特定捕获多肽相互作用的测定，和富集RSP组合物中多肽亚组亚组的方法。本专利技术进一步提供对需要接受治疗的患者给予RSP组合物的方法，其中可根据上述检测和定量方法来确定或评估给药方案和剂量。本申请还提供检测RSP组合物的方法，包括以下步骤(a)将所述RSP组合物附着于固相支持物上；(b)使(a)所述固相支持物与含蛋白质生物液体接触；(c)鉴定特异性结合于(a)所述固相支持物的(b)所述的蛋白质；(d)获得基本纯的(C)所述结合蛋白产物；(e)将(c)所述蛋白质附着于定量检测所述RSP组合物用的工具上；和(f)测定所述RSP组合物与(e)所述蛋白每一种的结合。本说明书也提供一种改进RSP组合物设计的方法，包括以下步骤(a)将所述RSP组合物附着于固相支持物上；(b)使(a)所述固相支持物与含蛋白的生物液体接触；(c)鉴定特异性结合于(a)所述固相支持物的(b)所述的蛋白质；(d)获得基本纯的(C)所述的结合蛋白产物；(e)使(C)所述蛋白质附着于定量检测RSP组合物用的工具上；(f)测定所述RSP组合物与(e)所述蛋白质结合的每一种肽；(g)调整所述RSP组合物的设计以增加或减少与(e)所述一种或多种蛋白质的结合；(h)重复步骤(f) ；(i)任选地重复步骤(f_h)，其中调整所述RSP组合物的设计可导致一种或多种效果提高生物利用度、减少毒性和提高效能。此外，本申请提供一种检测RSP组合物中肽种类的方法，包括以下步骤(a)将所述RSP组合物附着于固相支持物上；(b)使(a)所述固相支持物与含蛋白的生物液体接触；(C)鉴定特异性结合于(a)所述固相支持物的(b)所述的蛋白质；(d)获得基本纯的(C)所述结合蛋白制品；(e)使(C)所述蛋白质附着于固相支持物上；(f)使(e)所述固相支持物与所述RSP组合物接触；(g)测定所述RSP组合物中每种肽与(f)所述固相支持物的结合。另外，本申请提供一种改进RSP组合物中肽种类设计的方法，包括以下步骤(a)使所述RSP组合物附着于固相支持物上；(b)使(a)所述固相支持物与含蛋白的生物液体接触；(C)鉴定特异性结合于(a)所述固相支持物的(b)所述蛋白质；(d)获得基本纯的(C)所述结合蛋白制品；(e)使(C)所述蛋白质附着于固相支持物上；(f)使(e)所述固相支持物与所述RSP组合物接触；(g)测定所述RSP组合物中与(f)所述固相支持物结合的每一种肽；(h)调整所述RSP组合物的设计以增加或减少与(f)所述一种或多种蛋白质的结合；(i)重复步骤(g) ；(j)任选地重复步骤(g_j)，其中调整所述RSP组合物肽种类的设计可导致一种或多种效果提高生物利用度、减少毒性，和提高效能。 通过应用本申请所述方法，研究者不仅可以更可靠地检测RSP组合物中的低含量组分，而且可以特异性地检测RSP组合物中与生物活性如毒性或效力有关或对其有贡献的肽种类。本专利技术的基础是，发现RSP组合物中的一种肽或多种肽可与某些具有蛋白质性质的物质特异性结合。相反，一旦鉴定到本说明书称为“捕获多肽”的蛋白质，即可利用一种或多种这类捕获多肽定量分析RSP组合物中所含的肽，并分离RSP组合物中功能更优良的肽亚组，或者根据结合特异性给RSP组合物中的各组分分类。为了实施本专利技术，鉴定到能与(RSP组合物所含)肽结合的捕获多肽后，即可将其制备成可用于实施本专利技术的形式，SP对其进行分离和纯化，纯度达到足以结合(RSP组合物所含)肽而不受到存在的其他组分干扰。本专利技术的一个方面提供了一种评价或测定RSP组合物不同制造的制剂、用不同方法制造的、或不同的制造后加工的产品的差异的方法。本专利技术的具体方法是，比较不同的RSP组合物制品与捕获多肽的结合来确定各制品之间的相似性和/或差异。本专利技术的另一方面提供一种定量分析RSP组合物或含RSP组合物的样品中所含肽的方法。本专利技术的一些实施方式是检测给予RSP组合物后其在体内的生物可利用含量或浓度(如血浆浓度)的方法。本专利技术的方法是检测受试对象组织中存在的RSP组合物，所述受试对象先前曾接触过RSP组合物或用其治疗过，在这种接触后立即、或在接触后至少大约10、20、30、或45分钟，或者 1、2、4、6、12、24、36 或 48 小时，或 3、4、5、6、7 或 10 天，或 2、3、4、6、8 或 12 周进行一次或多次所述方法的检测。本专利技术的一种具体方法是检测哺乳动物血清或血浆中存在的RSP组合物的各组分，所述哺乳动物在进行所述方法前曾在上述期间内用所述DSP组合物治疗过。在某些具体实施方案中，所述哺乳动物是人。在某些实施方案中，本专利技术方法包括通过使RSP与一种或多种预先确定的捕获多肽结合然后用例如免疫检测方法检测RSP组合物的存在，和任选地检测其含量。因此。本专利技术的一个方面包括选择或鉴定能与RSP组合物优先结合的血清蛋白。在某些实施方案中，鉴定一种或多种血清蛋白的方法包括使RSP组合物与包括血清的生物样品接触；如果样品中存在RSP组合物中的肽，则检测其与血清中一种或多种组分的结合；分离得到结合组分，鉴定一种或多种结合组分。在一些实施方式中，分离这种结合组分的方法是，使样品接触设计的能与RSP组合物所含肽结合的亲和柱、随后洗脱结合组分，然后鉴定结合组分。任何能与RSP组合物所含肽结合的血清结合蛋白可用于上述方法。合适的检测方法包括直接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western印迹法、免疫流式细胞检测法、放射免疫检测法(RIA)，或者任何其他能定量检测特异性抗原的免疫学检测方法。本专利技术的一个方面是一种检测生物样品中RSP组合物存在与否的方法，包括使生物样品与至少一种捕获多肽接触；检测捕获多肽与RSP组合物有无结合，其中存在这种结合表明在生物样品中存在RSP组合物中的肽组分。可进一本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：E·扎内利，J·克里格，J·康诺利，K·H·柯林斯，
申请(专利权)人：阿雷斯贸易股份有限公司，
类型：
国别省市：
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