本发明专利技术涉及一种用于禽蛋中沙门氏菌检测的增菌培养液，属于选择性富集禽蛋中极低数量受亚致死损伤沙门氏菌的增菌培养液技术领域。本发明专利技术的增菌培养液包括以下原料组分组成：按照1L所述增菌培养液中的含量计：蛋白胨7～11g/L、氯化钠5～8g/L、磷酸氢二钠7～9g/L、磷酸二氢钾0.5～1g/L、煌绿6～8mg/L、牛胆盐0.5～1g/L、萘啶酸10～14mg/L、脱脂牛奶粉15～40g/L。本发明专利技术的增菌培养液是一种选择性富集低数量受亚致死损伤沙门氏菌的增菌培养液，缩短食品中沙门氏菌检测的增菌处理步骤的同时，克服漏检样品中低数量亚致死沙门氏菌的缺陷，提高了食品中沙门氏菌检测的可靠性和准确度。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及ー种用于禽蛋中沙门氏菌检测的选择性增菌培养液，更具体地说，本专利技术涉及ー种用于禽蛋中极低数量受亚致死性损伤沙门氏菌检测的选择性增菌培养液，属于选择性富集禽蛋中极低数量受亚致死损伤沙门氏菌的增菌培养液
技术介绍
沙门氏菌ewierica)是ー种全球性的人畜共患的食源性致病菌。全球毎年有2亿人到13亿人感染非伤寒沙门氏菌，其中估计有300万人死亡。沙门氏菌菌型繁多，全球已经发现2500多个菌型以上，其中鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌对人类健康威胁最大。我国的禽蛋总产量居世界首位，而且鸡蛋在我国食品消费中占有重要地位。虽然 蛋清中含有溶菌酶、卵转铁蛋白和碱性的环境能抑制微生物的生长，但是肠炎沙门氏菌的Ta/ガ基因却能帮助克服这些抑菌物质，因此肠炎沙门氏菌是从鸡蛋中分离出的最常见的菌型，因而鸡蛋和蛋制品是肠炎沙门氏菌最普遍的传播媒介。2010年美国由鸡蛋感染肠炎沙门氏菌而引起近2000例的食物中毒。开发准确并具有高灵敏度性的禽蛋中肠炎沙门氏菌的检测方法，有助于控制沙门氏菌在人类食品安全中构成的潜在威胁。由于食品进行冷藏、加热、冷冻、高盐、干燥等加工，能使食品中微生物受到亚致死性损伤，在这种状态下的微生物将会变得对ー些物质敏感。在GB中的食品微生物检测过程中会用到选择性增菌液和选择性培养基，如用于沙门氏菌检测的四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB )、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂(XLD )，这些选择性增菌液和选择性培养基中的胆盐、煌绿等选择性成分不利于亚致死细胞的生长。因此，为了克服选择性增菌液对亚致死沙门氏菌的漏检，GB中规定使用两步增菌的过程，即采用非选择性增菌与选择性增菌。但是，两步增菌过程需48小时，不利于快速检测。目前国内外的大多数研究一般使用人エ接种法制备样品，其中的沙门氏菌往往较多，检出较容易。但在实际生产和产品中，沙门氏菌感染食品时数量往往是很低的，一般认为的极低数量为I 10 cfu/50g (每50g样品中I 10个沙门氏菌)。虽然目前开发了很多快速检测方法，但是食品中的沙门氏菌常常数量极低且受亚致死性损伤，造成了漏检的情况发生，因此增菌步骤是不可缺少的。目前尚未发现有针对极低数量亚致死损伤的沙门氏菌的一歩快速富集增菌培养液的报道，以及在实际食品样品中的应用。国家知识产权局于2009. 10. 28公开了一件申请号为200810093449. 1，名称为“引起食物中毒沙门氏菌属快检试剂”的专利技术专利，该专利涉及ー种引起食物中毒沙门氏菌属快检试剂，特别是食源性鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、付伤寒甲、こ沙门氏菌的快检试剂及其制备方法。该快检试剂具有快速、准确、灵敏度高等特点，较传统方法更具有应用价值，对指导临床诊断和治疗，防止滥用抗菌药物具有重要意义。本专利技术是在增菌液中増加了特异性的沙门氏菌属多价及单价血清，使检测确诊过程缩短至2-6小吋，增菌时能够利用特异血清的血清凝集反应，鉴定的准确率均在97%以上。检测致病菌时耗时少、灵敏度高，准确性強。上述专利其特征在于具有如下配方(克/每升蒸馏水)蛋白胨5. 0-10. O ;乳糖3.5-4. 5 ;磷酸氢ニ钠4. 0-5. O ;磷酸ニ氢钠5. 0-6. O ;复合生长因子10. 0-20. O ;亚硒酸氢钠3. 5-4. 5 ;无菌沙门氏菌属多价及单价血清10-20ml ;蒸馏水加至IOOOmL,调pH7. I。上述专利是ー种快速检测试剂，其缺点之一是只针对健康的沙门氏菌进行增菌，没有特别针对受亚致死性损伤的沙门氏菌的增菌，而生产中遇到的食品中的沙门氏菌常常处于受亚致死性损伤的情况，且沙门氏菌的数量通常极低；缺点ニ是没有明确的对非目标菌的抑制作用，不能有效避免非目标造成的假阳性。国家知识产权局于2008. 5. 28公开了一件申请号为200710032778. 0，名称为“沙门氏菌显色培养基、检测试剂盒及检测方法”的专利技术专利，该专利涉及的一种沙门氏菌显色培养基、检测试剂盒及检测方法，属于食品微生物安全监测领域。检测试剂盒由加入了O.I O. 5g细菌特异性酶的混合显色底物M-galactoside的显色培养基与增菌液A缓冲蛋白胨水培养基、B四硫磺酸钠煌绿增菌液组成；检测时，对食品样品进行前处理，先后利用增菌液A、B进行增菌培养，最后将二次增菌液接种至显色培养基上培养，若出现光滑、略凸起、直径I 3_、边缘整齐的品红色菌落，说明样品存在沙门氏菌。所述的显色培养基成本低廉，试剂盒配置简单，检测方法检测灵敏度高，周期短、可操作性強、适用于处理大通量的样本、易于产业化生产，可以广泛推广应用到食品卫生、环境监测等领域。上述专利其特征在于配方为蛋白胨20 30g、酵母膏粉3 7g、氯化钠4 7g、胆盐 O. I O. 5g、琼脂 12 15g、混合显色底物 M-galactoside 0. 05 0. 95g、Na2C030.02 0. 04g、选择性添加剂0. 01 0. 05g。上述专利的增菌液缺点是使用的是国标中的两种增菌液，检测周期长，容易漏 检，无法对现实生产中极低数量的受亚致死性损伤的沙门氏菌进行增菌。
技术实现思路
本专利技术g在解决现有技术中用于禽蛋中沙门氏菌检测的选择性增菌液和选择性培养基不利于亚致死性细胞的生长，从而使食品中极低数量的受亚致死性损伤的沙门氏菌出现漏检的情況，同时现有的非选择性和选择性两步法增菌过程需要48小时，耗费大量时间，不利于快速检测。我们g在提供ー种用于禽蛋中极低数量受亚致死性损伤沙门氏菌检测的增菌培养液，在达到具有选择性、不便非目标菌增长的同时，克服禽蛋蛋清对沙门氏菌的抑制作用，具有显著的沙门氏菌增菌效果，避免禽蛋以及禽蛋制品中极低数量受亚致死性损伤沙门氏菌漏检，且能够使极低数量受亚致死性损伤沙门氏菌快速富集，并在ー个步骤内快速检出的目的。为了实现上述专利技术目的，本专利技术的具体技术方案如下 ー种用于禽蛋中沙门氏菌检测的增菌培养液，其特征在于包括以下原料组分组成 按照IL所述增菌培养液中的含量计蛋白胨7 llg/L氯化钠5 8g/L 磷酸氢ニ钠7 9g/L磷酸ニ氢钾O. 5 lg/L煌绿6 8 mg/L 牛胆盐O. 5 lg/L萘唳酸10 14mg/L 脱脂牛奶粉15 40g/L。本专利技术在上述基本技术方案的基础上，其原料组分配比更优选的为 按照IL所述增菌培养液中的含量计蛋白胨10. Og/L 氯化钠5. Og/L 磷酸氢ニ钠9. Og/L 磷酸ニ氢钾I. 5g/L煌绿6.08mg/L牛胆盐I. Og/L 萘啶酸13.88mg/L 脱脂牛奶粉20g/L。一种用于禽蛋中沙门氏菌检测的增菌培养液的制备方法，其特征在干包括以下エ艺步骤 A、基础液配制 将蛋白胨、氯化钠、磷酸氢ニ钠、磷酸ニ氢钾、牛胆盐、脱脂牛奶粉加入到蒸馏水中，搅拌均匀，煮沸溶解，再加蒸馏水调节PH值为7. O 7. 4，灭菌得到基础液备用； B、萘啶酸溶液配制 将萘啶酸充分溶解于O. 05mol/L的NaOH溶液，溶解后再加入O. 05mol/L的NaOH溶液定容得到萘啶酸溶液； C、煌绿溶液配制 将煌绿充分溶解于蒸馏水中，溶解后再加入蒸馏水定容，灭菌后得到煌绿溶液备用； D、增菌培养液配制 按照先后顺序将步本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于禽蛋中沙门氏菌检测的增菌培养液，其特征在于：包括以下原料组分组成：按照1L所述增菌培养液中的含量计：蛋白胨？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？7～11g/L氯化钠？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？5～8g/L磷酸氢二钠？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？7～9g/L磷酸二氢钾？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？0.5～1g/L煌绿？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？6～8？mg/L牛胆盐？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？0.5～1g/L萘啶酸？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？10～14mg/L脱脂牛奶粉？？？？？？？？？？？？？？15～40g/L。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孙群，李婉丽，余洋，祝国强，邓鹜远，马沁沁，温文婷，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：
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