【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术提供了纯化和利用无机焦磷酸酶的系统、方法、试剂和试剂盒。更具体地，本专利技术涉及无机焦磷酸酶的有效分离及其在核酸扩增和测序技术中的用途。
技术介绍
许多扩增和测序策略采用聚合酶用于将核苷酸种类(nucleotide species)添加至新合成的核酸分子。通常理解的是，对于聚合酶掺入的每种核苷酸种类，焦磷酸分子(通常也被称为“PPi”)和氢分子被释放进反应环境中。这可以是采用非常小的反应环境的扩增和测序策略中的非常重要的考虑，因为经过聚合酶的许多掺入事件，PPi分子在反应环境中聚集，达到一定浓度，在该浓度时PPi对聚合酶掺入核苷酸种类的能力具有抑制作用。 此外，存在依赖于检测PPi释放的能力的测序技术。例如，可以采用测定释放的PPi的相对量或PPi浓度的改变来表示与模板分子的序列位置的核苷酸种类互补的核苷酸种类的掺入。检测或测定的模式可以包括反应环境中PH的改变，或者通过产生对于每个掺入的核苷酸分子的光的光子的酶级联反应，这通常被称为“焦磷酸测序(Pyrosequencing) ”。在本例子中,测定的PPi的程度与掺入的核苷酸分子的数量是直接成比例的...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：D格拉塔洛，KH林克，L皮诺，P桑冈，SG舍诺伊，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：
国别省市：
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