用于增加在巴氏毕赤酵母中生产的治疗性糖蛋白上的N-糖基化位点占据的方法技术

描述了一种与在没有如本文所述修饰的重组宿主细胞中生产的治疗性糖蛋白的N-糖基化位点占据相比，增加在如本文所述修饰且遗传地工程改造成表达糖蛋白的重组宿主细胞中生产的治疗性糖蛋白的N-糖基化位点占据的方法。具体地，所述方法会在编码内源OTase复合物的宿主细胞基因的表达存在下，提供过表达异源单亚基寡糖基转移酶的重组宿主细胞，在具体实施方案中，所述异源单亚基寡糖基转移酶能够在功能上抑制酵母寡糖基转移酶(OTase)复合物的至少一种必需蛋白(例如，硕大利什曼原虫STT3D蛋白)的致死突变表型。所述方法可用于在低等真核生物细胞(诸如酵母和丝状真菌)中和在高等真核生物细胞(诸如植物和昆虫细胞和哺乳动物细胞)中生产具有增加的N-糖基化位点占据的治疗性糖蛋白。

【技术实现步骤摘要】
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技术介绍
(I)专利
本专利技术涉及与在没有根据本专利技术修饰的重组宿主细胞中生产的治疗性糖蛋白的N-糖基化位点占据相比，増加在根据本专利技术修饰的且遗传地工程改造成表达糖蛋白的重组宿主细胞中生产的异源糖蛋白的N-糖基化位点占据的方法。具体地，本专利技术提供了过表达异源单亚基寡糖基转移酶的重组宿主细胞，在具体实施方案中，所述异源单亚基寡糖基转移酶能够在有宿主细胞的内源寡糖基转移酶(OTase)复合物存在下在功能上抑制酵母寡糖基转移酶(OTase)复合物的至少ー种必需蛋白的致死突变表型，也提供了使用这些宿主细胞来生产异源糖蛋白的方法。(2)相关技术的描述生产重组人蛋白质的能力已经引起人类健康护理的重大进步，并且仍然是活跃的药物发现领域。许多治疗性蛋白需要在翻译后将聚糖添加至蛋白质的特定天冬酰胺残基(N-糖基化)上，以确保适当的结构-功能活性以及随后在人血清中的稳定性。对于在人类中治疗性用途，糖蛋白需要人样N-糖基化。可模拟人样糖蛋白加工的哺乳动物细胞系(例如，中国仓鼠卵巣(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：N塞图拉曼，崔秉权，B普林斯，M米尔，TA斯塔黑姆，
申请(专利权)人：默沙东公司，
类型：
国别省市：