马铃薯Y病毒阳性对照品的制备方法技术

马铃薯Y病毒阳性对照品的制备方法，它涉及病毒阳性对照品的制备方法。它为了解决现有PVY病毒检测试剂盒中的阳性对照价格昂贵、保质期短以及不利于推广普及的问题。方法：一、将PVY繁殖寄主叶片和提取缓冲液混合后进行研磨，过滤得病毒汁液；二、明胶和提取缓冲液混合加热至融化，加入蔗糖，融化后倒入病毒汁液中混匀，再倒入青霉素瓶中，然后冻干，得马铃薯Y病毒的冻干粉即完成。本发明专利技术制备的马铃薯Y病毒阳性对照品价格低，是进口价格的1/3；保质期达3年以上，DAS-ELISA检测结果值达2.000以上；配合黑龙江省农业科学院生产的PVY病毒检测试剂盒使用，利于推广普及。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒阳性对照品的制备方法。
技术介绍
马铃薯是中国第四大粮食作物，然而整体生产水平却低于世界平均水平，其中最重要的原因就是病毒病严重影响了马铃薯的产量和品质。马铃薯Y病毒(Potato virus Y，PVY)是危害马铃薯的重要病毒之一，分布于世界各个马铃薯产区，可通过蚜虫以非持久方式传播，导致马铃薯退化、产量降低，严重时减产可达80%以上。特别是PVY在茄科作物上往往与马铃薯X病毒(PVX)发生协生作用，加剧了病毒病的危害，造成巨大的经济损失。 目前最有效的防治措施是推广脱毒种薯并加强检测工作，有效的检测方法是保证生产安全的重要措施，国内外常规检测普遍采用病毒检测试剂盒，应用DAS-ELISA技术进行PVY检测，实验检测结果需要用病毒的阳性对照即马铃薯Y病毒冻干粉来判断结果是否准确，对实验能否顺利开展起着至关重要的作用，而该试剂盒全世界只有不足十家企业销售，目前国内PVY病毒检测几乎完全依赖进口试剂盒，价格昂贵，限制了检测技术的推广普及，从而限制了马铃薯种薯质量的提高和产业的发展。另外，进口试剂盒存在以下缺点(I)价格昂贵进口试剂盒中的阳性对照价格昂贵，每瓶需要30本文档来自技高网...

【技术保护点】
马铃薯Y病毒阳性对照品的制备方法，其特征在于马铃薯Y病毒阳性对照品的制备方法按以下步骤实现：一、将10g的PVY繁殖寄主叶片和120mL的提取缓冲液混合后进行研磨，然后用双层纱布过滤，得到病毒汁液；二、将0.06～0.12g的明胶和80mL的提取缓冲液混合，加热至融化，然后加入6～10g的蔗糖，继续加热至蔗糖融化，倒入病毒汁液中混匀，再倒入青霉素瓶中，每瓶加入1～2ml，盖上瓶塞并放入冷冻干燥机中抽干，得到马铃薯Y病毒的冻干粉，即完成马铃薯Y病毒阳性对照品的制备；其中步骤一中提取缓冲液每100mL由20g的PVP？40000、8.0g的NaCL、0.2g的KH2PO4、2.9g的Na2HPO4...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张威，白艳菊，高艳玲，范国权，申宇，李学湛，孟宪欣，卢娜，
申请(专利权)人：黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所，
类型：发明
国别省市：